全基因組擴(kuò)增技術(shù)應(yīng)用于法醫(yī)學(xué)實(shí)踐的系統(tǒng)研究.pdf

1、目的:該文擬對(duì)簡(jiǎn)并寡核苷酸引物PCR(DOP)和擴(kuò)增前引物延伸(PEP)兩種全基因組擴(kuò)增技術(shù)在法醫(yī)學(xué)實(shí)踐中的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行探討,對(duì)其應(yīng)用于法醫(yī)學(xué)實(shí)踐的可行性進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià).方法:對(duì)兩種全基因組擴(kuò)增(WGA)技術(shù)中可能出現(xiàn)STR滑脫現(xiàn)象的影響因素進(jìn)行研究,然后在控制這些滑脫影響因素的基礎(chǔ)上建立穩(wěn)定可靠的技術(shù)方案;將該技術(shù)方案應(yīng)用于法醫(yī)學(xué)的單基因座擴(kuò)增聚丙烯酰胺凝膠電泳銀染檢測(cè)系統(tǒng)、多色熒光標(biāo)記復(fù)合擴(kuò)增毛細(xì)管電泳激光自動(dòng)檢測(cè)系統(tǒng)以檢驗(yàn)兩種技術(shù)應(yīng)

2、用于法醫(yī)學(xué)常用STR基因座的可靠性;將該技術(shù)應(yīng)用于法醫(yī)學(xué)常見微量檢材單根毛發(fā)和指紋的DNA分析,對(duì)其法醫(yī)學(xué)應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行評(píng)估.結(jié)論:該研究所建立的PEP和DOP兩種WGA技術(shù)操作方案穩(wěn)定可靠,可應(yīng)用于法醫(yī)學(xué)實(shí)踐;建立的顯微操作細(xì)胞捕獲技術(shù)是一種可靠準(zhǔn)確的微量全基因組DNA制備方法;PEP和DOP兩種WGA方法不但具有比普通PCR更高的靈敏度,而且提供了對(duì)微量檢材DNA進(jìn)行反復(fù)多次分析的模板量,更能適應(yīng)法醫(yī)學(xué)既要求最大的分析成功率又要求留置