四維超聲對晚孕胎鼠大腦皮層神經膠質細胞的生物學影響.pdf

1、隨著科學技術的進步，超聲波逐漸應用于臨床疾病的診斷及產前診斷，物理學中，超聲波有熱效應和空化效應，這些生物學效應是否會對機體產生損害的影響?這一直是人們研究的熱點。經過大量動物實驗研究和臨床觀察，人們逐漸認識到診斷超聲的輻照劑量存在著時間和強度的關系，即大劑量和高強度超聲可以瞬間對機體產生損害，長時間和低強度超聲輻照也會對機體產生不良的后果。尤其是產科超聲檢查，因為在妊娠早期，只要幾個胚胎細胞受損，就會產生不嚴重的不良后果，如發(fā)育畸形等

2、。因此，有許多學者對超聲的生物學損害進行了大量的研究。隨著計算機技術的不斷更新，超聲儀器及其檢查手段也在不斷的更新，最早使用的是二維超聲（即黑白超聲），隨后又陸續(xù)發(fā)明了頻譜多普勒超聲和彩色多普勒超聲。許多學者對這幾種超聲檢查技術已經有了大量的研究成果，并得出了相應的結論。最近，三維超聲和四維超聲（即實時三維超聲）已經廣泛的應用于臨床，其總的超聲輻照時間及輻照量都相應的增加，為產科檢查的安全性帶來了潛在的危險，目前，對這兩種超聲檢查技術的

3、安全性研究相對較少，對其所產生的生物學效應及危害的研究是一項迫在眉睫的任務。本研究分包括兩個部分，第一部分是利用光學顯微鏡觀察受孕小鼠接受四維超聲不同時段輻照后對胎鼠大腦皮層細胞的生物學影響，主要觀察皮層細胞的形態(tài)學改變。第二部分是利用免疫組織化學技術測定神經膠質細胞特異性蛋白即AQP4、S-100、GFAP蛋白的表達情況，來確定四維超聲輻照后小鼠大腦神經膠質細胞的生物學影響。
　　 第一部分四維超聲輻照對晚孕胎鼠大腦皮層細胞形

4、態(tài)學的影響
　　 目的：探討四維超聲不同輻照時段對晚孕胎鼠大腦皮層細胞形態(tài)學改變。
　　 方法：將30只懷孕小鼠等量隨機分配到對照組、假輻照組、輻照5min組、輻照10min組、輻照20min組及輻照30min組。輻照組在小鼠懷孕第16d時進行四維超聲輻照。假輻照組不發(fā)射超聲波，只實施輻照操作。每組乳鼠在出生后第10d采取灌流固定，取大腦標本，行HE染色后，進行光鏡觀察。
　　 結果：光鏡結果：對照組、假輻照組、

5、輻照5min組光鏡觀察未見明顯異常，輻照10min組、輻照20min組及30min組，皮層細胞排列紊亂，腫脹，出現空泡，部分細胞壞死。
　　 結論：四維超聲輻照超過10min可引起大腦皮層細胞形態(tài)學改變。
　　 第二部分四維超聲輻照后應用免疫組織化學技術觀察小鼠大腦皮層神經膠質細胞特異性蛋白的表達情況
　　 目的：探討四維超聲輻照后小鼠大腦皮層神經膠質細胞特異性蛋白的表達情況及其意義。
　　 方法：30只

6、孕鼠等量隨機分配到對照組、假輻照30min組、輻照5min、輻照10min、輻照20min及輻照30min組。輻照組在小鼠懷孕第16d時行四維超聲輻照，假輻照組不發(fā)射超聲波，只實施輻照操作。每組小鼠出生后第10d進行灌流固定，取大腦標本，免疫組織化學技術檢測神經膠質細胞特異性蛋白AQP4、S-100、GFAP的表達情況。
　　 結果：免疫組織化學染色后應用數碼圖像分析系統計算平均面密度值：AQP4陽性細胞平均面密度值隨著輻照時間

7、的延長而逐漸減少，GFAP、S-100陽性平均面密度值隨著輻照時間的延長而逐漸增加。統計學分析：三種蛋白對照組與假輻照組比較差異無統計學意義，其對照組與各輻照組比較、假輻照組與各輻照組比較差異有統計學意義，S-100、GFAP蛋白20min組與30min輻照組比較差異無統計學意義，余各不同時間段輻照組之間比較差異均有統計學意義。
　　 結論：四維超聲輻照可引起小鼠大腦皮層神經膠質細胞特異性蛋白異常表達，AQP4蛋白表達減少，GF