IL-2、IL-15誘導(dǎo)擴(kuò)增的臍帶血NK細(xì)胞生物學(xué)特性研究.pdf

1、目的:本研究探討臍帶血表型為CD3-CD56+的NK細(xì)胞以及經(jīng)IL-2、IL-15誘導(dǎo)擴(kuò)增后免疫表型與細(xì)胞毒活性等生物學(xué)改變的特性。
　　方法:使用Ficoll淋巴細(xì)胞分離液分離出臍帶血單個(gè)核細(xì)胞,在無血清培養(yǎng)的條件下,分別加入IL-2、IL-15、IL-2聯(lián)合IL-15,在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)14天,流式細(xì)胞儀檢測CD3-CD56+NK細(xì)胞亞群含量以及NK細(xì)胞上CD16、CD62L、NKG2D、NKG2A、NCR44、NCR46、顆粒酶

2、B、穿孔素的表達(dá)情況;并且使用WST-1法檢測培養(yǎng)后的NK細(xì)胞對K562細(xì)胞毒活性。
　　結(jié)果:經(jīng)過14天的培養(yǎng),擴(kuò)增后的IL-2、IL-15、IL-2/IL-15三組NK細(xì)胞分別擴(kuò)增了10.78±2.51、10.42±3.72、10.54±6.24倍,這三組之間無顯著差異;擴(kuò)增后的CD3-CD56+NK細(xì)胞表達(dá)CD16的比例有顯著減低,IL-2和IL-15組之間差異顯著;使用細(xì)胞因子擴(kuò)增后的NK細(xì)胞中CD62L的表達(dá)未曾改變;使

3、用IL-2擴(kuò)增后,NKG2A、NCR46表達(dá)有所下調(diào),而使用IL-15擴(kuò)增后則發(fā)生相反的作用;IL-2和IL-15兩種細(xì)胞因子均有上調(diào)NKG2D、穿孔素、NCR44表達(dá)的作用,且細(xì)胞因子之間也存在差異;IL-15有上調(diào)NK細(xì)胞顆粒酶B的表達(dá)作用;細(xì)胞因子擴(kuò)增的NK細(xì)胞毒活性顯著增高,但細(xì)胞因子之間無顯著差異。
　　結(jié)論:在無血清培養(yǎng)條件下,IL-2和IL-15都能使臍帶血中NK細(xì)胞出現(xiàn)有效地?cái)U(kuò)增。雖然CD3-CD56+NK細(xì)胞經(jīng)過