簡(jiǎn)介：,病毒學(xué)研究方法,病毒培養(yǎng)方法形態(tài)學(xué)研究方法免疫學(xué)血清學(xué)方法生化、生物物理與分子生物學(xué)方法,1、體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)二十世紀(jì)中期動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的建立，極大推動(dòng)了動(dòng)物病毒學(xué)研究的發(fā)展原代成纖維細(xì)胞建株成纖維細(xì)胞上皮細(xì)胞,原代成纖維細(xì)胞建株成纖維細(xì)胞上皮細(xì)胞,PIGKIDNEYCELLSIBRS2GROWINGONCYTODEX1,VEROCELLSGROWINGONCYTODEX1,人二倍體細(xì)胞培養(yǎng),接種細(xì)胞24小時(shí),接種細(xì)胞72小時(shí),收毒第3天,,,,,,MDCK細(xì)胞,VERO細(xì)胞培養(yǎng),接種細(xì)胞24小時(shí),接種細(xì)胞48小時(shí),接種細(xì)胞60小時(shí),VERO細(xì)胞接種PEDV病毒病變過(guò)程照片,VERO細(xì)胞培養(yǎng),ST細(xì)胞,接種細(xì)胞24小時(shí),接種細(xì)胞48小時(shí),ST細(xì)胞,接種偽狂犬病毒病變過(guò)程照片,MARC145細(xì)胞,接種細(xì)胞24小時(shí),接種細(xì)胞38小時(shí),接種細(xì)胞50小時(shí),MARC145細(xì)胞,接種PRRSV病毒病變過(guò)程照片,PK15細(xì)胞,接種細(xì)胞24小時(shí),接種細(xì)胞36小時(shí),接種細(xì)胞48小時(shí),PK15細(xì)胞,接種TGEV病毒病變過(guò)程照片,MDCK細(xì)胞,接種細(xì)胞24小時(shí),接種細(xì)胞48小時(shí),接種細(xì)胞72小時(shí),MDCK細(xì)胞,接種H9N2病毒病變過(guò)程照片,細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在病毒學(xué)中的應(yīng)用病毒生物學(xué)定量病毒克隆化獲得遺傳均一的病毒方便地生產(chǎn)病毒同步化研究病毒復(fù)制的過(guò)程，提高實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性,病毒的定量并非所有的病毒顆粒都有感染活性有感染活性的病毒顆粒一般僅占總數(shù)的幾百到幾萬(wàn)分之一,病毒的定量病毒的定量分為物理顆粒的數(shù)量有感染活性的顆粒的數(shù)量有感染活性的顆粒的數(shù)量，更有生物學(xué)意義特稱(chēng)為或TITRE病毒的效價(jià)TITERTITRE,病毒效價(jià)的測(cè)定（之一）空斑測(cè)試（PLAQUEASSAY）用稀釋的病毒液感染單層細(xì)胞，蓋上瓊脂，限制病毒的流動(dòng)病毒感染造成局部細(xì)胞死亡或病變，形成肉眼可見(jiàn)的“斑”或“空斑”（噬菌體中噬菌斑）根據(jù)“斑”的數(shù)量和稀釋倍數(shù)可以統(tǒng)計(jì)病毒的效價(jià),病毒空斑,未感染的細(xì)胞被染成紅色,病毒空斑,顯微鏡下的空斑帶有LACZ基因的重組病毒形成的空斑,病毒效價(jià)的測(cè)定（多孔板終點(diǎn)稀釋法）病毒逐級(jí)稀釋接入長(zhǎng)有細(xì)胞的孔中，培養(yǎng)后觀察各孔中細(xì)胞是否被感染，計(jì)算TCID50（TISSUECULTURE50INFECTIONDOSE一半的孔被感染時(shí)的稀釋度）,病毒效價(jià)的相對(duì)性用不同的細(xì)胞株去測(cè)定病毒的效價(jià)，可能會(huì)得到完全不同的效價(jià)數(shù)據(jù)需要標(biāo)準(zhǔn)化,病毒感染復(fù)數(shù)MULTIPLICITYOFINFECTION,MOI,病毒感染復(fù)數(shù)病毒感染細(xì)胞時(shí)平均每個(gè)細(xì)胞的病毒數(shù),1萬(wàn)個