奶及奶制品鑒別方法的研究.pdf

1、本研究分別從蛋白質(zhì)水平和DNA水平對奶及奶制品的鑒別方法進(jìn)行了研究，其鑒別和檢測方法如下:
　　 1、以5種不同品牌純牛奶、駱駝奶、水牛奶、牦牛奶、羊奶和豆?jié){為研究對象，運用SDS-PAGE法電泳，銀染后的蛋白圖譜與微流體芯片電泳法進(jìn)行了比較，從兩種電泳方法的凝膠圖上可以看出5種純牛奶的蛋白質(zhì)電泳圖相同。采用SDS-PAGE法鑒別時，駱駝奶、豆?jié){可以有效地區(qū)分開，但牛奶、羊奶、水牛奶、牦牛奶不易區(qū)分開。運用微流體芯片電泳，在有效

2、地對駱駝奶和黃豆?jié){進(jìn)行區(qū)分外，還能對牛奶、牦牛奶、羊奶和駱駝奶也進(jìn)行一定程度的區(qū)分。兩種方法的靈敏度相近，但是微流體芯片電泳的優(yōu)勢在于其快速、準(zhǔn)確和高效。
　　 2、采用了PCR法對牛奶、羊奶、水牛奶、駱駝奶和豆奶進(jìn)行了鑒別，其中，牛奶和駱駝奶均以cytb為目的基因，分別擴增出大小為725 bp和363 bp的DNA片段，羊奶以ATP6為目的基因，能擴增出大小為292 bp的DNA片段，水牛奶以12SrRNA為目的基因片段，能擴

3、增出大小為328 bp的DNA片段，黃豆?jié){以cytf為目的基因，擴增出大小為510 bp的DNA片段，各引物對對于其它物種無非特異性擴增，同時，采用了兩種限制性內(nèi)切酶驗證該擴增的特異性。依據(jù)物種之間基因序列的差距設(shè)計的引物，能夠同時對這幾種液態(tài)奶鑒別，是一種簡單、可靠的液態(tài)奶鑒別方法。
　　 3、對于同源性較強的牛、水牛和牦牛，以12SrRNA為目的基因片段，設(shè)計其通用性引物，牛和牦牛能擴增出長度為375 bp的DNA片段，水牛

4、能擴增出大小為376 bp的片段。對于牛奶和水牛奶的鑒別，采用Msap1Ⅰ進(jìn)行酶切反應(yīng)，牛的PCR產(chǎn)物能別切割成大小為90 bp和285 bp的片段，水牛的PCR產(chǎn)物能別切割成大小為91 bp、141 bp和144 bp的DNA片段，但對于牛和牦牛的鑒別，采用的是Msap1Ⅰand PacⅠ雙酶切反應(yīng)，牛PCR產(chǎn)物的酶切片段為90 bp和285 bp，牦牛的PCR產(chǎn)物酶切片段為82 bp、90 bp和203 bp。PCR-RFLP能有效