紅海欖赤斑病病原菌鑒定及其生物學(xué)特性研究.pdf

1、本文對(duì)湛江市麻章區(qū)、東海區(qū)和霞山區(qū)3個(gè)紅樹(shù)林保護(hù)區(qū)的紅樹(shù)葉斑病進(jìn)行初步調(diào)查，著重對(duì)分離自紅海欖赤斑病同一病斑上的兩株病原菌PI-1和PII-3進(jìn)行鑒定和生物學(xué)特性研究，主要結(jié)果如下： (1)病害發(fā)生情況調(diào)查結(jié)果表明，該地區(qū)紅樹(shù)葉斑病尚未造成嚴(yán)重危害，但病害仍有發(fā)生，主要危害鹵蕨(Acrostichum aureum)、秋茄(Kandelia candel)和紅海欖(Rhizophora stylosa)。病原菌分離鑒定結(jié)果表明，

2、炭疽菌(Colletotrichum sp.)和擬盤(pán)多毛孢菌(Pestalotiopsis sp.)是主要病原菌。致病性與寄主范圍測(cè)定結(jié)果發(fā)現(xiàn)，這些病原菌除了能對(duì)原寄主致病之外，還能對(duì)其他部分紅樹(shù)植物致病，但不能對(duì)非紅樹(shù)植物致病。 (2)紅海欖赤斑病病原分離結(jié)果表明，同一病斑上分離到菌落形態(tài)特征存在較大差異的兩株病原菌(PI-1和PII-3)，其中在PDA平板培養(yǎng)基上菌株P(guān)I-1的菌落呈灰白色，花瓣?duì)?，氣生菌絲不多，菌落背面呈黑

3、色輪紋狀；菌株P(guān)II-3的菌落白色，氣生菌絲較多，呈絨毛狀，菌落背面呈橘黃色輪紋狀；同時(shí)，菌株P(guān)I-1分生孢子的長(zhǎng)度比PII-3的略短，中間色胞的顏色比PII-3略深。經(jīng)Koch法則驗(yàn)證，PII-3致病性比PI-1稍強(qiáng)，兩菌株均具有一定的寄主專(zhuān)化性。兩菌株ITS序列分析表明，PI-1菌株的ITS序列長(zhǎng)度為565bp(GenBank登錄號(hào)：EU644754)，PII-3菌株的ITS)芋列長(zhǎng)度為576bp(GenBank登錄號(hào)：EU6447

4、55)，經(jīng)BLAST分析，與兩菌株的ITSS序列同源性達(dá)98％～100％的菌株均為擬盤(pán)多毛孢，并由此進(jìn)一步用NJ法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。根據(jù)韋繼光(2005)界定的標(biāo)準(zhǔn)，基于形態(tài)特征與系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，本文認(rèn)為，PI-1和PII-3兩菌株雖形態(tài)上存在差異，但均同屬于異色擬盤(pán)多毛孢(Pestalotiopsis versicolor)。 (3)PI-1和PII-3兩菌株生物學(xué)特性測(cè)定結(jié)果表明，溫度對(duì)兩菌株?duì)I養(yǎng)生長(zhǎng)的影響基本一致，生長(zhǎng)溫度范圍均

5、為10～32℃，最適均為25℃。但溫度對(duì)兩菌株產(chǎn)孢的影響存在差異，PI-1產(chǎn)孢溫度范圍為15～32℃，最適28℃：而PII-3產(chǎn)孢溫度范圍為15～30℃，最適20℃。溫度對(duì)兩菌株孢子萌發(fā)的影響基本相同，萌發(fā)溫度范圍均為10～35℃；最適均為25～28℃，12小時(shí)后萌發(fā)率幾乎為100％。 pH值對(duì)兩菌株?duì)I養(yǎng)生長(zhǎng)的影響基本相似，生長(zhǎng)的pH值范圍均為3.0～10.9，最適均為pH4.0。pH值對(duì)兩菌株產(chǎn)孢的影響存在差異，兩菌株產(chǎn)孢p

6、H值范圍雖均為3.0～10.0，但產(chǎn)孢的適宜pH值差別較大，PI-1產(chǎn)孢最適pH為5.1，而PII-3為pH9.0。pH值對(duì)兩菌株孢子萌發(fā)的影響相似，孢子萌發(fā)范圍均為pH2.5～8.0，最適為pH3.0。 光照對(duì)PI-1和PII-3菌株的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)、產(chǎn)孢量及孢子萌發(fā)有不同的影響，其中PI-1菌株的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)和產(chǎn)孢特性對(duì)光照不敏感，但其孢子萌發(fā)對(duì)光照敏感，孢子萌發(fā)率在24h/d黑暗條件下顯著高于在24 h/d光照條件下。對(duì)于PII-3

7、菌株，24 h/d完全黑暗明顯有利于其營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)，24 h/d光照明顯有利于其產(chǎn)孢，但不同光照處理對(duì)其孢子萌發(fā)的影響不顯著。 培養(yǎng)基及不同碳氮源對(duì)菌株P(guān)I-1和PII-3營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)和產(chǎn)孢影響測(cè)定結(jié)果表明，兩菌株均能在供試的8種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，含有紅樹(shù)植物浸出液的培養(yǎng)基更有利于兩菌株的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)。除檸檬酸三鈉之外，兩菌株均能利用其余供試的碳氮源。其中，PI-1菌株?duì)I養(yǎng)生長(zhǎng)的最佳碳源為甘露醇，最佳氮源為濃縮酵母浸出粉；產(chǎn)孢的最佳碳源為葡萄糖