(gè)細(xì)胞，為了保證99細(xì)胞感染病毒，至少有一個(gè)病毒感染，共需要多少病毒病毒感染細(xì)胞是隨機(jī)的獨(dú)立事件群體感染時(shí)，有的細(xì)胞被1個(gè)病毒粒子感染，有的被2個(gè)病毒粒子感染有的可能沒(méi)有被病毒感染病毒感染細(xì)胞的情況，符合泊松分布PKEMMK/K其中M病毒感染復(fù)數(shù)，PK細(xì)胞被K個(gè)病毒感染的幾率所以未被感染的細(xì)胞的比率P0EM被1個(gè)病毒感染的細(xì)胞比率P1EMM被2個(gè)病毒感染的細(xì)胞比率P2EMM2/2,,問(wèn)題PFU與TCID50間的換算關(guān)系是1TCID5007PFU為什么,感染復(fù)數(shù)對(duì)病毒感染的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有很大影響低感染復(fù)數(shù)時(shí)感染不同步高感染復(fù)數(shù)時(shí)病毒易產(chǎn)生變異不同的實(shí)驗(yàn)要求不同的感染復(fù)數(shù),2、活體培養(yǎng)方法仍有許多病毒缺乏可供其復(fù)制的離體細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)如乙肝病毒，大多數(shù)植物病毒活體系統(tǒng)還可提供病毒與宿主相互作用的信息免疫反應(yīng)致病機(jī)理治療方法最常用活體系統(tǒng)之一雞胚,雞胚用于繁殖病毒、制備疫苗,雞胚的構(gòu)造和病毒培養(yǎng),流感病毒,單純皰疹病毒,病毒在雞胚中的繁殖流感病毒單純皰疹病,活體培養(yǎng)方法免疫缺陷動(dòng)物SCID小鼠）對(duì)病毒感染無(wú)免疫排斥可接入人的免疫細(xì)胞等，使之具有人的免疫功能，用于研究HIV、皰疹病毒等與免疫系統(tǒng)的相互關(guān)系SCIDSEVERECOMBINEDIMMUNODEFICIENT,二、病毒形態(tài)學(xué)研究方法1、光學(xué)顯微鏡病毒細(xì)小，一般光學(xué)顯微鏡下不可見(jiàn)但有時(shí)可見(jiàn)病毒聚集，或衍生形成的包涵體,狂犬病毒包涵體,病毒包含體,昆蟲(chóng)桿狀病毒的多角體,2、電子顯微鏡,噬菌體負(fù)染，透射電鏡皰疹病毒感染細(xì)胞的超薄切片，透射電鏡,新的電鏡技術(shù)冰凍電鏡低輻射電鏡,冰凍電鏡圖像重構(gòu)技術(shù),冰凍電鏡解析病毒結(jié)構(gòu),一種綠藻病毒的冰凍電鏡重構(gòu),冰凍電鏡解析病毒結(jié)構(gòu),質(zhì)型多角體病毒冰凍電鏡圖,X射線晶體學(xué)通過(guò)X射線衍射研究病毒中原子、分子的排列,研究可形成晶體的病毒,熒光顯微鏡,新的熒光顯微鏡技術(shù)用于實(shí)時(shí)跟蹤AAV入侵的過(guò)程,三、免疫學(xué)方法病毒學(xué)與免疫學(xué)是密切相關(guān)的免疫技術(shù)在病毒學(xué)中的應(yīng)用利用抗原抗體反應(yīng)的專(zhuān)一性進(jìn)行病毒的檢測(cè)病毒的鑒定分型病毒的定量特異性抗體的監(jiān)測(cè),常用免疫學(xué)技術(shù)血球凝集試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）免疫印跡試驗(yàn)（WESTERNBLOT）免疫熒光組織化學(xué)免疫膠體金標(biāo)記免疫共沉淀,血球凝集試驗(yàn)?zāi)承┎《揪哂信c血細(xì)胞表面多糖分子結(jié)合的蛋白（基團(tuán)）。如流感病毒，風(fēng)疹病毒,補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)游離的補(bǔ)體可導(dǎo)致抗體包被的紅血球破裂溶血但當(dāng)有抗原抗體復(fù)合物存在時(shí)，補(bǔ)體就會(huì)與抗原抗體復(fù)合物結(jié)合，可避免溶血。