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文檔簡介
1、目的:探討中藥復方固本防哮飲對哮喘易感基因血清類粘蛋白1樣蛋白3(orosomucoid1-like protein3,ORMDL3)以及信號轉(zhuǎn)導及轉(zhuǎn)錄激活因子1(signal transducer and activator of transcription1,STAT1)的調(diào)控作用,進一步揭示固本防哮飲防治哮喘的機制。
方法:體外培養(yǎng)人支氣管上皮細胞(human bronchial epithelial cells,16H
2、BE),分為正常組、模型組、固本防哮飲組及孟魯司特鈉組,利用白介素-4(interleukin-4,IL-4)誘導16HBE構(gòu)建哮喘細胞模型,并分別予空白血清及含藥血清進行干預;運用實時熒光定量-PCR(Real-time PCR)、免疫印跡法(Western blotting,WB)、免疫熒光法(immunofluorescence,IF)從基因、蛋白水平檢測16HBE細胞ORMDL3、STAT1的表達及蛋白亞細胞定位。
結(jié)
3、果:ORMDL3蛋白主要表達于16HBE細胞胞質(zhì)中表達,STAT1蛋白可表達于16HBE細胞胞質(zhì)及胞核內(nèi);WB結(jié)果顯示,與正常組比較,模型組ORMDL3、STAT1蛋白表達顯著增加(P<0.05,P<0.01);與模型組比較,固本防哮飲組ORMDL3及STAT1蛋白表達均顯著下降(P<0.05);PCR結(jié)果顯示,與正常組比較,模型組ORMDL3、STAT1 mRNA含量升高,但二者無顯著性差異(P>0.05),固本防哮飲組較模型組細胞中
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