利用熒光原位雜交技術(shù)進行胚胎種植前遺傳學診斷的研究及初步臨床應(yīng)用.pdf

1、目的:1.建立安全、可行的胚胎活檢方法;2.建立準確、可靠、穩(wěn)定的可以應(yīng)用于胚胎種植前遺傳學診斷的FISH技術(shù);3.利用熒光原位雜交技術(shù)對多元核發(fā)育而成的胚胎進行研究,分析多元核發(fā)育而成的胚胎染色體的異常性;4.利用熒光原位雜交技術(shù)對發(fā)育遲緩和胚胎碎片多的胚胎進行21號染色體分析,探討21號染色體非整倍性與胚胎形態(tài)學指征的相關(guān)性;5.將熒光原位雜交技術(shù)應(yīng)用于臨床的胚胎種植前遺傳學診斷.結(jié)論:1.酸性Tyrode's打孔法活檢成功率高于機

2、械切割打孔法,而且酸性Tyrode's打孔法操作較機械切割打孔法簡單易掌握,決定在以后實驗中以酸性Tyrode's打孔活檢方法為主要的活檢方法.2.在所選用和改進的方法步驟進行熒光原位雜交,結(jié)果顯示,其方法穩(wěn)定、雜交率高,與國外報告文獻結(jié)果相似,可以作為PGD研究和臨床應(yīng)用的方法.3.IVF受精和ICSI受精的3PN胚胎發(fā)育有差異,證明IVF受精和ICSI受精的3PN中的原核的來源是不同,導(dǎo)致胚胎第一次卵裂的方式也不同.IVF受精和IC

3、SI受精的3PN胚胎的性染色體的異常率非常高,正常二倍體出現(xiàn)的比例極低,分別為:3.17﹪和2.94﹪.因此,在胚胎移植時多原核發(fā)育成的胚胎必須淘汰 4.胚胎卵裂的速度和胚胎碎片的多少與胚胎內(nèi)部染色體的非整倍性存在著相關(guān)性.目前在不損傷胚胎的前提下還不能對胚胎的染色體進行全面的分析時,在選擇胚胎移植,有必要選擇形態(tài)和卵裂速度都正常的胚胎.5.利用FISH技術(shù)進行PGD治療9周期,獲得2例妊娠,說明該中心也具備了開展PGD臨床應(yīng)用的基礎(chǔ)和