由此可檢測(cè)是否有特定的抗原或抗體存在,補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)測(cè)定特定抗原的量抗體（抗血清）與待測(cè)抗原樣品混合加入一定量的補(bǔ)體加入包被抗體的紅血球測(cè)定溶血,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）用酶標(biāo)記的抗體靈敏地定量檢測(cè)病毒抗原,ELISAENZYMELINKEDIMMUNOSORBENTASSAYA雙抗夾心B間接法,ELISA檢測(cè)抗體,A抗原E標(biāo)記酶S低物,四、生化、生物物理與分子生物學(xué)方法生物物理方法離心技術(shù)病毒顆粒分離純化病毒顆粒的大小、沉降系數(shù)測(cè)定生物化學(xué)方法病毒顆粒生物化學(xué)組分分析蛋白質(zhì)分析核酸分析其它組分分析,分子生物學(xué)方法舉例病毒反向遺傳學(xué)方法,從合成基因到合成病毒人工合成脊髓灰質(zhì)炎病毒,

簡(jiǎn)介：HIV1病毒載量檢測(cè)及質(zhì)量保證指南_____________________________________________________________________1本指南由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室組織有關(guān)專(zhuān)家撰寫(xiě)，由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心批準(zhǔn)執(zhí)行。編寫(xiě)主持人編寫(xiě)主持人蔣巖編寫(xiě)人員編寫(xiě)人員潘品良蔣巖李敬云鐘平尚紅李太生審核咨詢專(zhuān)家及技術(shù)人員邵一鳴康來(lái)儀朱效科王佑春汪寧朱紅郭志宏季陽(yáng)劉海林肖瑤邱茂鋒馬春濤編寫(xiě)單位編寫(xiě)單位中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心參編單位參編單位中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院上海市疾病預(yù)防控制中心中國(guó)醫(yī)科大學(xué)北京協(xié)和醫(yī)院技術(shù)顧問(wèn)MIKEUSSERYHAOZHANG美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院過(guò)敏及傳染病研究所JAMESWBREMER美國(guó)RUSH大學(xué)醫(yī)學(xué)中心VQA實(shí)驗(yàn)室TREVERPETER克林頓基金中國(guó)艾滋病防治項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)室專(zhuān)家DONALDJBRAMBILLA美國(guó)華盛頓大學(xué)新英格蘭研究所FRANCISFMY加拿大公共衛(wèi)生局疾病預(yù)防控制中心國(guó)家免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室HIV1病毒載量檢測(cè)及質(zhì)量保證指南_____________________________________________________________________3HIV1HIV1病毒載量檢測(cè)及質(zhì)量保證指南（病毒載量檢測(cè)及質(zhì)量保證指南（20072007版）版）目錄目錄第一章總則第二章實(shí)驗(yàn)室設(shè)置第三章樣品的采集、處理、保存、運(yùn)輸?shù)谒恼鲁Ｓ肏IV1病毒載量檢測(cè)方法簡(jiǎn)介第五章室內(nèi)質(zhì)量控制第六章外部質(zhì)量控制第七章實(shí)驗(yàn)室生物安全附表1常見(jiàn)問(wèn)題分析和處理附表2HIV1病毒載量檢測(cè)樣品送檢及接收單附表3HIV1病毒載量檢測(cè)能力驗(yàn)證樣品接收專(zhuān)用單附表4HIV1病毒載量檢測(cè)報(bào)告單附表5HIV1病毒載量能力驗(yàn)證結(jié)果專(zhuān)用報(bào)告單（NASBA附表6HIV1病毒載量能力驗(yàn)證結(jié)果專(zhuān)用報(bào)告單（RTPCR參考文獻(xiàn)縮略語(yǔ)

