候選腫瘤抑制基因RASSF1A在鼻咽癌中的遺傳學和表觀遺傳學研究.pdf

1、中山大學博士學位論文候選腫瘤抑制基因RASSFlA在鼻咽癌中的遺傳學和表觀遺傳學研究GeneticandEpigeneticStudiesonCandidateTumorSuppressorGeneRASSFlAinNasopharyngealCarcinoma博士生：潘志剛導師：曾益新教授專業(yè)：腫瘤學2004年11月廣州妖選腫瘸抑制蛙肉RASSFIA辦鼻珥q癌中的遺傳學和表艦遺傳掌研究2個以上位點的改變，3例在RASSFlA基因僅發(fā)現(xiàn)

2、～個核苷酸位點的變異。在35個變異位點中，GCTl33TCT(AIal33Se0的改變在2例組織和匹配外周血中檢測到，說明在此位點可能發(fā)生種系細胞的改變或是個少見的多態(tài)：其余的34個改變位點均只在萍響癌組織中發(fā)現(xiàn)，而在匹配的外周血樣本中沒有發(fā)現(xiàn)，洗明這些改變都為體細胞突變。在檢測到的35個突變中，3個為無義突變(即終止密碼子突變)，26個為錯義突變，2個發(fā)生單堿基缺失造成移碼突變，其余的四個為同義突變(沉默突變)而不改變氨基酸序列。3個

3、無義突變分別位于密碼子145(CAG—TAG)、253(CAATAA)和293(TGG—TGA)，并且分布在3、l1和17號鼻咽癌組織標本中。而2個發(fā)生單堿基缺失的移碼突變分別位于密碼予238(GACdeI(C))和294(GACdeI(G))，兩個突變卻分布在同一個鼻咽癌樣本(3號樣本)中。在35個不同位點的變異中，14個改變發(fā)生在外顯子2a口內(nèi)，lO個改變發(fā)生在RASSFIA的第四個外顯子內(nèi)，其余11個變異分別位于外顯子1n(1個)

4、、外顯子3(4個)、外顯子5(2個)和外顯子6(4個)中。其中43％(15／35)的突變發(fā)生在3個假定的功能結(jié)構(gòu)域中，DAG結(jié)構(gòu)域和RA結(jié)構(gòu)域中分別分布有七個不同的變異位點ATM結(jié)構(gòu)域中也有一個變異位點。在檢測到的35個變異中，密碼子117的錯義突變(ACGll7GCG(ThrAla))發(fā)生頻率最高，為17，39／(4／23)，分別在四個不同的鼻咽癌組織樣本中檢測到有同樣的改變。而三個無義突變和兩個單堿基缺失造成的移碼突變，分別只在一個

5、鼻咽癌組織中檢測到，其突變頻率為435％(1／23)。在這些檢測到的突變中，除Alal33Ser變異有其它文獻報道外，細胞株的Leu279Val變異和其它的34個突變均沒有被報道過，這些突變?yōu)榈谝淮卧趶V東人群的鼻咽癌組織中新發(fā)現(xiàn)的突變。這些高頻的體細胞突變，提示突交是RASSFlA基因失活的原因之一，并可能參與了鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展。再利用甲基化特異性PCR(MSP)對23例散發(fā)性鼻咽癌組織進行了RASSFlA基因啟動子區(qū)CpG島的甲基化檢