光動力學療法對腫瘤細胞信號傳導通路作用的研究進展

1、<p>　　光動力學療法對腫瘤細胞信號傳導通路作用的研究進展</p><p>　　【摘要】 　　本文通過綜述光動力作用對腫瘤細胞信號傳導通路影響的研究成果，進一步分析光動力作用抗腫瘤治療的可能作用機理，對光動力作用的多種可能作用機制深入進行探討。 </p><p>　　【關鍵詞】 光動力療法；腫瘤；信號傳導</p><p>　　光動力學療法（photo

2、dynamic therapy，PDT），又被稱為光輻照療法（photoradiation therapy）或光化學療法（photochemotherapy）。該方法是利用光敏劑分子接受特定波長的光能后通過光化學反應和能量傳遞過程將光能轉化為分子內(nèi)能，在有氧條件下，產(chǎn)生多種活性氧物質(zhì)（ractive oxygen species，ROS），包括單線態(tài)氧（1O2）、氧自由基、羥自由基、過氧化氫等，從而對蛋白質(zhì)、核酸和脂類大分子產(chǎn)生破壞作用

3、，使細胞的結構和功能受到嚴重影響，導致細胞凋亡或死亡，而起到治療作用。該作用有兩種類型：一種是光敏劑通過電子或質(zhì)子（e或H+）的轉移引起自由基的氧化還原反應，稱為Ⅰ型光動力反應；另一種是光敏劑將能量傳遞給周圍的氧分子使其成為單線態(tài)氧，稱為Ⅱ型光動力反應。PDT因其能相對特異地選擇性殺傷腫瘤細胞，對健康組織損傷小，很少發(fā)生并發(fā)癥以及毒副反應小等優(yōu)點，使其成為一項非常有前途的腫瘤治療方法。PDT作用的效果與所用光敏劑類型、照射條件、組織氧

4、代謝狀態(tài)、細胞類型有關，其中光敏劑在細胞內(nèi)的結合位點因為決定了PDT的最初損傷部位而最為重要［1</p><p>　　細胞信號傳導幾乎涵蓋了所有的生命現(xiàn)象，是生物體具有的一種十分重要的生理功能。細胞信號傳導的異常變化在細胞癌變過程中起著十分重要的作用，信號傳導系統(tǒng)的缺陷和異?；罨c腫瘤發(fā)生、發(fā)展及預后的關系已成為腫瘤分子生物學研究熱點，同時通過調(diào)控信號傳導途徑治療腫瘤也成為人們?nèi)找骊P注的焦點［2］。多年前人們研究

5、就發(fā)現(xiàn)，PDT不僅能導致細胞凋亡或死亡，還能激發(fā)細胞產(chǎn)生逃避反應。細胞在亞致死劑量的物理或化學因素作用下產(chǎn)生的逃避反應會導致相關基因和應激蛋白的表達變化，并從而逃避打擊［3］。PDT等外界刺激因素作用后會導致細胞多種信號傳導系統(tǒng)產(chǎn)生變化，例如磷酸化與去磷酸化，鈣離子或cAMP等第二信使活性的改變，蛋白酶的激活等。同時，PDT還可以改變粘附因子、細胞因子［4］的表達。盡管已經(jīng)有不少相關研究，但PDT對細胞信號傳導系統(tǒng)產(chǎn)生影響的作用機制尚不

6、清楚。同時許多都是體外實驗，在體實驗有待進一步研究，多種實驗模型和光敏劑的使用使問題顯得更為復雜。本文擬就PDT對腫瘤細胞信號傳導影響的研究進展作一綜述，主要討論PDT對細胞誘導死亡或產(chǎn)生逃避反應的影響，這其中，光敏劑在細胞中的位置、細胞的類型、光動力作用的劑量</p><p><b>　　1 線粒體</b></p><p>　　許多脂溶性光敏劑結合并作用于線粒體膜

