大花金挖耳內(nèi)生菌分離及其發(fā)酵產(chǎn)物抑菌活性研究.pdf

1、大花金挖耳(Carpesium macrocephalum)為菊科天明精屬多年生草本植物，研究發(fā)現(xiàn)其為一種優(yōu)秀的殺菌植物。植物內(nèi)生菌能夠產(chǎn)生許多結(jié)構(gòu)新穎、生理活性獨(dú)特的或與宿主植物相同和相似的天然生理活性物質(zhì)，同時(shí)植物內(nèi)生菌具有普遍的抑菌活性?；诖?，本研究對(duì)大花金挖耳內(nèi)生菌進(jìn)行了初步研究，主要結(jié)果如下： 1 通過(guò)組織塊法和勻漿法，采用PDA、牛肉蛋白胨和高氏一號(hào)3種分離培養(yǎng)基，從大花金挖耳莖、葉、花、果實(shí)和根等組織中分離純化得

2、到92株內(nèi)生菌，其中內(nèi)生真菌68株，內(nèi)生細(xì)菌16株，內(nèi)生放線菌8株。 2 對(duì)峙法抑菌活性測(cè)定表明，大花金挖耳92株內(nèi)生菌中，對(duì)病原真菌小麥赤霉、番茄灰霉、辣椒疫霉、玉米大斑、蘋(píng)果炭疽具有拮抗活性的菌株占到總菌株數(shù)的38.04％、47.83％、36.96％、39.13％、40.22％。采用生長(zhǎng)速率法和活體組織法測(cè)定22株內(nèi)生菌發(fā)酵產(chǎn)物的抑菌活性，結(jié)果表明內(nèi)生真菌H-18、G-6和內(nèi)生細(xì)菌H-32等3株內(nèi)生菌的發(fā)酵產(chǎn)物具有很好的抑菌

3、作用，并確定內(nèi)生真菌H-18做為進(jìn)一步研究的對(duì)象。 3 經(jīng)多種培養(yǎng)基培養(yǎng)及結(jié)合黑光、紫外、低溫等不同條件誘導(dǎo)，最后使H-18菌株產(chǎn)生分生孢子，經(jīng)過(guò)經(jīng)典分類學(xué)對(duì)比鑒定，H-18菌株為半知菌亞門(mén)叢梗孢目鐮孢霉屬真菌。 4 結(jié)合抑菌活性測(cè)定，確定了H-18菌株較為合適的基礎(chǔ)發(fā)酵條件為：PD培養(yǎng)基，接種后靜置48h，溫度28℃，搖床轉(zhuǎn)速110r·min<'-1>，發(fā)酵時(shí)間10-12天。 5 對(duì)H-18進(jìn)行抑菌活性研究發(fā)現(xiàn)