染色質(zhì)組蛋白乙?；瘜?duì)FIGF誘導(dǎo)的胰島素基因及其轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探索C-Fos誘導(dǎo)生長(zhǎng)因子(C-Fos-Induced Growth Factor，F(xiàn)IGF)對(duì)胰島素基因(Insulin)及其轉(zhuǎn)錄因子神經(jīng)源素3（neurogenin3，Ngn3）、肌腱膜的纖維肉瘤腫瘤基因系物A(Fibrosar-coma oncogene family，protein A,MafA)的表達(dá)水平的影響，并進(jìn)一步在表觀遺傳學(xué)上探索組蛋白乙?；谶@一胰島素基因表達(dá)體系中的調(diào)節(jié)作用。
　　方法：培養(yǎng)小鼠胎肝細(xì)胞

2、系（BNL），用帶FIGF基因的腺病毒載體轉(zhuǎn)染小鼠胎肝細(xì)胞，設(shè)置綠色熒光蛋白空載體腺病毒為對(duì)照組;Real time-PCR檢測(cè)FIGF基因相對(duì)表達(dá)量，胰島素基因及轉(zhuǎn)錄因子Ngn3、MafA基因的相對(duì)表達(dá)量；用帶FIGF基因的腺病毒載體轉(zhuǎn)染小鼠胎肝細(xì)胞，設(shè)置綠色熒光蛋白空載體腺病毒為對(duì)照組;提取核蛋白應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)組蛋白乙酰化酶（HAT）活性水平，組蛋白去乙酰化酶（HDAC）活性水平，提取全基因組組蛋白檢測(cè)組蛋白H3、組蛋白H4

3、乙?；?。
　　結(jié)果：RT-PCR結(jié)果顯示：實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組和空白組FIGF基因相對(duì)表達(dá)量顯著增高差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），實(shí)驗(yàn)組胰島素基因及轉(zhuǎn)錄因子Ngn3、MafA較對(duì)照組有不同程度的增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Western Blot結(jié)果顯示轉(zhuǎn)錄因子Ngn3、MafA蛋白表達(dá)，在檢測(cè)組蛋白乙?；福℉AT）活性，組蛋白去乙酰化酶（HDAC）活性，組蛋白H3/H4乙?；胶蟀l(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組HAT活性較對(duì)照

4、組和空白組明顯增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），實(shí)驗(yàn)組HDAC活性較對(duì)照組和空白組明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），組蛋白H3/H4乙?；綄?shí)驗(yàn)組高于對(duì)照組和空白組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：FIGF基因在小鼠胎肝細(xì)胞中高表達(dá)，激活胰島素基因，胰島素轉(zhuǎn)錄因子Ngn3、MafA不同程度高表達(dá)，說(shuō)明FIGF在胰島素基因表達(dá)過(guò)程中調(diào)控胰島素基因及其轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)；HAT活性增高說(shuō)明FIGF促進(jìn)組