7、，如酞菁Pc4、苯并卟啉衍生物單酸環(huán)A（BPDMA）等，它們在多種疾病中的應用得到廣泛研究。多種光敏劑被發(fā)現(xiàn)與線粒體膜上的苯二氮卓受體有高親和力。Kessel D等報道，光敏劑定位于線粒體膜比定位于溶酶體膜或其它漿膜更快的導致細胞凋亡［5］。其機制已部分被人們了解。當光敏劑結合于線粒體膜，PDT會激活特定的信號傳導通路，首先是細胞色素c從線粒體進入胞漿。Date M等［6］報道，PADS31介導PDT對人肝癌細胞作用后，可以立刻觀察

8、到細胞色素c進入胞漿。同樣的結果也在SiPc介導PDT對人黑色素瘤細胞作用或5ALA介導PDT對HL60白血病細胞作用后觀察到。這些光敏劑都定位在線粒體膜。研究還發(fā)現(xiàn)，PDT能導致線粒體膜電位的降低，這可能與線粒體滲透轉運大通道的開放有關。線粒體滲透轉運大通道的開放導致線粒體膜去極化，引起Ca2+的釋放以及細胞色素c的丟失［7］。但目前這種通道尚未能完全為人們了解，細胞色素c的釋放機制以及它與線粒體膜電位的關系也尚需進一步研究。<

9、/p><p>　　PDT作用以后細胞色素c進入胞漿會導致多種后果。Varnes等觀察到加入外源性細胞色素c能夠逆轉Pc4介導PDT作用對細胞呼吸的抑制作用。表明PDT主要作用于線粒體膜而對呼吸鏈的主要組成沒有損傷，能通過ATP減少導致細胞壞死，也能通過激活半胱天冬酶（caspase）途徑導致細胞凋亡。釋放出的細胞色素c能形成dATP、凋亡激活因子1（APAF1）以及前半胱天冬酶9的復合體，它能促使前半胱天冬酶9的激

10、活并最終導致前半胱天冬酶3的激活［8］。半胱天冬酶3是細胞凋亡過程的關鍵酶，和大量其它蛋白的釋放有關，如DNA斷裂因子。因為人黑色素瘤細胞在SiPc介導PDT作用后的主要死亡模式是凋亡，Barge J推斷，細胞色素c的流失是這個過程的關鍵啟動因子。這與Granville的研究結果是一致的，細胞色素c的釋放導致caspase3，caspase6，caspase7等多種半胱天冬酶的激活。此外，Barge J還發(fā)現(xiàn)了caspase8的延遲激活

11、，而caspase8與CD95/FAS介導的獨立的凋亡途徑有關。Takahashi H也報道［9］，ATXS10介導PDT對NHK細胞作用后，可以觀察到細胞</p><p>　　在凋亡過程中，caspases3激活導致許多與維持細胞正常結構和功能的蛋白因子結構被破壞。如QLT0074 介導PDT作用導致人角質(zhì)化細胞多聚腺苷酸聚合酶（PARP）的斷裂。PARP是一種將多聚二磷酸腺苷轉運給組氨酸和其它核蛋白，有助D

12、NA修復的酶，它的結構被破壞將導致功能喪失并最終導致細胞的死亡。盡管半胱天冬酶調(diào)節(jié)的凋亡過程是PDT導致細胞死亡的主要模式，但并不是不可替代的。Xue LY等［10］研究發(fā)現(xiàn)，在Pc4介導PDT對轉染有caspase3基因的MCF7c3細胞和無caspase3表達的MCF7細胞的作用中，都觀察到了細胞色素c從線粒體中釋放，但只在MCF7c3細胞中看到caspase3和PARP的表達。同時MCF7c3細胞在PDT作用后6小時就可以觀察到D

13、NA碎片的出現(xiàn)，而MCF7細胞則在PDT作用后20小時才看到DNA的大碎片，其凋亡的程度也遠小于MCF7c3細胞。MCF7c3細胞較MCF7細胞對光敏作用更敏感，但是兩種細胞在克隆試驗中卻對光動力殺傷有相同的敏感性。研究表明，Pc4介導PDT作用中，從最初的線粒體損傷到細胞死亡是一個很快的過程，caspase3介導的凋亡過</p><p>　　Bcl2蛋白位于線粒體膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜和核膜上，是抗凋亡蛋白的一種，對調(diào)

