人胃癌細胞高侵襲亞系的篩選及其生物學特性的研究.pdf

1、南華大學碩士學位論文人胃癌細胞高侵襲亞系的篩選及其生物學特性的研究姓名：周志姣申請學位級別：碩士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：朱建思200705014人胃癌細胞高侵襲亞系的篩選及其生物學特性的研究人胃癌細胞高侵襲亞系的篩選及其生物學特性的研究碩士研究生：周志姣導師：朱建思教授中文摘要目的目的采用Transwell小室篩選胃癌細胞高侵襲亞系并研究其生物學特性。旨在進一步探討胃癌侵襲、轉移機制。方法方法利用Transwell小室篩選高侵

2、襲力胃癌細胞亞系。并通過HE染色觀察母亞兩系細胞形態(tài)；Westernblot檢測兩系細胞Ecadherin和TIMP1蛋白變化并對各條帶進行灰度分析；Transwell檢測細胞遷移能力變化；用免疫組化SABC法觀察母亞兩系細胞NM23H1蛋白表達情況并對其結果進行定性、定位及圖象分析；流式細胞術檢測細胞周期以及繪制細胞生長曲線。結果結果利用Transwell小室反復篩選十次，從MKN28細胞中篩選出高侵襲力胃癌細胞亞系MKN28S10。

3、母亞兩系細胞形態(tài)上無明顯差異，細胞均呈多邊形，大小不均，核漿比大，核圓形、橢圓形；但亞系中Ecadherin、TIMP1蛋白表達同母系相比顯著降低MKN28S10中E–cadherin蛋白表達的相對灰度值為0.420.03，較MKN28細胞（相對灰度值為0.900.04）明顯降低（P＜0.05）而MKN28S10的TIMP1蛋白表達的相對灰度值（0.520..06）較MKN28的TIMP1蛋白表達(0.890.05）明顯降低（P＜0.0

4、5）免疫組織化學結果顯示亞系中NM23H1的表達明顯低于母系(P0.05)亞系NM23H1的平均光密度（71.8118.81）較母系（127.1215.68）明顯降低（P0.05）；顯微鏡下細胞計數(shù)示亞系遷移至膜背面的數(shù)量(100.250.50視野)較母系(61.752.06視野)明顯增多(P0.05)，細胞運動能力明顯增強；細胞周期檢測表明：MKN28S10細胞S期細胞比例為66.7%，高于MKN28細胞在此期的DNA相對含量。而且，