Nrf2-H0-1-NQ0-1信號通路在慢性移植腎失功中的作用.pdf

1、慢性移植腎失功是影響移植腎長期存活的首要原因，其主要病因迄今尚不完全明確，氧化應(yīng)激可能構(gòu)成慢性移植腎失功不明原因間質(zhì)纖維化/小管萎縮的機制之一，作為機體對抗氧化應(yīng)激的重要防御機制，Nrf2-HO-1/NQO-1信號通路在慢性移植腎失功腎組織中可能發(fā)生相應(yīng)改變，而Nrf2通路的經(jīng)典激活劑蘿卜硫素可能通過激活上述信號通路在慢性移植腎失功中發(fā)揮腎臟保護效應(yīng)。
　　目的：
　　1.建立慢性移植腎失功大鼠模型，證實氧化應(yīng)激在慢性移植腎

2、失功腎組織中的存在;2.觀察Nrf2及其下游蛋白HO-1、NQO-1在慢性移植腎失功腎組織中的變化情況;3.以Nrf2激活劑蘿卜硫素為干預(yù)手段，觀察Nrf2-HO-1/NQO-1信號通路的持續(xù)激活對移植腎氧化應(yīng)激情況、腎功能、尿蛋白及病理學表現(xiàn)的影響。
　　方法：
　　以F344及Lewis大鼠分別作為供受體行左腎原位腎移植術(shù)建立慢性移植腎失功模型，對F344及Lewis大鼠分別行單腎切除術(shù)建立對照組，對慢性移植腎失功大鼠予

3、蘿卜硫素1.5mg/(kg·d)腹腔注射，設(shè)計分組4組:Lewis單腎切除對照組、F344單腎切除對照組、慢性移植腎失功組、慢性移植腎失功+蘿卜硫素干預(yù)組，每組10只大鼠，均觀察24周，分別于術(shù)后8、12、16、20、24周測定4組血肌酐、尿素氮、24小時尿蛋白水平并比較組間差異及隨時間進展情況，于24周末收獲各組大鼠行腎內(nèi)氧化應(yīng)激標記物丙二醛及總超氧化物歧化酶活力比較，分別對腎組織行蘇木精-伊紅、Masson三色及PAS染色后進行觀察

4、，根據(jù)Banff總評分行組間病變程度比較。免疫組織化學分析腎組織Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白分布及含量，根據(jù)目的蛋白積分光密度與測量面積之比行組間蛋白含量比較，Western Blot分析觀察4組腎組織總Nrf2、HO-1、NQO-1及核Nrf2含量。根據(jù)目的蛋白與對應(yīng)內(nèi)參條帶積分光密度之比行組間蛋白含量比較。
　　結(jié)果：
　　術(shù)后8、12、16、20、24周，慢性移植腎失功組血肌酐、尿素氮均大于Lewis及F344單

5、腎切除對照組。術(shù)后12、16、20、24周慢性移植腎失功組24小時尿蛋白均大于Lewis及F344單腎切除對照組，于20、24周大于慢性移植腎失功+蘿卜硫素干預(yù)組。慢性移植腎失功+蘿卜硫素干預(yù)組血肌酐、尿素氮、24小時尿蛋白于8-24周間的進展趨勢較慢性移植腎失功組顯著減緩。與Lewis及F344單腎切除對照組相比，24周末慢性移植腎失功組腎內(nèi)氧化應(yīng)激標記物丙二醛水平升高，總超氧化物歧化酶活力下降，病理學檢查可見腎小管萎縮、間質(zhì)單個核細

6、胞浸潤及纖維化、動脈內(nèi)膜增厚等慢性移植腎失功典型病變，腎組織細胞中總Nrf2、HO-1、NQO-1及核Nrf2含量顯著下降。與之相比，慢性移植腎失功+蘿卜硫素干預(yù)組腎內(nèi)丙二醛水平下降，總超氧化物歧化酶活力上升，基于Banff總評分的腎臟病變程度減輕，腎組織細胞中總Nrf2、HO-1、NQO-1及核Nrf2含量上升。
　　結(jié)論：
　　1.氧化應(yīng)激存在于慢性移植腎失功中，可能構(gòu)成后者不明原因小管萎縮/間質(zhì)纖維化的病因及發(fā)病機制;