雞新城疫—慢性呼吸道病二聯(lián)油乳劑滅活疫苗的研制.pdf

1、雞敗血支原體(Mycoplasma gallisepticum，MG)是一種廣泛存在而危害嚴(yán)重的雞呼吸道傳染病，感染后可影響雞的產(chǎn)肉和產(chǎn)蛋率下降，并能并發(fā)和繼發(fā)其他疫病。它給養(yǎng)雞業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。非典型新城疫(Newcastle disease，ND)和MG混合感染的情況占了很大比重。同時(shí)，NDV和MG的活苗在使用時(shí)常出現(xiàn)干擾。我國(guó)雞群呼吸道中普遍存在MG感染，而造成如：NDV弱毒疫苗的免疫效率低下以及加重了經(jīng)呼吸道途徑免疫的各種

2、疫苗的副作用。 基于我國(guó)臨床實(shí)際遇到的問(wèn)題，我國(guó)目前迫切需要使用聯(lián)苗進(jìn)行雞群呼吸道綜合征的綜合防治。本研究著重研制能夠?qū)崿F(xiàn)同時(shí)控制ND和MG感染的新型二聯(lián)油乳劑滅活疫苗。這將對(duì)ND和MG的有效控制具有重要的實(shí)踐意義。 本研究引進(jìn)的La Sota株，經(jīng)復(fù)壯后能在雞胚良好繁殖，在雞胚中連傳5代，雞胚液中HA滴度均達(dá)1:512以上，EIDso達(dá)109.5以上，說(shuō)明毒株穩(wěn)定。從對(duì)該毒株系統(tǒng)鑒定的結(jié)果看，其腦內(nèi)接種致病指數(shù)(ICP

3、I)、對(duì)雞胚平均死亡時(shí)間(MDT)、對(duì)雞胚毒力、紅細(xì)胞凝集價(jià)、病毒含量、安全性、免疫原性、特異性等都符合ND低毒力活疫苗株的要求。通過(guò)透射電鏡觀察滅活前后的NDV病毒粒子，滅活前后病毒粒子基本形態(tài)無(wú)明顯差異。 本研究引進(jìn)的MG中等強(qiáng)毒株S6經(jīng)無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)基傳代后，CFU達(dá)5×109以上。經(jīng)固體培養(yǎng)、凝集試驗(yàn)、血凝試驗(yàn)、免疫熒光試驗(yàn)、Westem-blot和透射電鏡檢測(cè)、致病性試驗(yàn)、免疫原性鑒定，結(jié)果表明：S6毒株符合中等強(qiáng)毒株特征

4、，適合用于MG疫苗株。上述各代次種子液經(jīng)純凈性檢驗(yàn)，均無(wú)其他微生物污染，可用于疫苗種毒使用。 用經(jīng)鑒定的La Sota毒種接種SPF雞胚，收獲尿囊液，0.1％甲醛滅活后制得La Sota毒株抗原；用S6毒株在增菌培養(yǎng)基中培養(yǎng)72h，計(jì)數(shù)后，用0.2％甲醛進(jìn)行滅活。按一定的生產(chǎn)工藝方法乳化，制成ND-MG二聯(lián)油乳劑滅活疫苗。 在SPF雞群中使用該二聯(lián)苗后2個(gè)月內(nèi)，試驗(yàn)雞群均處于健康狀態(tài)，且試驗(yàn)組體重明顯比攻毒組高，抗體滴度