腫瘤轉(zhuǎn)移的免疫生物學(xué)機(jī)制和免疫治療——靶向攻擊TLR2或CD19抑制腫瘤細(xì)胞肺轉(zhuǎn)移.pdf

1、惡性腫瘤嚴(yán)重危害公眾健康，是全球范圍導(dǎo)致死亡的主要原因，而90％以上的癌癥患者死于腫瘤轉(zhuǎn)移。腫瘤局部的抑制性免疫微環(huán)境是腫瘤細(xì)胞逃避宿主免疫監(jiān)視、進(jìn)行性生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素，也是目前腫瘤常規(guī)治療失敗的重要原因。抑制性免疫微環(huán)境主要由抑制性免疫細(xì)胞、細(xì)胞因子、趨化因子及酶類組成。細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子Stat3在抑制性免疫微環(huán)境形成過程中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。例如，腫瘤細(xì)胞的Stat3組成性活化不僅可主動(dòng)誘導(dǎo)腫瘤局部抑制性免疫微環(huán)境形成，其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物也促

2、進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。但是，腫瘤細(xì)胞如何維持Stat3組成性活化的機(jī)制則仍然沒有得到闡明。最近的研究提示，腫瘤細(xì)胞可以主動(dòng)或被動(dòng)釋放大量損傷相關(guān)分子模式（DAMP）分子，激活模式識(shí)別受體（PRRs），激活或抑制相應(yīng)的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路，引發(fā)相應(yīng)的細(xì)胞生物學(xué)反應(yīng)，包括誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)、刺激血管新生和基質(zhì)重構(gòu)，參與抑制性免疫微環(huán)境形成，既促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移，也是腫瘤免疫微環(huán)境形成的重要機(jī)制。
　　 TLRs是一組重要的PRRs，既介導(dǎo)病原

3、相關(guān)分子模式（PAMPs）分子也介導(dǎo)DAMPs引起的免疫反應(yīng)。同樣的抗原與某些TLR亞型相互作用引起免疫增強(qiáng)反應(yīng)而與另外的TLR亞型相互作用引起免疫耐受。例如，同樣的抗原與TLR4相互作用引起免疫刺激反應(yīng)而激活TLR2可誘導(dǎo)抑制性免疫反應(yīng)。因此，我們假設(shè)TLR2可能與腫瘤細(xì)胞的DAMPs相互作用，介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞Stat3組成性活化，導(dǎo)致抑制性免疫微環(huán)境形成。首先，我們證明了人類及小鼠的多種腫瘤細(xì)胞表達(dá)多種TLRs；利用Pg-LPS激活腫瘤

4、細(xì)胞TLR2信號(hào)，可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞Stat3活化，產(chǎn)生大量IL-6、IL-10等抑制性細(xì)胞因子。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證明腫瘤細(xì)胞可通過主動(dòng)釋放HSP60，持續(xù)活化腫瘤細(xì)胞TLR2信號(hào)，維持Stat3的組成性活性，從而形成一種正反饋機(jī)制，維持TLR2-Stat3信號(hào)系統(tǒng)活化和抑制性免疫微環(huán)境形成。無論是阻斷腫瘤細(xì)胞的TLR2活性，還是阻斷宿主的TLR2活性，均可顯著抑制Stat3活性，逆轉(zhuǎn)肺組織局部抑制性免疫微環(huán)境，減少B16F10黑色素瘤細(xì)胞肺轉(zhuǎn)移

5、，提高荷瘤動(dòng)物生存率。我們的研究結(jié)果不僅證明，模式識(shí)別受體TLR2活化是腫瘤細(xì)胞引起免疫耐受的重要原因，也強(qiáng)烈提示TLR2是開發(fā)防治腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移藥物的藥靶。
　　 CD19是重要的B細(xì)胞標(biāo)志分子。我們的前期工作發(fā)現(xiàn)黑色素細(xì)胞瘤也表達(dá)CD19。因最近有研究提示CD19是B細(xì)胞TLR信號(hào)通路中重要的接頭分子，而我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)激活TLR2是腫瘤細(xì)胞Stat3組成性活化的重要原因。因此，我們假設(shè)CD19通過與腫瘤組織產(chǎn)生的某些DAMPs

6、分子相互作用，引起腫瘤細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子Stat3組成性活化，促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。我們發(fā)現(xiàn)，B16F10黑色素瘤細(xì)胞膜表面的CD19介導(dǎo)了HSP60通過TLR2所致Stat3組成性活化這一過程；阻斷CD19可抑制腫瘤細(xì)胞自身釋放的HSP60所誘導(dǎo)的Stat3活化，下調(diào)MMP-2、VEGF及c-Myc等促癌蛋白表達(dá)，抑制腫瘤細(xì)胞上皮.間葉轉(zhuǎn)化（EMT），抑制IL-10等抑制性細(xì)胞因子分泌。因此，無論是預(yù)防性，還是治療性給予中和性CD19抗體，