蝎毒對氯化鋰—匹羅卡品誘導大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)模型的海馬GDNF mRNA表達的影響及意義.pdf

1、目的：(1)制作氯化鋰一匹羅卡品誘導大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)(Lithium
　　chloride-Pilocarpine status epileptics，Li-Pilo SE)模型，比較性研究蝎毒(Scorpion venom，SV)及丙戊酸(Valprnica cid，VPA)干預對Li-Pilo
　　SE模型大鼠癲癇發(fā)作的行為學表現(xiàn)的影響及其在該模型中的抗癲癇作用；(2)分析經(jīng)SV、VPA干預后Li-Pilo SE模型大鼠

2、不同時間點海馬的膠質細胞源性神經(jīng)生長因子(Glial cell line-derived neurotroohic
　　factor，GDNF)mRNA表達水平的變化及推測可能的抗癲癇機制。
　　方法：(1)將清潔級健康雄性SD大鼠98只隨機分組，12只為對照組
　　(生理鹽水干預對照組6只和SV對照組6只)。余下86只大鼠進行Li-Pilo SE造模，成功點燃64只(死亡4只)，未點燃成功22只，造模成功并存活大鼠6

3、0只，按隨機原則分為：癲癇模型組，n=20；VPA干預組，n=20；SV干預組，n=20。癲癇模型組、SV、VPA干預組大鼠分別在3h、6h、24h、3d、7d五個時間點處死(每個時間點n=4)；(2)癲癇造模成功后15分鐘，通過灌胃方式對各組進行干預，SV對照組、SV干預組給予SV(0.3mg·kg-1·d-1)干預，VPA干預組給予VPA(120mg·kg-1·d-1)干預，生理鹽水干預對照組、癲癇模型組給予等量的生理鹽水干預，連續(xù)

4、治療7天。觀察7d內各組大鼠的癇性發(fā)作次數(shù)、發(fā)作級別、持續(xù)時間及死亡情況；(3)使用原位雜交技術觀察各組大鼠3h、6h、24h、3d、7d的海馬GDNF mRNA陽性細胞數(shù)表達的變化，并進行組間比較。
　　結果：(1)Li-Pilo SE模型大鼠行為學觀察結果：①大鼠模型點燃成功率為74.42％；模型組發(fā)作級別以Ⅲ～V級為主；②與癲癇模型組比較，SV、VPA干預組癇性發(fā)作級別顯著降低(P<0.05)，發(fā)作總次數(shù)顯著減少(P<0.0

5、5)。(2)Li-Pilo SE模型大鼠干預后各組大鼠海馬GDNF mRNA陽性細胞表達的變化：①生理鹽水干預對照組和SV對照組GDNF mRNA陽性細胞數(shù)在大鼠海馬各區(qū)均有少量表達，但二者之間無統(tǒng)計學差異(P>0.05)；②3h癲癇模型組、SV、VPA干預組GDNF mRNA陽性細胞數(shù)表達較生理鹽水干預對照組呈現(xiàn)增高趨勢，但各組間比較無統(tǒng)計學差異(P>0.05)；6hSV、VPA干預組GDNF mRNA陽性細胞數(shù)表達在CAl、CA3區(qū)

6、較癲癇模型組顯著增加(P<0.05)；三組DG區(qū)GDNF mRNA陽性細胞數(shù)表達量呈現(xiàn)增高趨勢，但兩兩組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；24hSV、VPA干預組GDNF mRNA陽性細胞數(shù)逐漸下調，但仍高于癲癇模型組，兩組與癲癇模型組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。觀察3d及7d，SV、VPA干預組大鼠海馬GDNF mRNA陽性細胞數(shù)在各區(qū)的表達逐漸下調，兩者比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，其中癲癇模型組于3d達峰值。<

7、br>　　結論：(1)SV、VPA對Li-Pilo SE模型大鼠癇性發(fā)作有顯著的抑制作用；(2)Li.Pilo SE模型鼠經(jīng)SV、VPA干預后GDNFmRNA陽性細胞數(shù)在大鼠海馬各區(qū)的表達隨時間的推移呈動態(tài)變化：于3h開始上調，6h左右達峰值，此后表達逐漸下調。癲癇模型組則在3d表達量達峰值，較VPA、SV干預組峰值時間延遲，該結果提示在Li-Pilo SE模型中經(jīng)VPA、SV干預后可能有顯著的腦保護效應，可能是兩者重要的發(fā)揮抗癲癇作用