《生物化學(xué)》考研復(fù)習(xí)重點(diǎn)大題

1、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生入學(xué)考試復(fù)習(xí)資料《生物化學(xué)》重點(diǎn)大題1簡述gaff定律的主要內(nèi)容。答案：(1）不同物種生物的DNA堿基組成不同，而同一生物不同組織、器官的DNA堿基組成相同。(2）在一個生物個體中，DNA的堿基組成并不隨年齡、營養(yǎng)狀況和環(huán)境變化而改變。(3）幾乎所有生物的DNA中，嘌呤堿基的總分子數(shù)等于嘧啶堿基的總分子數(shù)，腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)的分子數(shù)量相等，鳥嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的分子數(shù)量相等，即A＋G=T＋C。這些重要的

2、結(jié)論統(tǒng)稱為gaff定律或堿基當(dāng)量定律。2簡述DNA右手雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的主要內(nèi)容。答案：DNA右手雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的主要特點(diǎn)如下：(1）DNA雙螺旋由兩條反向平行的多核苷酸鏈構(gòu)成，一條鏈的走向?yàn)?′→3′，另一條鏈的走向?yàn)?′→5′兩條鏈繞同一中心軸一圈一圈上升，呈右手雙螺旋。(2）由脫氧核糖和磷酸構(gòu)成的骨架位于螺旋外側(cè)，而堿基位于螺旋內(nèi)側(cè)。(3）兩條鏈間A與T或C與G配對形成堿基對平面，堿基對平面與螺旋的虛擬中心軸垂直。(4）雙螺旋每旋轉(zhuǎn)

3、一圈上升的垂直高度為3.4nm(即34），需要10個堿基對，螺旋直徑是2.0nm。(5）雙螺旋表面有兩條深淺不同的凹溝，分別稱為大溝和小溝。3簡述DNA的三級結(jié)構(gòu)。答案：在原核生物中，共價閉合的環(huán)狀雙螺旋DNA分子，可再次旋轉(zhuǎn)形成超螺旋，而且天然DNA中多為負(fù)超螺旋。真核生物線粒體、葉綠體DNA也是環(huán)形分子，能形成超螺旋結(jié)構(gòu)。真核細(xì)胞核內(nèi)染色體是DNA高級結(jié)構(gòu)的主要表現(xiàn)形式，由組蛋白H2A、H2B、H3、H4各兩分子形成組蛋白八聚體，D

4、NA雙螺旋纏繞其上構(gòu)成核小體，核小體再經(jīng)多步旋轉(zhuǎn)折疊形成棒狀染色體，存在于細(xì)胞核中。4簡述tRNA的二級結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系。答案：已知的tRNA都呈現(xiàn)三葉草形的二級結(jié)構(gòu)，基本特征如下：(1）氨基酸臂，由7bp組成，3′末端有CCAOH結(jié)構(gòu)，與氨基酸在此縮合成氨基酰tRNA，起到轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的作用(2）二氫尿嘧啶環(huán)(DHU、I環(huán)或D環(huán)），由8～12個核苷酸組成，以含有5，6二氫尿嘧啶為特征(3）反密碼環(huán)，其環(huán)中部的三個堿基可與mRNA的三聯(lián)體

5、密碼子互補(bǔ)配對，在蛋白質(zhì)合成過程中可把正確的氨基酸引入合成位點(diǎn)(4)額外環(huán)，也叫可變環(huán)，通常由3～21個核苷酸組成(5)TψC環(huán)，由7個核苷酸組成環(huán)，和tRNA與核糖體的結(jié)合有關(guān)。5簡述真核生物mRNA3′端polyA尾巴的作用。答案：真核生物mRNA的3′端有一段多聚腺苷酸(即polyA)尾巴，長約20～300個腺苷酸。該尾巴與mRNA由細(xì)胞核向細(xì)胞質(zhì)的移動有關(guān)，也與mRNA的半衰期有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，polyA的長短與mRNA壽命呈正相關(guān)

