紫貽貝和蝦夷扇貝雌核發(fā)育二倍體的遺傳學(xué)研究.pdf

1、紫貽貝(Mytilus galloprovincialis)和蝦夷扇貝(Patinopecten yessoensis)都是我國著名的海水養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)貝類，本實驗探索了紫貽貝和蝦夷扇貝雌核發(fā)育發(fā)生的最適宜條件，并對其遺傳學(xué)特性進(jìn)行了相關(guān)的研究。
　　1.紫貽貝雌核發(fā)育二倍體的遺傳學(xué)研究
　　本實驗首先探索誘導(dǎo)紫貽貝(Mytilus galloprovincialis)雌核發(fā)育二倍體的最佳條件，實驗中，首先對既定濃度為1.0×10

2、7個/mL的精液進(jìn)行紫外線的梯度照射，發(fā)現(xiàn)在紫外線強度為2561μW/(cm2·s)的照射條件下，持續(xù)照射60s是最合適的照射劑量。在梯度照射實驗中發(fā)現(xiàn)，隨著紫外線照射時間的增加，卵裂率、早期胚胎存活率和D形幼蟲發(fā)生率的數(shù)值總體呈下降的趨勢，且有Hertwig效應(yīng)出現(xiàn)，在照射時間達(dá)到55s以后，D形幼蟲發(fā)生率變?yōu)?。在受精后25min，用濃度0.5μg/mL的細(xì)胞松弛素B持續(xù)處理受精卵20min以阻止第二集體的排出，成功的誘導(dǎo)出紫貽貝的

3、第二極體抑制型的雌核發(fā)育二倍體。微衛(wèi)星分析表明,雌核發(fā)育二倍體誘導(dǎo)成功率為100％。本實驗研究了6個微衛(wèi)星位點在兩個雌核發(fā)育二倍體家系中的分離情況，兩個家系中雌核發(fā)育二倍體的誘導(dǎo)成功率均為100%。觀測到的8組基因型標(biāo)記均符合孟德爾遺傳規(guī)律（p＜0.05）。8個微衛(wèi)星位點中有1個存在無效等位基因。通過雜合后代的比率計算出重組率y的范圍是0.24到0.67，平均值為0.38。在假設(shè)完全干涉的前提下，微衛(wèi)星-著絲粒距離范圍為12cM-34c

4、M。
　　2.蝦夷扇貝雌核發(fā)育二倍體的遺傳學(xué)研究
　　誘導(dǎo)蝦夷扇貝(Patinopecten yessoensis)雌核發(fā)育二倍體采用紫外線照射使精子遺傳物質(zhì)失活，用細(xì)胞松弛素B(CB)處理受精卵抑制第二極體釋放。用強度為2561μW/(cm2·s)的紫外線(254nm)照射不同時間的精子與正常卵子受精。結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨照射時間的增加，卵裂率、早期胚胎存活率和D形幼蟲發(fā)生率總體呈下降趨勢，照射50s為最適宜的照射劑量。受精后45m

5、in，用濃度0.5μg/mL的CB處理受精卵20min抑制第二極體的釋放，誘導(dǎo)出蝦夷扇貝雌核發(fā)育二倍體。微衛(wèi)星分析表明,雌核發(fā)育二倍體誘導(dǎo)成功率為100%。本實驗篩選了32個微衛(wèi)星位點在3個雌核發(fā)育二倍體家系中的分離情況，通過半四分子分析的研究進(jìn)一步進(jìn)行著絲粒圖譜的構(gòu)建。三個家系中雌核發(fā)育二倍體的誘導(dǎo)成功率分別為100%，100%和96%。觀測到的53組基因型標(biāo)記中有51組在經(jīng)過順序邦弗朗尼校正后符合孟德爾遺傳規(guī)律（p＜0.05）。32