環(huán)境因素與表觀遺傳學(xué)改變在兒童急性白血病發(fā)病中作用的病例對照研究.pdf

1、研究目的：
　　 1）探討環(huán)境危險(xiǎn)因素與兒童急性白血病發(fā)病的關(guān)系。
　　 2）探討有機(jī)磷農(nóng)藥暴露與兒童急性白血病發(fā)病的關(guān)系。
　　 3）探討表觀遺傳學(xué)改變在兒童急性白血病發(fā)病中的作用機(jī)制。
　　 研究方法：
　　 1） 2009 年1 月～2010 年12 月，將課題研究期間上海市新發(fā)兒童急性白血病患兒99 例納入研究，并將門診/住院非白血病兒童按照性別、年齡（±0.5 歲）進(jìn)行1:1 配對，進(jìn)行

2、病例對照研究。對研究對象監(jiān)護(hù)人進(jìn)行面對面訪談式問卷調(diào)查，收集研究對象基本信息及環(huán)境危險(xiǎn)因素暴露情況。采用單因素和多因素條件logistic 回歸分析急性兒童白血病環(huán)境暴露因素。
　　 2）將第一部分中研究對象的監(jiān)護(hù)人同意留取尿樣者（61 例病例與58 例對照）
　　 納入本部分研究。使用氣相色譜-質(zhì)譜法檢測尿樣中5 種有機(jī)磷農(nóng)藥代謝產(chǎn)物(磷酸二甲酯（dimethyl phophrate，DMP）、磷酸二乙酯(diethy

3、l phosphrate，DEP)、二甲基硫代磷酸酯(dimethyl thiophosphrate，DMTP)、二乙基硫代磷酸酯(diethyl thiophosphrate ， DETP) 和二乙基二硫代磷酸酯(diethyldithiophosphrate，DEDTP))，并使用尿肌酐進(jìn)行濃度校正。使用Wilcoxon 秩和檢驗(yàn)對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)算P 值。
　　 3）將第一部分研究對象的監(jiān)護(hù)人同意留取血樣者（61 例病例與

4、81 例對照）納入本部分研究。檢測血標(biāo)本中10 種特定基因（p16、p73、E-cadherin、MDR-1、DAPK、C-ABL、HSPA4L、GIPC2、PTEN、APAF-1）的啟動子區(qū)CpG 島甲基化水平，使用Wilcoxon 秩和檢驗(yàn)比較病例組與對照組間發(fā)生甲基化改變的基因數(shù)量，使用卡方檢驗(yàn)比較病例組和對照組間不同基因的甲基化水平，計(jì)算P 值。
　　 研究結(jié)果：
　　 1）環(huán)境危險(xiǎn)因素問卷調(diào)查：多因素條件log

5、istic 回歸分析結(jié)果顯示，母親孕前/孕期化學(xué)物質(zhì)接觸史（P=0.019）、兒童感冒次數(shù)（P=0.027）與母親學(xué)歷（P=0.001）等因素與兒童急性白血病發(fā)病有關(guān)：母親孕前/孕期接觸化學(xué)物質(zhì)會增加其子女急性白血病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)；與母親學(xué)歷較低者（高中及中專）相比，學(xué)歷較高的母親（大專及以上）其子女急性白血病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著增加；而兒童感冒次數(shù)增多可能是兒童急性白血病發(fā)病的保護(hù)性因素。我們未發(fā)現(xiàn)放射性物質(zhì)接觸、吸煙飲酒史等其他環(huán)境危險(xiǎn)因素與

6、兒童急性白血病發(fā)病有關(guān)。
　　 2）尿樣有機(jī)磷農(nóng)藥代謝產(chǎn)物水平檢測：Wilcoxon 秩和檢驗(yàn)結(jié)果顯示：病例組中DMP、DEP、DMTP、DETP 和DEDTP 的濃度中位數(shù)（median,M）分別為20.8055、10.3211、32.9870、8.4473、11.5761 μg/g 肌酐，對照組中DMP、DEP、DMTP、DETP 和DEDTP的濃度中位數(shù)（M）分別為4.9582、2.5424、23.8936、2.4653、

7、2.2590 μg/g肌酐。病例組DMP、DEP、DMTP、DETP 和DEDTP 的濃度（M）均顯著高于對照組。
　　 3） DNA 甲基化水平分析：Wilcoxon 秩和檢驗(yàn)結(jié)果顯示：病例組/急性淋巴細(xì)胞白血?。╝cute lymphocytic leukemia, ALL）/急性髓性白血?。╝cute myelocyticleukemia，AML）與對照組間發(fā)生甲基化改變的基因數(shù)量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；使用卡方檢驗(yàn)對10 種待測基

8、因甲基化水平進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)果未發(fā)現(xiàn)10 種基因的甲基化水平在病例組與對照組間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 研究結(jié)論：
　　 1）母親孕前/孕期化學(xué)物質(zhì)接觸史與較高的母親學(xué)歷可能是兒童急性白血病發(fā)病的環(huán)境危險(xiǎn)因素，兒童感冒次數(shù)可能是一項(xiàng)保護(hù)性因素。
　　 2）有機(jī)磷農(nóng)藥暴露可能與兒童急性白血病發(fā)病有關(guān)。
　　 3）未發(fā)現(xiàn)基因甲基化水平改變與兒童急性白血病發(fā)病之間的關(guān)系，對于其可能的作用機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。