14、節(jié)許多細胞抗凋亡誘導的敏感性有重要的作用。許多人對通過結合于線粒體膜的光敏劑介導的PDT作用中Bcl2及相類似蛋白的調(diào)節(jié)作用進行了研究。Vantieghem A等［11］研究發(fā)現(xiàn)，在血卟啉介導PDT作用過程中，Bcl2的表達能顯著抑制細胞色素c的釋放，caspase3的激活以及PARP的破壞，減少細胞凋亡，但不能減少PDT導致的細胞壞死。在PDT介導的凋亡過程中，表達Bcl2的細胞存在有caspase依賴的細胞色素c釋放相關的反饋

15、調(diào)節(jié)機制。BclxL蛋白與Bcl2蛋白類似，位于線粒體膜，能夠調(diào)節(jié)細胞色素c的釋放從而對PDT誘導的凋亡有調(diào)節(jié)作用。</p><p>　　目前，盡管人們對線粒體進行了更多研究，但有關光敏劑與線粒體膜相結合后導致細胞色素c釋放的機制仍未能完全闡清?？赡艿臋C制是細胞色素c的釋放導致caspase9和caspase3的相應級聯(lián)反應并最終導致凋亡發(fā)生，而Bcl2蛋白家族通過影響細胞色素c的釋放調(diào)節(jié)這一過程。 凋亡與

16、細胞徹底死亡之間也尚有許多不清楚的地方，這可能與我們過于依賴一些簡單的短期實驗有關，染料排斥、線粒體活力下降等細胞部份功能的喪失可能在短期實驗中給了我們細胞活力喪失的結論。Xue LY的研究提示我們在檢測細胞死亡的實驗中采用細胞克隆試驗對檢測細胞活力更為可靠，這需要我們改進實驗方法進一步研究。</p><p><b>　　2 質(zhì)膜</b></p><p>　　脂溶性

17、的光敏劑最主要的結合位置就是質(zhì)膜，這也使質(zhì)膜成為PDT作用的重要目標。同時許多信號傳導通路也是由質(zhì)膜開始的，因而質(zhì)膜是PDT干預細胞信號傳導系統(tǒng)的重要作用部位。</p><p>　　很早就有研究發(fā)現(xiàn)，PDT作用以后能迅速激活磷脂酶C（PLC）和磷脂酶A2（PLA2）。這兩種膜結合蛋白酶的激活和細胞的許多信號傳導過程有關。近期研究發(fā)現(xiàn)，PDT能通過PLC激活以及隨后的三磷酸肌醇（IP3）合成導致細胞內(nèi)Ca2+濃度升

18、高［12］。Ca2+濃度升高也可導致PLA2的激活，而PLA2的激活被證明與PDT作用后的凋亡發(fā)生相關。</p><p>　　Hsieh YJ等［13］報道，血卟啉在A341細胞主要結合于質(zhì)膜及高爾基體膜，PDT作用后能促使多種信號通路激活，包括活性氧物質(zhì)的迅速形成，CJun氨基末端激酶的激活，caspase3的延遲激活及PRAP的斷裂，線粒體膜電位的喪失等。其中，作者認為活性氧物質(zhì)的形成最為重要。對于PDT作

19、用于質(zhì)膜，人們也有不同的報道，Kessel D［14］報道，在PDT治療中，當PDT作用直接作用于亞細胞結構時會廣泛產(chǎn)生細胞凋亡，當細胞質(zhì)膜為PDT作用的主要目標時，會因為caspase3選擇性的被光敏作用損傷導致凋亡的延遲。</p><p><b>　　3 蛋白激酶</b></p><p>　　磷酸化是蛋白翻譯后調(diào)節(jié)的重要方式，蛋白激酶的磷酸化與去磷酸化在信號傳導

