現(xiàn)代分子生物學試題及答案

1、現(xiàn)代分子生物學習題及答案現(xiàn)代分子生物學習題及答案一、填空題1基因工程是70年代發(fā)展起來的遺傳學的一個分支學科。2基因工程的兩個基本特點是：(1)分子水平上的操作分子水平上的操作，(2)細胞水平上的表達細胞水平上的表達3基因克隆中三個基本要點是：克隆基因的類型克隆基因的類型；受體受體的選擇；載體的選擇的選擇；載體的選擇4通過比較用不同組合的限制性內(nèi)切核酸酶處理某一特定基因區(qū)域所得到的不同大小的片段，可以構建顯示該區(qū)域各限制性內(nèi)切核酸酶切點

2、相互位置的限制性酶切圖譜限制性酶切圖譜。5限制性內(nèi)切核酸酶是按屬名和種名相結合的原則命名的，第一個大寫字母取自屬名的第一個字母，第二、三兩個字母取自_種名的前兩個字母，第四個字母則用株名表示。6部分酶切可采取的措施有：(1)減少酶量；(2)縮短反應時間；(3)增大反應體積等。7第一個分離的限制性內(nèi)切核酸酶是EcoK；而第一個用于構建重組體的限制性內(nèi)切核酸酶是_Ecl。8限制性內(nèi)切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的來源不同，但識別的序列都是GG

3、CC，它們屬于異源同工酶。9DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_枯草桿菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子量為76kDa的大片段，具有兩種酶活性：(1)53合成酶的活性；(2)35外切核酸酶的活性。10為了防止DNA的自身環(huán)化，可用堿性磷酸酶去雙鏈DNA_5’端的磷酸基團。11EGTA是_Ca2_離子螯合劑。12測序酶是修飾了的T7DNA聚合酶，它只有_53合成酶的活性，而沒有35外切酶的活性。13切口移位(nicktranslat

4、ion)法標記DNA的基本原理在于利用DNA聚合酶I的__5一3外切核酸酶和5一3合成酶24野生型的M13不適合用作基因工程載體，主要原因是沒有合適的限制性內(nèi)切核酸酶識別位點和選擇標記。25黏粒(cos)是質(zhì)粒—噬菌體雜合載體，它的復制子來自質(zhì)粒、COS位點序列來自?噬菌體，最大的克隆片段達到45kb。26野生型的?噬菌體DNA不宜作為基因工程載體，原因是：(1)分子量大，(2)酶的多切點，(3)無選擇標記27噬菌粒是由質(zhì)粒和噬菌體DN

5、A共同構成的，其中來自質(zhì)粒的主要結構是復制區(qū)，而來自噬菌體的主要結構是IG區(qū)。28?噬菌體載體由于受到包裝的限制，插入外源DNA片段后，總的長度應在噬菌體基因組的75％～105％的范圍內(nèi)。29在分離DNA時要使用金屬離子螯合劑，如EDTA和檸檬酸鈉等，其目的是螯合Mg2離子，抑制核酸酶的活性。30用乙醇沉淀DNA時，通常要在DNA溶液中加人單價的陽離子，如NaCl和NaAc，其目的是中和DNA分子的負電荷，增加DNA分子間的凝聚力。31

6、引物在基因工程中至少有4個方面的用途：(1)合成探針；(2)合成cDNA；(3)用于PCR反應；(4)進行序列分析32Clark發(fā)現(xiàn)用TaqDNA聚合酶得到的PCR反應產(chǎn)物不是平末端，而是有一個突出堿基末端的雙鏈DNA分子。根據(jù)這一發(fā)現(xiàn)設計了克隆PCR產(chǎn)物的T—載體。33在cDNA的合成中要用到S1核酸酶，其作用是切除在第二鏈合成時形成的發(fā)夾環(huán)34乙醇沉淀DNA的原理是乙醇使DNA分子脫水。35假定克隆一個編碼某種蛋白質(zhì)的基因，必須考慮