乳酸脫氫酶抑制劑 Calloflavin,對子宮內膜癌細胞生物學特性影響及其機制的研究.pdf

1、目的:
　　子宮內膜癌是女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率逐年升高，嚴重威脅著女性的生命健康。流行病學統(tǒng)計顯示子宮內膜癌高危人群多為肥胖，患有糖尿病，高血壓等代謝異常疾病的婦女，而糖代謝與子宮內膜癌的關系也日益得到重視。大多數(shù)腫瘤細胞利用糖酵解代謝途徑產生的ATP，作為其能量提供的主要方式。靶向針對糖酵解途徑抑制腫瘤生長，日益成為治療腫瘤的新策略。Galloflavin(GF)作為新一代乳酸脫氫酶抑制劑，目前還沒有此藥物干預

2、子宮內膜癌的基礎研究。因此，本研究通過分析GF對人子宮內膜癌細胞株的影響，探討其作用的可能機制。
　　方法:
　　MTT法觀察終濃度為0μmol/L、0.01μmol/L、0.1μmol/L、10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、250μmol/L、500μmol/L GF分別作用于ECC-1、Ishikawa子宮內膜癌細胞株72h后，檢測其對細胞增殖的抑制作用。以乳酸脫氫酶試劑盒檢測GF干預后乳酸脫氫酶的

3、活性的變化;以乳酸定量試劑盒檢測GF干預后乳酸生成量變化;以ATP定量試劑盒檢測GF干預后ATP生成量的變化;以2-NBDG檢測GF干預后葡萄糖攝取量的變化;以DCFH-DA檢測GF干預后細胞內活性氧物質產生量(ROS)的變化;以流式細胞儀、AnnexinV/FITC標記法檢測細胞凋亡;以蛋白印跡法分析GF對BCL-2、MCL-1，Cleaved Caspase3蛋白表達的影響。同時行Annexin V-PI染色、流式細胞儀檢測草氨酸鹽

4、對其凋亡的影響。
　　結果:
　　GF抑制Ishikawa，ECC-1細胞的增殖并且隨GF濃度增加，增殖抑制增加，呈劑量依賴性。GF處理細胞后乳酸脫氫酶的活性顯著下降，乳酸產生量下降，ATP產生量下降，葡萄糖攝取量下降。活性氧物質產生量增加，Annexin V-PI染色、流式細胞儀檢測均表現(xiàn)細胞凋亡比例逐漸增高，證實了GF具有誘導細胞凋亡的作用;GF蛋白印跡檢測表明GF可使Cleaved Caspase3表達升高，BCL-2