20、通路的調(diào)節(jié)中廣泛存在。目前有關光動力作用以后信號傳導通路中關鍵信號蛋白激酶磷酸化只有少數(shù)幾個通路得到了研究。</p><p>　　目前研究較多的信號放大途徑是通過生長因子介導的有絲分裂原途徑。配體與生長因子受體的結合導致細胞內(nèi)絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）家族中細胞外信號調(diào)節(jié)激酶（ERK）的激活，產(chǎn)生有絲分裂或不同的結果。EGFR與細胞生長和細胞周期的調(diào)節(jié)有關，屬于受體酪氨酸激酶家族，在配體激活后能自動磷酸化。A

21、hmad N等［15］報道，在Pc4介導PDT對人皮膚癌細胞（A341）的體內(nèi)治療實驗中，觀察到表皮生長因子受體（EGFR）蛋白表達受到抑制的同時，卻可以觀察到EGFR的酪氨酸磷酸化。作者從而推測，EGFR抑制劑能夠提高光動力作用的療效。在Pc4介導光動力對A431細胞作用中，當細胞存活率小于1%時，表皮生長因子刺激磷酸化的作用被完全阻斷。但是，大劑量PDT作用時，由于其它許多非特異因素的作用，上述研究發(fā)現(xiàn)對凋亡產(chǎn)生的作用尚不完全清楚。

22、</p><p>　　在有絲分裂原途徑中有關ERK的研究有不同的報道。Assefa發(fā)現(xiàn)PDT能不可逆的抑制EGF誘導的ERＫ２激活。而Tong Z等［16］報道，多種腫瘤細胞在PDT作用后，均可以觀察到MAPK家族中ERKs的激活表達，使用MAPK或ERK抑制劑可以顯著降低光動力作用后腫瘤細胞的存活率。研究發(fā)現(xiàn)PDT作用還可以誘導細胞內(nèi)絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶（MKP1）的表達，其表達與ERK的激活表達相關。實

23、驗結果表明，腫瘤細胞在光動力作用后ERK的激活可以減輕光毒性作用，ERK的激活表達受MKP1調(diào)節(jié)。也有發(fā)現(xiàn)PDT對ERK沒有影響。Tao等報道，BPD介導PDT對PAM212細胞作用中，對ERK活性沒有影響。</p><p>　　人們對MAPK信號途徑的激活進行了更多的研究，在相同條件下，PDT往往能夠激活應激激活蛋白激酶（SAPK）/CJun氨基末端激酶（JNK）和p38/HOG1通路。SAPK/JNK和p

24、38/HOG1在細胞對包括單態(tài)氧在內(nèi)的外界刺激的應激反應中有重要作用。不論是通過cjun或是Bcl2的磷酸化，多種實驗模型發(fā)現(xiàn)SAPK/JNK通路與凋亡誘導有關。Tong Z等［17］報道血卟啉衍生物介導PDT作用30分鐘，人成纖維細胞即可出現(xiàn)JNK1及P38的激活表達，并能持續(xù)3小時，同時細胞存活率升高。而用表達顯性負性突變p38的腺病毒進行轉染的人成纖維細胞及Hela細胞則在PDT作用后細胞存活率下降。Assefa Z等研究了P

25、DT作用中SAPK/JNK激活對凋亡誘導的影響。通過對Hela轉染SAPK顯性負性抑制因子SEKAL和TAM67，或使用p38通路特異抑制劑PD169316，PDT的光敏感作用顯著提高。作者因而總結在血卟啉介導PDT作用中，SAPK/JNK和p38通路的激活對Hela細胞有抗凋亡的保護作用。Hendrickx N等［18］報道在血卟啉衍生物介導光動力抗腫瘤作用中，可以觀</p><p>　　SAPK/JNK通

26、路的上游調(diào)節(jié)因子尚不清楚?，F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)的一個可能的活性調(diào)節(jié)因子是神經(jīng)酰胺。但目前在PDT誘導的凋亡中，SAPK/JNK通路激活的作用尚不清楚。在實驗模型中，PDT誘導凋亡是一個快速的過程，SAPK/JNK通路的激活可能沒有相關。目前，與PDT誘導凋亡相關的通路尚未完全建立。</p><p>　　在Pc4介導PDT對人前列腺癌LnCAP細胞作用中，發(fā)現(xiàn)胞漿酪氨酸蛋白激酶Etk/Bmx的表達對細胞凋亡有抑制作用。酪氨酸激

