siRNA治療大鼠卡氏肺孢子菌肺炎的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察靶向卡氏肺孢子菌(pneumocystis carinii, PC)主要表面糖蛋白(major surface glycoprotein，MSG)DNA上游保守序列(upstream conserved sequence，UCS)基因的siRNA對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠卡氏肺孢子菌肺炎(pneumocystis carinii pneumonia，PCP)的治療效果。
　　 方法：一、建模與分組：地塞米松皮下注射大鼠8周誘導(dǎo)建立PC

2、P動(dòng)物模型，分為四組：1、MSG-UCS siRNA重組質(zhì)粒pPC-UCS治療組；2、磺胺治療組；3、空載質(zhì)粒pTZU6+1對(duì)照組；4、感染對(duì)照組。二、治療方法：1、pPC-UCS治療組：重組質(zhì)粒pPC-UCS，500μg/kg(約70μg/只)，鼠尾靜脈注射，每天一次，連續(xù)8天；2、磺胺治療組：復(fù)方磺胺甲基異惡唑(SMZ:TMP=5:1，coSMZ)，120mg/kg，灌胃，每天一次，連續(xù)8天；3、pTZU6+1對(duì)照組，方法同pPC-

3、UCS治療組；4、感染對(duì)照組，未給予任何治療。三、觀察指標(biāo)：大鼠存活率，大鼠體重，大鼠肺組織病理學(xué)觀察，肺印片檢測(cè)PC包囊數(shù)，掃描電鏡觀察PC表面結(jié)構(gòu)變化，ELISA檢測(cè)大鼠血清IL-8、TNF-a水平。
　　 結(jié)果：一、大鼠存活率：各組大鼠均存活，存活率比較無(wú)意義。二、大鼠體重：療程結(jié)束時(shí)各組大鼠體重均較治療前增加，pPC-UCS治療組與磺胺治療組分別增長(zhǎng)13.16±3.97g與14.21±3.90g，明顯高于感染對(duì)照組的4.

4、32±2.06g與pTZU6+1對(duì)照組的5.38±1.19g，差異具有顯著性；pPC-UCS治療組與磺胺治療組間差異無(wú)顯著性；感染對(duì)照組與pTZU6+1對(duì)照組間差異無(wú)顯著性。三、大鼠肺組織病理學(xué)觀察：與感染對(duì)照組和pTZU6+1對(duì)照組比較，pPC-UCS治療組和磺胺治療組大鼠肺組織炎癥明顯減輕；感染對(duì)照組和pTZU6+1對(duì)照組間比較無(wú)明顯差異；pPC-UCS治療組和磺胺治療組間比較無(wú)明顯差異。四、大鼠肺PC包囊數(shù)：pPC-UCS治療組與

5、磺胺治療組每視野包囊均數(shù)分別為3.61±0.4個(gè)與3.17±0.28個(gè)，明顯低于感染對(duì)照組8.34±0.55個(gè)與pTZU6+1對(duì)照組8.74±0.57個(gè)，差異有顯著性；pPC-UCS治療組與磺胺治療組間差異無(wú)顯著性，感染對(duì)照組與pTZU6+1對(duì)照組間差異無(wú)顯著性。五、PC表面結(jié)構(gòu)變化：掃描電鏡下，感染對(duì)照組與pTZU6+1對(duì)照組PC表面結(jié)構(gòu)完整，有密集的微絨毛結(jié)構(gòu)；pPC-UCS治療組與磺胺治療組PC表面微絨毛脫落，表膜出現(xiàn)深大缺損。六

6、、大鼠血清IL-8、TNF-a水平：大鼠血清IL-8水平，pPC-UCS治療組與磺胺治療組分別為232.5±36.27pg/ml與201.15±34.52pg/ml，明顯低于感染對(duì)照組596.85±61.72pg/ml與pTZU6+1對(duì)照組555.1±54.31pg/ml，差異具有顯著性；大鼠血清TNF-a水平，pPC-UCS治療組與磺胺治療組分別為145.2±80.72pg/ml與131.57±38.32pg/ml，明顯高于感染對(duì)照組