馬凡綜合征植入前遺傳學診斷技術初步研究.pdf

1、【背景】馬凡綜合征是一常染色體顯性遺傳性病,主要累及纖維結締組織,其病變的微纖維主要牽累三個組織器官系統(tǒng):骨骼、眼和心血管,患者常因心血管因素致死,雜合子患者有50％的可能性將這種疾病遺傳給后代,希望通過輔助生殖技術來避免患兒的出生。1978年英國劍橋的Steptoe和Edwards教授通力合作,應用體外受精-胚胎移植技術孕育了世界上第一例“試管嬰兒”。30多年來,隨著生殖醫(yī)學及其相關學科研究的不斷深入,輔助生殖技術應用日漸廣泛,植入前

2、遺傳學診斷逐漸推廣,減少了基因類疾病的遺傳,實現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育。
　　【目的】初步建立馬凡綜合征的胚胎植入前遺傳學診斷技術體系。
　　【方法】
　　1.通過對一例馬凡綜合征患者家系進行調查,找到致病突變位點及其在家系的遺傳情況。
　　2.對已經(jīng)證實為馬凡綜合患者的外周血單個核細胞和行IVF/ICSI后夫妻雙方同意捐獻的異常受精和發(fā)育不良的廢棄胚胎,進行外周血單細胞,單卵裂球及MⅡ卵母細胞應用MDA方法進行全基因組擴增,

3、并對擴增產(chǎn)物進行已知突變位點的特異性PCR,產(chǎn)物進行測序,分析測序結果,探討單細胞水平進行突變位點檢測的可行性。
　　3.利用患者自身的SNP和STR位點分析,找到與突變位點連鎖的多態(tài)性遺傳學標記。
　　【結果】
　　1.本例馬凡綜合征患者的突變位點為一新生突變c.2647T>C(Trp883Arg)。
　　2.其外周血單細胞WGA產(chǎn)物進行PCR后測序可以測出與患者外周血DNA測序發(fā)病位點一致的堿基突變。非馬凡綜

4、合征患者胚胎的單卵裂球及MⅡ卵母細胞未測得相應的堿基突變。
　　3.可以采用患者自身的SNP位點及D15S123,D15S978和D15S1028三個STR位點作為遺傳連鎖標記。
　　【結論】
　　1.通過對本例馬凡綜合征患者的家系調查,發(fā)現(xiàn)本患者的突變極有可能為一新生突變。對于新生突變的多態(tài)性連鎖標記尋找需要依靠單倍型分析。
　　2.本研究為探討馬凡綜合征PGD的可行性,根據(jù)單基因遺傳病PGD常用的遺傳學與分子