羊水來源干細胞生物學特性及治療大鼠骨質疏松的初步研究.pdf

1、研究目的：
　　1.復蘇，傳代培養(yǎng)羊水干細胞
　　2.對其生物學特性及向成骨細胞定向分化經(jīng)行研究
　　3.沿尾靜脈注射AFS，對其治療大鼠骨質疏松（OP）效果進行評價
　　材料和方法：
　　1.選取不同代數(shù)的AFS，復蘇，傳代培養(yǎng)。
　　2.觀察細胞的形態(tài)學特性，描述體外培養(yǎng)的AFS的生物學特性
　　3.應用誘導因子誘導AFS定向分化為成骨細胞，并通過一系列方法（細胞形態(tài)，細胞堿性磷酸酶染色，Ⅰ

2、型膠原蛋白測定等）對分化后的細胞進行鑒定
　　4.AFS對大鼠OP治療效果的評價：采用同齡SD大鼠，隨機分為4組，A組正常組，B組模型組，C組制造模型并且一次性注入AFS，D組制造模型并且不同時間兩次注入AFS。除A組灌胃用等量生理鹽水，其余各組連續(xù)14天灌胃RA，同時，C組于灌胃第14天尾靜脈注射AFS，D組于灌胃第7天及第14天尾靜脈注射AFS。實驗過程觀察生活習性及體重變化，骨密度測定，血清骨代謝指標檢測定，測量股骨橫斷面外

3、徑（B）及濕重，骨微觀結構的觀察。
　　結果：
　　1.成功復蘇AFS，誘導分化細胞具有成骨細胞特性
　　2.AFS對大鼠骨質疏松治療效果的評價
　　2.1股骨骨密度（BMD）測定結果顯示：D組實驗前后差異無統(tǒng)計學差異（P>0.05），說明AFS對骨質疏松具有潛在緩解效果
　　2.2血清生化指標檢測結果顯示：D組血鈣，血磷，TRACP實驗前后均無統(tǒng)計學差異（P>0.05），ALP實驗后較前明顯增加，說明AF

4、S對骨質疏松鈣鹽沉積具有潛在治療效果
　　2.3D組大鼠股骨濕重實驗前后無統(tǒng)計學差異，說明 AFS對骨質疏松的修復作用表現(xiàn)在股骨重量上
　　2.4骨薄片Goldner三色法染色顯示：D組可見部分膠原恢復到與A組骨膠原相似的結構
　　結論：
　　1.成功復蘇并傳代不同代數(shù)的AFS，證明其具有定向誘導分化的能力
　　2.RA具有致骨質疏松作用，成功制造出OP模型
　　3.AFS可以抑制血鈣濃度升高，增加鈣