27、酶Etk/Bmx是磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）的作用底物，與涉及細胞分化及生存的多個信號傳導通路有關。三種相關細胞株進行了對比試驗：表達低水平Etk的LNCaP細胞，高表達轉染野生型Etk的LNCaP細胞以及轉染顯性負性表達Etk的LNCaP細胞。發(fā)現(xiàn)光敏作用與Etk表達水平負相關，表明Etk在PDT誘導凋亡中對LNCaP細胞有保護作用，能降低細胞凋亡率，并且Etk活性受PI3K調(diào)節(jié)，而加入PI3抑制劑能增加DNA的斷裂。。顯然，即使

28、如Pc4介導PDT作用中所發(fā)現(xiàn)，凋亡直接因線粒體損傷誘導，也同樣有其它和凋亡有關的信號傳導通路的存在。Zhuang S等［19］報道，PDT作用所產(chǎn)生單態(tài)氧是誘導細胞凋亡的主要因素。同時還發(fā)現(xiàn)，PDT作用產(chǎn)生的其它細胞毒性活性氧物質(zhì)如過氧化氫等在引起細胞死亡的同時還會刺激細胞生存相關的信號傳導通路的激活，可以通過受體型酪氨酸蛋白激酶的激活可以激活Akt/蛋白激酶B信號傳導通路促進細胞生存。進一步還發(fā)現(xiàn)其是由PI3激酶激活所致，抑制P&l

29、t;/p><p>　　此外，Games ER等［20］報道，腫瘤細胞在鋁鈦菁介導PDT作用后，可以觀察到NO的表達增加，而NO對腫瘤細胞抗光動力效應具有保護作用。實驗發(fā)現(xiàn)，在腫瘤細胞培養(yǎng)體系中加入NO可以提高PDT作用后的細胞存活率。進一步實驗研究發(fā)現(xiàn)，這種保護作用與cGMP信號傳導通路的激活相關，蛋白激酶G（PKG）抑制劑能夠阻斷PDT作用后NO對腫瘤細胞的保護作用。實驗結果表明，腫瘤細胞在光動力作用后可能通過PK

30、G激活導致NO產(chǎn)生增多，從而可以減少凋亡發(fā)生。Jiang F等報道，在光動力抗腫瘤治療中，在不同的血卟啉衍生物濃度、不同的光照能量密度條件下，蛋白激酶C（PKC）抑制劑均可以明顯提高光動力效應的細胞毒性作用。</p><p>　　如上所述，PDT能夠改變一些重要調(diào)節(jié)蛋白的磷酸化水平，但是引發(fā)和維持磷酸化的直接作用很難確定?？赡艿慕忉屖桥c紫外線誘導的EGFR磷酸化類同，活性中心含有半胱氨酸殘基的磷酸酶被氧化劑或烷化

31、劑失活，并導致不同的酪氨酸激酶的磷酸化。PDT對磷酸化的調(diào)節(jié)作用也有類似的過程和隨后的相應結果。</p><p><b>　　4 應激蛋白</b></p><p>　　有研究發(fā)現(xiàn)PDT能誘導與細胞應激反應有關的應激蛋白的表達，但相關研究還很少。有報道在體內(nèi)和體外實驗中，均觀察到BPD介導PDT作用后，氧化應激導致熱休克蛋白（HSP）及其它應激蛋白的表達。HSP是細胞

32、產(chǎn)生逃避反應中一種重要的應激蛋白，Kessel D等發(fā)現(xiàn)PDT能導致HSP磷酸化，抑制其磷酸化會提高細胞凋亡率；5ALA介導PDT作用能促進HL60細胞中HSP60的表達。Luna MC等報道，PDT導致的氧化應激是熱休克蛋白等應激蛋白基因表達的轉錄誘導因素，研究人員通過試驗發(fā)現(xiàn)，PDT介導的氧化應激能夠選擇性的使與HSP啟動子重組的基因?qū)崿F(xiàn)表達。</p><p>　　葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白（GRP）是另一類非常重要的