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簡(jiǎn)介：關(guān)于流感,流行性感冒又稱(chēng)流感，是由正粘病毒科流感病毒引起的急性呼吸道傳染病，根據(jù)病毒的核蛋白NP和基質(zhì)蛋白（MP）抗原性的不同，將病毒分為甲（A）、乙（B）、丙（C）三個(gè)血清型。甲（A）型病毒常以流行形式出現(xiàn)，能引起世界性大流行，感染哺乳動(dòng)物以及鳥(niǎo)類(lèi)，在人和動(dòng)物界（野禽、家禽、豬、馬、鯨等）廣泛存在，引起人和動(dòng)物的流感流行和死亡。,,乙（B）型病毒常引起局部流行，不引起世界性大流行，僅感染人。丙（C）型病毒危害性最小，引起輕微的呼吸道疾病，散發(fā)，不會(huì)引起流行，主要侵害嬰幼兒，豬也是天然的宿主之一。,流感病毒亞型,流感病毒又根據(jù)血凝素（HA）和神經(jīng)氨酸酶（NA）進(jìn)一步劃分不同的亞型。A型流感病毒可分為16個(gè)H亞型（H1～H16）和9個(gè)N亞型（N1～N9）。HA、NA之間的不同組合，使流感病毒形成了許多亞型。由于該病毒是分節(jié)段的負(fù)鏈單股RNA病毒，在復(fù)制過(guò)程中極易發(fā)生基因突變和重組，決定了血清型眾多變異頻繁的特點(diǎn)，隨機(jī)組合可產(chǎn)生144種，已發(fā)現(xiàn)的禽流感有136種，豬流感10種。,關(guān)于豬流感,豬流感（SWINEINFLUENZA,SI）是由A型流感病毒引起的豬的一種急性高度接觸傳染性群發(fā)性呼吸道疾病，臨床癥狀以高熱、精神沉郁、咳嗽、呼吸困難、衰竭為特征，發(fā)病率高，死亡率低，病豬可迅速康復(fù)。,,SI是規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)普遍存在且難以根除的群發(fā)性疾病，不僅可直接引起患豬死亡，而且使患豬生產(chǎn)性能下降，直接影響豬群健康狀態(tài)和豬的質(zhì)量，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害較大。SI多與其它疾病，如豬繁殖與呼吸綜合征、圓環(huán)病毒、傳染性胸膜肺炎、豬鏈球菌等并發(fā)或繼發(fā)感染，會(huì)顯著增加上述疾病的損害程度和病死率，導(dǎo)致死亡率升高。,重要的公共衛(wèi)生意義,由于豬的呼吸道上皮細(xì)胞具有人流感病毒和禽流感病毒的受體，是禽、豬、人流感病毒共同的易感宿主，是流感病毒基因重組或重配的“混合器”和流感病毒新流行毒株產(chǎn)生的“孵育器”，使豬成為流感病毒“禽–哺乳動(dòng)物”種間傳播鏈中重要的中間宿主。SIV不僅可感染豬，也具有感染禽和人類(lèi)的能力。,一、豬流感流行病學(xué)史,該病于1918年首次報(bào)道，與當(dāng)時(shí)發(fā)生于美國(guó)中北部的人流感同時(shí)暴發(fā)，并于1930年在美國(guó)北部首次分離和鑒定到病原體。目前豬流感已遍及包括我國(guó)在內(nèi)的世界幾十個(gè)國(guó)家和地區(qū)。引起豬群發(fā)病的毒株主要是H1N1和H3N2亞型病毒（包括古典豬H1N1、類(lèi)禽H1N1和類(lèi)人／禽H3N2）。,繼H1N1、H3N2亞型之后,H1N2亞型的病毒也成為了主要的流行毒株,并在世界范圍的豬群中廣泛流行。目前已發(fā)現(xiàn)的A型豬流感病毒至少有H1N1、H1N2、H1N7、H3N1、H3N2、H4N6、H5N1和H9N2八種不同的血清亞型,但諸如H1N7、H3N6、H4N6、H5N1和H9N2等亞型的毒株只在原發(fā)地分離到，并沒(méi)有進(jìn)一步引起豬與豬之間的傳播或造成大范圍的豬流感流行。,（一）H1N1病毒流行情況,1918年在美國(guó)的豬群中觀察到SI時(shí)，人群中正流行著H1N1亞型引起的20世紀(jì)最具災(zāi)難性的大流感，而豬群所表現(xiàn)的臨床癥狀和病理變化與當(dāng)時(shí)人群中流行的流感有許多相似之處。1918年豬流感病毒和當(dāng)時(shí)人流感病毒的抗原性和遺傳性都是密切相關(guān)的，它們共同的A型流感病毒H1N1亞型衍生而來(lái)。