前列腺癌Du145細(xì)胞系腫瘤干細(xì)胞的分離、鑒定及其生物學(xué)特性和相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文前列腺癌Du145細(xì)胞系腫瘤干細(xì)胞的分離、鑒定及其生物學(xué)特性和相關(guān)機(jī)制研究姓名：陳偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：泌尿外科指導(dǎo)教師：王國(guó)民20070412復(fù)旦大學(xué)博士論文中文摘要人雄激素非依賴性前列腺癌Dul45細(xì)胞系腫瘤干細(xì)胞的分離、鑒定及其生物學(xué)特性和相關(guān)機(jī)制研究摘要第一部分人激素非依賴性前列腺癌Dul45細(xì)胞系腫瘤干細(xì)胞的分離與鑒定【目的l于Dul45細(xì)胞內(nèi)分選表達(dá)不同表面分子的細(xì)胞群，篩選出優(yōu)勢(shì)細(xì)胞，確定具有干細(xì)胞

2、特性的細(xì)胞群，完成腫瘤干細(xì)胞的鑒定和腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)記的確定。【方法l應(yīng)用人雄激素非依賴性前列腺癌細(xì)胞系Dul45體外培養(yǎng)，免疫細(xì)胞化學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Dul45細(xì)胞表面分子和分化標(biāo)志的表達(dá)譜；免疫磁珠分選法結(jié)合I型膠原黏附法分選CDll7細(xì)胞、CD34細(xì)胞和CD44整合素21CDl33細(xì)胞；應(yīng)用克隆形成實(shí)驗(yàn)、免疫細(xì)胞化學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)、CellTiterBlue細(xì)胞增殖活性檢測(cè)法對(duì)上述的各群細(xì)胞進(jìn)行鑒定，篩選出具有自我更新、多向分化和增

3、殖能力的細(xì)胞群。I結(jié)果】Dul45細(xì)胞表面表達(dá)CD24、CD34、CD44、CD59、CDll7、CDl33、CKl4、CKl8；免疫磁珠(MACS)分選法可獲得高純度CDll7細(xì)胞、CD34細(xì)胞、CD44整合素21CDl33細(xì)胞；Dul45細(xì)胞中CD44整合素21CDl33細(xì)胞克隆形成率(CFE)顯著高于其它類型細(xì)胞(P005)，傳代后，克隆形成率無(wú)顯著變化。CDll7細(xì)胞、CD34細(xì)胞克隆形成能力較弱，傳代后CFE明顯下降。CD44

4、整合素21CDl33細(xì)胞形成的克隆與其它類型細(xì)胞形成的克隆存在明顯的形態(tài)學(xué)差異。CD44整合索21CDl33細(xì)胞具有自我更新能力和多向分化潛能，CDll7細(xì)胞、CD34細(xì)胞未表現(xiàn)這種潛能；與整合素2tCDl33。和未分選的Dul45細(xì)胞相比較，CD44整合素21CDl33細(xì)胞增殖能力更強(qiáng)(P005)【結(jié)論lCD44“整合素21CDl33細(xì)胞具有克隆形成、自我更新、多向分化和強(qiáng)增殖潛能，即千細(xì)胞特性。CD44、整合素21、CD133可作為