33、應激誘導蛋白。它能促進細胞內(nèi)鈣的貯藏并增強細胞對化療藥物的抵抗能力。早期研究發(fā)現(xiàn)，當卟啉類光敏劑孵育時間為16小時，PDT作用后可以導致GRP及HSP的表達，當孵育時間只有1小時，則PDT作用后沒有上述應激蛋白的表達，這可能也是有的研究在結果存在差異的主要原因。同時Fisher AM還發(fā)現(xiàn)，細胞在PDT作用后對阿霉素的耐受增強，提示PDT能誘導不同的應激產(chǎn)物提高細胞對毒性作用的耐受能力。但也有相反的報道，Morgan J等發(fā)現(xiàn)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上

34、與鈣結合的葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白（GRP）在氧化應激下可誘導產(chǎn)生，這種應激蛋白被大家認為是細胞的一種保護因子。但在VBBO介導PDT對人上皮癌細胞作用中，GRP使細胞對PDT更為敏感，GRP的上調(diào)能夠增強PDT的作用。這種差別可能與使用不同的光敏劑和細胞株有關。</p><p>　　多種應激蛋白在PDT作用后會產(chǎn)生或激活，并在細胞的逃避反應中具有重要作用。已有研究發(fā)現(xiàn)cAMP能夠調(diào)節(jié)HSP的表達，但還未能對PDT作用后，

35、各信號通路間有關逃避反應的直接聯(lián)系進行研究。在PDT治療中，腫瘤細胞的逃避反應對臨床結果有重要的意義，臨床可以通過藥物調(diào)節(jié)特定的應激蛋白來提高PDT治療效果。</p><p>　　總之，前面提到了光動力作用對細胞信號傳導的多種影響，有的已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了較為明確的機制，但更多的通路還不為人們掌握，需要進行更多與臨床模式相關的研究。人們在研究中普遍發(fā)現(xiàn)，細胞對PDT的不同反應與細胞類別、光敏劑類型、光敏劑作用部位、細胞的氧

36、代謝狀態(tài)、PDT作用強度的不同有關，光敏作用不同強度會導致不同甚至相反的生物效應，或者導致細胞產(chǎn)生不同的死亡方式。我們可以推測，隨著對PDT作用后有關細胞逃避反應機制的深入了解，對PDT作用后信號傳導通路的協(xié)同干預能夠明確的提高PDT的作用療效。</p><p><b>　　【參考文獻】</b></p><p>　?。郏保?Moan J,Peng Q． An outl

37、ine of the hundredyear history of PDT［Ｊ］． Anticancer Res,2003,23（5A）: 3591～3600．</p><p>　?。郏玻?Greenberger JS,Kagan VE,Pearce L,ｅｔ　ɑｌ． Modulation of redox signal transduction pathways in the treatment of can

38、cer［Ｊ］． Antioxid Redox Signal,2001,3（3）: 347～359．</p><p>　　［３］ Akimoto T,Nonaka T,Ishikawa H,ｅｔ　ɑｌ． Genistein,a tyrosine kinase inhibitor,enhanced radiosensitivity in human esophageal cancer cell lines in vi

39、tro: possible involvement of inhibition of survival signal transduction pathways［Ｊ］．Int J Radiat Oncol Biol Phys,2001,50（1）:195～201．</p><p>　?。郏矗?Du H,Bay BH,Mahendran R,ｅｔ　ɑｌ． Endogenous expression of inter

40、leukin8 and interleukin10 in nasopharyngeal carcinoma cells and the effect of photodynamic therapy［Ｊ］． Int J Mol Med,2002,10（1）: 73～76．</p><p>　　［５］ Kessel D,Luo Y． Photodynamic therapy: a mitochondrial in

41、ducer of apoptosis［Ｊ］． Cell Death Differ,1999,6（1）:28～35．</p><p>　　［６］ Date M,Fukuchi K,Namili Y,ｅｔ　ɑｌ． Therapeutic effect of photodynamic therapy using PADS31 and diode laser on human liver cancer cells［Ｊ］

