水產(chǎn)品中大腸埃希氏菌和大腸菌群快速檢測(cè)技術(shù)研究.pdf

1、大腸埃希氏菌(Escherichia coli)和大腸菌群(Coliforms)都是判斷水、藥品、食品等是否被糞便污染的重要微生物指標(biāo)。檢測(cè)大腸埃希氏菌和大腸菌群的常規(guī)方法存在耗時(shí)長(zhǎng)、靈敏度低、特異性差和難于檢測(cè)到低活性或活的非可培養(yǎng)菌等缺點(diǎn)，而基于分子生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、酶學(xué)技術(shù)等的三種快速檢測(cè)技術(shù)具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、檢測(cè)快捷等優(yōu)勢(shì)，尤其是酶學(xué)技術(shù)的快速、經(jīng)濟(jì)，非常適合水產(chǎn)品中大腸埃希氏菌和大腸菌群的快速檢測(cè)。本實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)建立

2、了基于熒光方法的大腸埃希氏菌單管定量檢測(cè)技術(shù)，為了進(jìn)一步探討單管定量檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域，滿(mǎn)足產(chǎn)品上市前快速檢測(cè)的需要，本文研究并建立了大腸菌群?jiǎn)喂芏繖z測(cè)技術(shù)。在此基礎(chǔ)上，用單管定量檢測(cè)技術(shù)和傳統(tǒng)方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室制備的菌懸液、天然海水、水產(chǎn)品中的大腸埃希氏菌和大腸菌群進(jìn)行了定量檢測(cè)，比較2種方法的優(yōu)缺點(diǎn)和檢測(cè)結(jié)果的可比性，以評(píng)估單管定量檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用前景。具體內(nèi)容如下：
　　 通過(guò)研究培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)液pH值對(duì)大腸菌群生長(zhǎng)和培養(yǎng)液吸光

3、度值的影響，確定42℃，培養(yǎng)液pH值7.0～7.5為大腸菌群酶解ONPG產(chǎn)物的吸光度值檢測(cè)的最佳條件；通過(guò)研究培養(yǎng)時(shí)間和接種菌濃度與培養(yǎng)液吸光度值的關(guān)系，建立起基于分光光度法的大腸菌群?jiǎn)喂芏繖z測(cè)技術(shù)。通過(guò)與平板菌落計(jì)數(shù)法和最大可能數(shù)法比較發(fā)現(xiàn)單管定量檢測(cè)法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于這兩種常用的方法，而且更為快速、經(jīng)濟(jì)，適合用于大腸菌群的定量檢測(cè)。
　　 利用MUG單管定量檢測(cè)方法和大腸埃希氏菌多管發(fā)酵法對(duì)實(shí)驗(yàn)室制備的菌懸液、天然海水、

4、水產(chǎn)品中的大腸埃希氏菌進(jìn)行了定量檢測(cè)，并比較2種方法的優(yōu)缺點(diǎn)和檢測(cè)結(jié)果的可比性。檢測(cè)結(jié)果表明：MUG單管定量檢測(cè)法與大腸埃希氏菌多管發(fā)酵法對(duì)菌懸液、天然海水、水產(chǎn)品的檢測(cè)結(jié)果沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；MUG單管定量檢測(cè)法檢測(cè)數(shù)據(jù)的精確性高于大腸埃希氏菌多管發(fā)酵法，而且更為快速、經(jīng)濟(jì)，適用于海水和水產(chǎn)品中大腸埃希氏菌的定量檢測(cè)。
　　 利用ONPG單管定量檢測(cè)方法和乳糖多管發(fā)酵法對(duì)實(shí)驗(yàn)室制備的標(biāo)準(zhǔn)菌的菌懸液、天然海水和水產(chǎn)品中的大腸菌群進(jìn)行

5、了定量檢測(cè)，并比較2種方法的優(yōu)缺點(diǎn)和檢測(cè)結(jié)果的可比性。研究結(jié)果顯示：兩種方法對(duì)菌懸液、水樣的檢測(cè)結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，ONPG單管定量檢測(cè)方法檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性、精確性和重現(xiàn)性都高于乳糖多管發(fā)酵法；ONPG單管定量檢測(cè)法適合海水中大腸菌群的快速定量檢測(cè)，具有很好的應(yīng)用前景，但由于生物組織等的影響，ONPG單管定量檢測(cè)方法能否應(yīng)用于水產(chǎn)品的檢測(cè)有待進(jìn)一步研究。
　　 綜上所述，MUG單管定量檢測(cè)技術(shù)適合用于海水和水產(chǎn)品中大腸埃希氏菌的定