慢性髓細胞白血病細胞遺傳學及分子遺傳學研究.pdf

1、目的：研究慢性髓細胞白血病(CML)急變期(BC)的細胞遺傳學及分子遺傳學改變，探討這些改變與患者臨床特征的關(guān)系。同時探討熒光原位雜交(FISH)及多重熒光原位雜交(M-FISH)技術(shù)在檢測伴變異型Ph易位(vPh)的CML中遺傳學改變的意義。 方法：隨機選取25例CML-BC病例，包括7例急性淋巴細胞白血病變(CML-ALL)和18例急性非淋巴細胞白血病變(CML-ANLL)，抽取其骨髓，采用直接法及間接法培養(yǎng)細胞，按常規(guī)收獲

2、細胞并制備染色體。核型分析采用R顯帶技術(shù)，每份標本至少分析20個中期細胞。每份標本至少須經(jīng)兩人共同鑒定。同時予BCR-ABL雙色雙融合FISH技術(shù)檢測。每例計數(shù)500個間期細胞。對于間期細胞中僅有單個融合信號的標本，觀察10個中期細胞，以明確是否為衍生9號染色體[der(9)]缺失。對于CML-BC中der(9)缺失的病例，以FISH技術(shù)檢測其初診時的染色體標本，以明確der(9)缺失是否在CML起病時就存在。對10例常規(guī)R顯帶確定的伴

3、vPh的CML以FISH技術(shù)檢測其中der(9)缺失情況。同時對這10例伴vPh的CML以M-FISH技術(shù)檢測。 結(jié)果：在隨機選取的25例CML-BC病例中，核型分析均顯示t(9；22)。出現(xiàn)附加細胞遺傳學異常的比例為60﹪(15/25)。最多見的附加異常為+Ph(3/25)、+21(3/25)、t(3；12)(2/25)。比較初診時的核型分析結(jié)果，在CML-BC中有60﹪(15/25)出現(xiàn)了新的細胞遺傳學異常。有新異常組和無新

4、異常組在慢性期、加速期和總生存期上無顯著性差異(P＞0.05)，有新異常組的CML-BC生存時間短于無新異常組(P＜0.05)。R顯帶在25例CML-BC中均未見到der(9)缺失，而FISH技術(shù)檢測到5例存在der(9)缺失，其初診時染色體標本也顯示der(9)缺失。der(9)缺失的病例中，60﹪(3/5)出現(xiàn)Ph染色體以外的附加異常；而在未缺失的病例中，這個比例為70﹪(14/20)。兩組比較無顯著性差異(P＞0.05)。der(

5、9)缺失的病例與未缺失病例在加速期、CML-BC及總生存期上無顯著性差異(P＞0.05)，而der(9)缺失病例慢性期平均18.2個月(中位數(shù)18個月)，未缺失病例慢性期平均44.2個月(中位數(shù)44個月)，兩組之間有顯著性差異(P＜0.05)。7例CML-ALL中，2例(28.6﹪)存在der(9)缺失；在18例CML-ANLL病例中，3例(16.7﹪)存在der(9)缺失，兩組在der(9)缺失的比例上無顯著性差異(P＞0.05)。

6、 FISH技術(shù)在10例伴vPh的CML中檢測到5例存在der(9)缺失。M-FISH技術(shù)不能檢測der(9)缺失。M-FISH技術(shù)檢測到除9號及22號染色體外，5號、8號、1號、3號、11號、6號、17號及10號染色體也參與vPh，并且發(fā)現(xiàn)了常規(guī)細胞遺傳學(CC)未發(fā)現(xiàn)的異常，包括2種未見報道的異常：t(1；9；1)及ider(9)(q10)t(8；9)。 結(jié)論：CML-BC中出現(xiàn)新的細胞遺傳學異常的病例其CML-BC生存