42、． Liver Int,2004,24（2）: 142～148．</p><p>　　［７］ Grebenova D,Kuzelova K,Smetana K,ｅｔ　ɑｌ． Mitochondrial and endoplasmic reticulum stressinduced apoptotic pathways are activated by 5aminolevulinic acidbased ph

43、otodynamic therapy in HL60 leukemia cells［Ｊ］． Photochem Photobiol,2003,69（2）: 71～85．</p><p>　?。郏福?Philchenkov AA． Caspases as regulators of apoptosis and other cell functions［Ｊ］． Biochemistry,2003,68（4）: 365

44、～376．</p><p>　　［９］ Takahashi H,Itoh Y,Miyauchi Y,ｅｔ　ɑｌ． Activation of two caspase cascades,caspase 8/3/6 and caspase 9/3/6,during photodynamic therapy using a novel photosensitizer,ATXS10（Na）,in normal huma

45、n keratinocytes［Ｊ］． Arch Dernatol Res,2003,295（6）: 242～248．</p><p>　?。郏保埃軽ue LY,Chiu SM,Oleinick NL． Photodynamic therapyinduced death of MCF7 human breast cancer cells: a role for caspase3 in the late st

46、eps of apoptosis but not for the critical lethal event［Ｊ］． Exp Cell Res,2001,263（1）: 145～155．</p><p>　　［１１］Vantieghem A,Xu Y,Declercq W,ｅｔ　ɑｌ． Different pathways mediate cytochrome c release after photodynam

47、ic therapy with hypericin［Ｊ］． Photochem Photobiol,2001,74（2）: 133～142．</p><p>　?。郏保玻軧ragin DE,Kolosov MS,Uzdensky AB． Photodynamic inactivation of isolated crayfish neuron requires protein kinase C,PI 3kina

48、se and Ca2+［Ｊ］． Photochem Photobiol,2003,70（2）: 99～105．</p><p>　　［１３］Hsieh YJ,Wu CC,Chang CJ,ｅｔ　ɑｌ． Subcellular localization of Photofrin determines the death phenotype of human epidermoid carcinoma A431 cel

49、ls triggered by photodynamic therapy: when plasma membranes are the main targets［Ｊ］． J Cell Physiol,2003,194（3）: 363～375．</p><p>　　［１４］Kessel D． Relocalization of cationic porphyrins during photodynamic ther

50、apy［Ｊ］． Photochem Photobiol,2002,1（11）:837～840．</p><p>　?。郏保担軦hmad N,Kalka K,Mukhtar H． In vitro and in vivo inhibition of epidermal growth factor receptortyrosine kinase pathway by photodynamic therapy［Ｊ］．

51、 Oncogene,2001,20（18）: 2314～2317．</p><p>　?。郏保叮軹ong Z，Singh G，Rainbow AJ． Sustained activation of the extracellular signalregulated kinase pathway protects cells from photofrinmediated photodynamic therapy

52、［Ｊ］． Cancer Res,2002,62（19）: 5528～5535．</p><p>　?。郏保罚軹ong Z，Singh G，Valerie K，ｅｔ　ɑｌ． Activation of the stressactivated JNK and p38 MAP kinases in human cells by Photofrinmediated photodynamic therapy［Ｊ］． P

53、hotochem Photobiol,2003,71（13）: 77～85．</p><p>　?。郏保福軭endrickx N,Volanti C,Moens U,ｅｔ　ɑｌ． Upregulation of cyclooxygenase2 and apoptosis resistance by p38 MAPK in hypericinmediated photodynamic therapy of

54、human cancer cells［Ｊ］． Biol Chem,2003,278（52）: 52231～52239．</p><p>　?。郏保梗軿huang S,Kochevar． Singlet oxygeninduced activation of Akt/protein kinase B is independent of growth factor receptors［Ｊ］． Photochem P

55、hotobiol,2003,78（4）: 361～371．</p><p>　?。郏玻埃軬ames ER,Almeida RD,Carvalho AP,ｅｔ　ɑｌ． Nitric oxide modulates tumor cell death induced by photodynamic therapy through a cGMPdependent mechanism［Ｊ］． Photochem Phot