生化綜述-心肌肌鈣蛋白ctni檢測方法及其影響因素和臨床應(yīng)用進(jìn)展

1、綜述題目：目：cTnIcTnI檢測方法及其影響因素和臨床應(yīng)用進(jìn)展檢測方法及其影響因素和臨床應(yīng)用進(jìn)展姓名：名：學(xué)號：號：系別：別：年級：級：專業(yè)：業(yè)：二○一○一二年二年三月2并受主觀因素影響。目前應(yīng)用較多的是電化學(xué)發(fā)光免疫檢測法(ECLIA)和酶聯(lián)熒光分析法(ELFA)。在美國，第一個(gè)被FDA認(rèn)證用于檢測cTnI的是DadeStratuslI檢測法(采用兩種cTnIMAb，自動化雙位點(diǎn)熒光酶免疫定量檢測，參考值≤0.35btg／L，鑒別值

2、1.5ug／L【4】。美國臨床化學(xué)學(xué)會(AACC)目前正在完善cTnI檢測的標(biāo)準(zhǔn)。2.12.1電化學(xué)發(fā)光免疫檢測法電化學(xué)發(fā)光免疫檢測法(ECLIA)(ECLIA)該法應(yīng)用雙抗體一步法夾心酶免疫分析法，以化學(xué)發(fā)光劑為底物，用單克隆抗cTnIIgG抗體包被的磁性微粒作為固相載體(例如，用樹脂、磁性微粒、聚苯乙烯珠等作為載體)把抗體與小分子顆粒結(jié)合，提高抗體的捕捉能力，增加了吸咐表面積，可在磁場中與液體分離，簡化了操作步驟。提高了靈敏度，節(jié)省

3、了出報(bào)告的時(shí)間。2.22.2酶聯(lián)熒光分析法酶聯(lián)熒光分析法(ELFA)(ELFA)【5】此法系法國生物梅里埃公司近來開發(fā)的一種新技術(shù)(VIDTnI)，在eTnI檢測中具有操作簡便、自動化程度高、測定快速、結(jié)果準(zhǔn)確可靠等特點(diǎn)。VIDTnI檢測試劑盒采用一步免痰熒光法，以連接ALP的抗eTnI單克隆抗體包被固相載體(SPR)，在血清樣品被吸人SPR管內(nèi)與包被的cTnI通過洗滌被除去。底物4一甲基傘形酮磷酸鹽在ALP催化下生成熒光產(chǎn)物4一甲基傘

4、形酮，在450ilm檢測熒光強(qiáng)度，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較自動計(jì)算血清e(cuò)TnI濃度。3.3.影響因素影響因素3.13.1肝素肝素對于自動化免疫分析儀，推薦應(yīng)用肝素化血漿而不是血清，可省去凝血所需的時(shí)間。但Gerhardt等【6】發(fā)現(xiàn)肝素影響cTnI檢測。Katrukha等【7】認(rèn)為肝素可通過改變cTn分子結(jié)構(gòu)或直接覆蓋cTn的抗原決定簇而降低其免疫反應(yīng)性。WH0推薦的肝素濃度是：肝素鈣4O～60IU／ml(固態(tài)肝素化)及8～12IU／ml(液態(tài)肝

5、素化)。3.23.2類風(fēng)濕因子類風(fēng)濕因子(RF)(RF)RF、嗜異性抗體及自身抗體等因素常干擾免疫反應(yīng)，從而影響夾心免疫檢測法。Krahn等【8】研究了1OO個(gè)樣本，RF均大于100IU／ml(Beckman公司AR—RAY分析儀，正常參考值80IU／ml時(shí)，會使cTnI測定出現(xiàn)假陽性結(jié)果。3.33.3溶血溶血以往認(rèn)為在血紅蛋白2000mg／dL時(shí)并不影響酶聯(lián)免疫檢測法，但也強(qiáng)調(diào)樣本避免嚴(yán)重溶血。Wenk【10】采用多克隆山羊抗體，通過

6、該法檢測cTnI后發(fā)現(xiàn)：溶血指數(shù)越高，對血漿中cTnI檢測影響越大。當(dāng)溶血指數(shù)300(血紅蛋白約為300mg／dL，相當(dāng)于肉眼可見的中等溶血)時(shí)，未發(fā)現(xiàn)干擾。標(biāo)本離心后能減少但不能完全消除這種影響。說明并非僅血紅蛋白影響結(jié)果，溶血后的細(xì)胞膜碎片、蛋白及其它未知的因素也干擾檢測。3.43.4慢性腎臟衰竭慢性腎臟衰竭Li等【11】用Stratus系統(tǒng)檢測了79個(gè)不伴心肌損害臨床表現(xiàn)的終末期腎病病人，有7個(gè)病人cTnI增高慢性腎臟衰竭對血清c