腎癌干細(xì)胞的初步篩選及其生物學(xué)特性研究.pdf

1、目的：1、探索腎癌(腎透明細(xì)胞癌)細(xì)胞磁珠分選、原代培養(yǎng)及純化實(shí)驗(yàn)的方法。2、分離腎癌干細(xì)胞并研究其一般生物學(xué)特性。 方法： 采用機(jī)械和酶消結(jié)合的方法將新鮮腎癌組織制成細(xì)胞懸液，再采用等密度沉降分離法和反復(fù)貼壁法純化腎癌細(xì)胞，然后將初步純化的腎癌細(xì)胞采用CD133標(biāo)記的免疫磁珠進(jìn)行分選，對(duì)獲得的CD133<'+>和CD133<'->細(xì)胞進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)，觀察克隆形成和生長(zhǎng)增殖能力；同時(shí)進(jìn)行NOD/SCID鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，觀察這兩

2、種細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)小鼠體內(nèi)成瘤能力；研究腎癌細(xì)胞中CD133<'+>和CD133<'->的生物學(xué)特性。 結(jié)果： 1、腎癌細(xì)胞體外原代培養(yǎng)和純化需要條件培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)；2、CD133<'->細(xì)胞在克隆形成和生長(zhǎng)增殖能力方面明顯強(qiáng)于 CD133<'+>細(xì)胞；在進(jìn)行鼠體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)的4例標(biāo)本中CD133<'+>、CD133<'->及分選前的細(xì)胞均未在NOD/SCID鼠體內(nèi)成瘤。 結(jié)論： 構(gòu)成腎腫瘤的細(xì)胞成分復(fù)雜，純化