6、，剛合成的mRNA壽命較長，“老”的mRNA壽命較短。6簡述分子雜交的概念及應(yīng)用。答案：把不同來源的DNA(RNA）鏈放在同一溶液中進(jìn)行熱變性處理，退火時，它們之間某些序列互補(bǔ)的區(qū)域可以通過氫鍵重新形成局部的DNADNA或DNARNA雙鏈，這一過程稱為分子雜交，生成的雙鏈稱雜合雙鏈。DNA與DNA的雜交叫做Southern雜交，DNA與RNA雜交叫做Nthern雜交。核酸雜交已被廣泛應(yīng)用于遺傳病的產(chǎn)前診斷、致癌病原體的檢測、癌基因的檢測

7、和診斷、親子鑒定和動或酶處在活性狀態(tài)。此外，GSH的巰基還有嗜核特性，能與外源的嗜電子毒物如致癌劑或藥物等結(jié)合，從而阻斷這些化合物與機(jī)體DNA、RNA或蛋白質(zhì)結(jié)合，以保護(hù)機(jī)體免遭毒物損害。13.簡述蛋白質(zhì)變性與沉淀的關(guān)系。答案：蛋白質(zhì)沉淀和變性的概念是不同的。沉淀是指在某些因素的影響下，蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象而變性是指在變性因素的作用下蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)被破壞，生物活性喪失，理化性質(zhì)發(fā)生改變。變性的蛋白質(zhì)溶解度明顯降低，易結(jié)絮、凝固而沉

8、淀但是沉淀的蛋白質(zhì)卻不一定變性，如加熱引起的蛋白質(zhì)沉淀是由于蛋白質(zhì)熱變性所致，而硫酸銨鹽析所得蛋白質(zhì)沉淀一般不會變性。14.概述蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)測定的一般程序。答案：蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)測定的一般程序?yàn)椋孩贉y定蛋白質(zhì)(要求純度必須達(dá)到97%以上）的相對分子質(zhì)量和它的氨基酸組成，推測所含氨基酸的大致數(shù)目。②測定多肽鏈N末端和C末端的氨基酸，從而確定蛋白質(zhì)分子中多肽鏈的數(shù)目。然后通過對二硫鍵的測定，查明蛋白質(zhì)分子中二硫鍵的有無及數(shù)目。如果蛋白質(zhì)分子

9、中多肽鏈之間含有二硫鍵，則必須拆開二硫鍵，并對不同的多肽鏈進(jìn)行分離提純。③用裂解點(diǎn)不同的兩種裂解方法(如胰蛋白酶裂解法和溴化氰裂解法)分別將很長的多肽鏈裂解成兩套較短的肽段。④分離提純所產(chǎn)生的肽段，用蛋白質(zhì)序列儀分別測定它們的氨基酸序列。⑤應(yīng)用肽段序列重疊法確定各種肽段在多肽鏈中的排列次序，即確定多肽鏈中氨基酸排列順序。⑥如果有二硫鍵，需要確定其在多肽鏈中的位置。15.試論蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)與空間結(jié)構(gòu)的關(guān)系。答案：①以RNA酶變性與復(fù)性實(shí)驗(yàn)

10、、有活性牛胰島素的人工合成為例證實(shí)蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)決定其空間結(jié)構(gòu)。②Anfinsen發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI）能加速蛋白質(zhì)正確二硫鍵的形成如RNA酶復(fù)性的過程是十分緩慢的，有時需要幾個小時，而PDI在體外能幫助變性后的RNA酶在2min內(nèi)復(fù)性。分子伴侶在細(xì)胞內(nèi)能夠幫助新生肽鏈正確組裝成為成熟的蛋白質(zhì)。由此可見，蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的形成既決定于其一級結(jié)構(gòu)，也與分子伴侶、蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶等助折疊蛋白的助折疊作用密不可分。16.概述凝膠過濾

11、法測蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的原理。答案：層析過程中，混合樣品經(jīng)過凝膠層析柱時，各個組分是按分子量從大到小的順序依次被洗脫出來的并且蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的對數(shù)和洗脫體積之間呈線性關(guān)系。因此，將幾種已知相對分子質(zhì)量(應(yīng)小于所用葡聚糖凝膠的排阻極限）的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)混合溶液上柱洗脫，記錄各種標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的洗脫體積然后，以每種蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的對數(shù)為縱坐標(biāo)，以相對應(yīng)的洗脫體積為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線再將待測蛋白質(zhì)溶液在上述相同的層析條件下上柱洗脫，記錄其洗