奶牛泌乳相關激素周期性變化規(guī)律及激素對乳腺外植體中基因表達的影響.pdf

1、為了揭示激素對乳腺泌乳的調(diào)控作用及奶牛產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要性，同時也為全面系統(tǒng)的揭示奶牛泌乳功能的分子生物學機制尋找突破點，以提供系統(tǒng)的理論依據(jù)和試驗根據(jù)，本課題研究了奶牛整個生產(chǎn)周期中泌乳相關激素的變化規(guī)律以及激素與產(chǎn)奶性能之間的相關性。此外，還對各激素單獨或聯(lián)合作用對奶牛乳腺外植體基因表達的影響進行了研究。
　　 試驗一：選取3頭相同泌乳生理的荷斯坦奶牛定期采取血樣及乳樣，采用放射性免疫法測定血清中各激素含量，并通過乳成分自動分析

2、儀對乳成分進行分析。結(jié)果表明，奶牛整個生產(chǎn)周期中血清中E2含量變化顯著(P<0.0001)。產(chǎn)前E2含量處于較高水平，產(chǎn)后直到干奶期則相對處于較低水平；血清中P4含量變化顯著(P<0.05)。產(chǎn)前P4含量處于較高水平，到產(chǎn)后15天一直處于較低水平。泌乳40天至干奶期P4含量則一直處于較高水平；血清中PRL含量變化顯著(P<0.0001)。其中，圍產(chǎn)期血清中PRL含量比較穩(wěn)定，圍產(chǎn)期至泌乳40天含量急速下降，泌乳40天至270天顯著增加，

3、干奶期則保持穩(wěn)定的低水平；血清中T4含量變化顯著(P<0.0001)。圍產(chǎn)期T4含量整體處于較低水平，泌乳期至干奶期T4含量則一直處于較高水平并表現(xiàn)出一定的增長趨勢；血清中GH含量變化不顯著(P>0.05)；血清中INS含量變化顯著(P<0.0001)。其中，圍產(chǎn)期血清中INS含量一直處于較低水平，泌乳40天至270天含量較高，干奶期有一定程度的下降；血清中G含量變化顯著(P<0.001)。其中，產(chǎn)前血清中G含量較高，產(chǎn)后處于較低水平，

4、泌乳40天至270天含量基本穩(wěn)定，干奶期則有一定程度的上升；血清中IGF-I含量變化顯著(P<0.05)。其中，圍產(chǎn)期血清中IGF-I含量呈先增后減趨勢，泌乳40天至270天含量基本穩(wěn)定，干奶期則同樣呈先增后減的趨勢。奶牛泌乳期間產(chǎn)奶量、乳蛋白和乳糖變化顯著(P<0.0001)，而乳脂含量變化不顯著(P>0.05)。產(chǎn)奶量與血清中E2、PRL及G之間呈顯著性負相關(P<0.05)。乳蛋白與血清中E2、P4及G之間呈顯著性正相關(P<0.

5、05)。乳脂與血清中P4之間呈顯著性負相關(P<0.05)。乳糖與血清中E2、PRL、IGF-I及G之間呈顯著性負相關(P<0.01)。上述結(jié)果表明，奶牛泌乳周期中，八種激素均呈特征性變化：相關分析表明：產(chǎn)奶量主要受E2、PRL及G影響；乳脂主要受P4影響；乳蛋白主要受E2、P4及G影響；乳糖主要受E2、PRL、G及IGF-I影響。
　　 試驗二：體外培養(yǎng)奶牛乳腺組織，并進行不同的激素處理，采用RT-PCR相對定量方法檢測乳腺外

6、植體中相關基因的表達。結(jié)果表明，培養(yǎng)基內(nèi)不同濃度的催乳素處理對ACC、FAS及STAT5mRNA的表達產(chǎn)生顯著影響(P<0.01)。生理濃度下三者表達量均最低，低于生理濃度時表達量較高，當PRL濃度為生理濃度2倍時其表達量最高；IGFBP5mRNA的表達在低于生理濃度時表達量最高(P<0.05)，但對(αs1-casein合成沒有顯著影響。不同濃度的生長激素處理對ACC、FAS及STAT5mRNA的表達影響顯著(P<0.01)，高于生理

7、濃度2倍時其表達量顯著下降，但隨著濃度升高表達量稍有增加；生理濃度3倍時顯著抑制αs1-caseinmRNA的表達(P<0.05)，但隨后其表達受到抑制。不同濃度的氫化可的松處理僅對STAT5及IGFBP5mRNA的表達產(chǎn)生顯著影響(P<0.05)，其中低于生理濃度時顯著抑制STAT5mRNA的表達，隨著濃度升高其表達較平穩(wěn)，IGFBP5mRNA的表達則在低于生理濃度處于最高水平。PRL、GH及H不同組合處理中，GH+H處理后ACC、F