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1、目的:為深入研究增生性瘢痕的發(fā)病機(jī)理,用免疫組織化學(xué)方法分別檢測(cè)CD90、TGF-β1、α-SMA、I型和III型膠原在增生性瘢痕、瘢痕交界處和正常皮膚組織成纖維細(xì)胞中的表達(dá)水平,探討與瘢痕異常增生相關(guān)的影響因素,并分析成纖維細(xì)胞的CD90表達(dá)與其增殖、合成、收縮等功能的相關(guān)性。 方法:1、取手術(shù)切除的帶有少量正常皮膚的瘢痕組織18例,將組織標(biāo)本固定、石蠟包埋,組織切片HE染色證實(shí)臨床診斷后,分為增生性瘢痕組、瘢痕交界處組、正常
2、皮膚組,每組各18例。2、選取組織蠟塊,根據(jù)HE染色、形態(tài)學(xué)觀察確定典型病變部位,從每例標(biāo)本中選取1個(gè)采樣點(diǎn),構(gòu)建包括54點(diǎn)組織標(biāo)本的芯片蠟塊,陣列為9×6。3、從芯片蠟塊中切取5張切片,應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法對(duì)組織芯片進(jìn)行染色,對(duì)5張組織芯片分別檢測(cè)CD90、TGF-β1、α-SMA、I型和III型膠原在增生性瘢痕、瘢痕交界處和正常皮膚組織中的表達(dá)水平,將所得結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。4、比較分析成纖維細(xì)胞的CD90表達(dá)與其它4種蛋白表達(dá)的相
3、關(guān)性。 結(jié)果:1、成功構(gòu)建研究增生性瘢痕的組織芯片,用于免疫組化檢測(cè)和多因素分析。2、免疫組織化學(xué)染色顯示18例增生性瘢痕組織中11例有CD90陽性表達(dá)的成纖維細(xì)胞,18例瘢痕交界處組織有8例陽性表達(dá),18例瘢痕周圍正常皮膚組織只有3例陽性表達(dá),增生性瘢痕組與瘢痕交界處組相比無顯著性差異(P>0.05),兩組與正常皮膚組相比均有顯著性差異(P<0.05)。3、TGF-β1和α-SMA在增生性瘢痕組和瘢痕交界處組中均有較高程度表達(dá)
4、,兩組相比無顯著性差異(P>0.05),且TGF-β1、α-SMA表達(dá)具有相關(guān)性。而兩者在瘢痕周圍正常皮膚組織中僅有少量表達(dá),與增生性瘢痕和瘢痕交界處組織相比均有顯著性差異(P<0.05)。4、增生性瘢痕和瘢痕交界處組織中I型和III型膠原表達(dá)相近,兩組比較均無顯著性差異(P>0.05),增生性瘢痕以I型膠原為主,瘢痕周圍正常皮膚以III型膠原為主。5、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)增生性瘢痕成纖維細(xì)胞CD90和TGF-β1、α-SMA的表達(dá)具有相關(guān)性
5、。 結(jié)論:1、組織芯片用于多因素比較研究具有高效率、質(zhì)控好的優(yōu)點(diǎn),可用于增生性瘢痕的相關(guān)研究。2、在增生性瘢痕中,CD90陽性表達(dá)的成纖維細(xì)胞可能是瘢痕異常增生的特異表型。3、TGF-β1在增生性瘢痕中的表達(dá)增強(qiáng),提示TGF-β1可能參與了增生性瘢痕的形成并起著重要的作用,故在預(yù)防和治療增生性瘢痕中具有一定的臨床意義。4、TGF-β1可以誘導(dǎo)α-SMA在增生性瘢痕成纖維細(xì)胞中的表達(dá)作用。5、增生性瘢痕組織中Ⅰ型和Ⅲ型膠原的合成及
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