人胰腺癌細(xì)胞系中SP細(xì)胞的分選及生物學(xué)表型研究.pdf

1、目的：自人胰腺癌細(xì)胞系SW1990中分選出SP細(xì)胞(side population cells)亞群，并對(duì)SP細(xì)胞的基本生物學(xué)特性進(jìn)行研究。 方法：采用熒光激活細(xì)胞分選法(fluorescence—activated cell sorting FACS)，分選人胰腺癌細(xì)胞系SW1990中的SP細(xì)胞亞群；并采用ATP生物熒光體外藥敏技術(shù)、細(xì)胞有限稀釋法和Transwell法分別檢測(cè)SP細(xì)胞和非SP細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性、克隆形成能

2、力以及體外侵襲和遷移能力；同時(shí)使用流式細(xì)胞儀分析兩個(gè)細(xì)胞亞群的細(xì)胞周期差異；體外培養(yǎng)18天后，采用Hoechst33342染色法分析兩個(gè)細(xì)胞亞群的分化能力；研究SP細(xì)胞和非SP細(xì)胞在NOD/SCID小鼠體內(nèi)致瘤性的差異；研究維拉帕米是否能逆轉(zhuǎn)SP細(xì)胞對(duì)不同抗腫瘤藥物的抗性。 結(jié)果：在人胰腺癌細(xì)胞系SW1990中成功分選SP細(xì)胞，其比例為3.92％；抗腫瘤藥物對(duì)SP細(xì)胞的抑制率低于非SP細(xì)胞(P<0.05)；SP細(xì)胞的克隆形成能力

3、高于非SP細(xì)胞，分別為19.79％～28.12％和6.25％～10.41％(P=0.04)；SP細(xì)胞的侵襲和遷移能力也明顯高于非SP細(xì)胞(P<0.05)；SP細(xì)胞和非SP細(xì)胞的G0/G1期細(xì)胞比例分別為63.56％±1.13％和58.46％±0.96％(P<0.05)；細(xì)胞分化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，兩個(gè)亞群中SP細(xì)胞比例分別為1.02％±0.04和0.06％±0.02％(P<0.05)；SP細(xì)胞體內(nèi)成瘤性強(qiáng)于非SP細(xì)胞，成瘤率分別為66.67％