此后這種古典H1N1豬流感病毒就一直流行于北美、南美、歐洲和亞洲等世界范圍內(nèi)的豬群中。,在歐洲，禽源H1N1病毒于1979年由鳥(niǎo)類(lèi)傳播到豬，并證實(shí)其抗原性與古典豬H1N1毒株不同。十年后，這種類(lèi)禽H1N1病毒在歐洲豬群當(dāng)中再次流行。1992～1993年間在英國(guó)豬群及荷蘭肺炎患者體內(nèi)也檢測(cè)到了此類(lèi)病毒的存在。1993年，在我國(guó)豬體內(nèi)也分離到了這種類(lèi)禽H1N1病毒，并與古典豬H1N1亞型病毒同時(shí)流行。,（二）H3N2病毒流行情況,H3N2亞型首次于1969年在臺(tái)灣分離，1970年香港，在以后的十多年間傳播到了世界各地。1984年，歐洲大陸首次報(bào)道了類(lèi)人H3N2亞洲毒株引起的豬流感暴發(fā)，并且整個(gè)歐洲大陸的豬群都表現(xiàn)高水平的抗體。1988年，美國(guó)許多接種了H1N1流感疫苗的豬場(chǎng)暴發(fā)嚴(yán)重的豬流感，其病原經(jīng)鑒定為H3N2亞型毒株。,近幾年發(fā)生于日本、韓國(guó)、美國(guó)的H1N2亞型SIV是H1N1和H3N2的重組產(chǎn)物。2004年美國(guó)出現(xiàn)了新型H3N1豬流感病毒，其HA基因來(lái)源于火雞的H3N2流感病毒，而NA來(lái)自人的H1N1流感病毒。2006年9月，在美國(guó)的發(fā)病豬群中分離到了禽、豬、人流感重組的H2N3豬流感病毒。,（三）我國(guó)的流行情況,豬流感的病原學(xué)和血清學(xué)調(diào)查都顯示，很多省市都有嚴(yán)重的豬流感流行。H1N1和H3N2亞型是中國(guó)豬流感的主要流行毒株。1991年，在中國(guó)豬群中首次分離到H1N1亞型豬流感病毒，并證實(shí)是由國(guó)外豬傳入的。在2000年之前，未見(jiàn)我國(guó)大陸豬群中有H1N1流感暴發(fā)的報(bào)道。2000年之后，H1N1的分離率顯著提高。,H1N1,2001年，從廣東的25豬場(chǎng)中分離到7株H1N1亞型豬流感病毒。2002年，從北京的豬群中分離到2株H1N1亞型豬流感病毒。20002003年，從我國(guó)東北、華北、華東、華南、西南等地區(qū)豬群分離鑒定了25株古典型H1N1亞型豬流感病毒。2006年，從廣東豬群中分離到1株類(lèi)人H1N1亞型豬流感病毒。,H3N2,2000年后，H3N2豬流感病毒的分離率也顯著提高。20002001年，從黑龍江、吉林、遼寧、安徽、山東、內(nèi)蒙、河南、河北、江蘇、浙江、湖北、福建、廣東、海南、上海等省、市豬群中分離到39株H3N2豬流感病毒。20052006年，從黑龍江、廣東豬群中分離到4株類(lèi)人H3N2亞型豬流感病毒。從分離結(jié)果看，H3N2和H1N1在中國(guó)的豬群中的分離率分別為08和07，這說(shuō)明H3N2和H1N1是中國(guó)豬群中的主要流行毒株。,H9N2,豬流感H9N2亞型流感病毒的研究資料相對(duì)較少。1998年從中國(guó)供港豬中首次分離到4株H9N2亞型流感病毒，其所有基因片段與早期H9N2亞型AIV高度同源，說(shuō)明該亞型毒株幾年前已突破禽種間屏障進(jìn)入豬群并在豬群中聲息演化。這也是首次從哺乳動(dòng)物體內(nèi)分離到H9N2亞型流感病毒。2001年在山東和福建豬群中分離到H9N2亞型流感病毒，2002年在遼寧、廣東、山東、重慶的豬血清中檢測(cè)到抗H9N2亞型流感病毒抗體，2003年再次從山東和福建豬群中分離到H9N2亞型流感病毒。,H5N1,2001年以后，從中國(guó)豬群中分離到H5N1病毒株。,遺傳分析,通過(guò)基因序列分析表明國(guó)內(nèi)H1N1病毒分離株與90年代北美SIV的同源性很高，在96左右。通過(guò)比較北美SIV的同源性發(fā)現(xiàn)，20年來(lái)，古典H1N1SIV以平均0405的年變異率在我國(guó)的豬群中傳播演化。這說(shuō)明豬流感病毒可以在遺傳性不發(fā)生明顯改變的情況下在豬群中長(zhǎng)期存在，但并不一定引起豬發(fā)病，只有在條件適合時(shí)才會(huì)引起豬群發(fā)病。,小結(jié),已有的研究認(rèn)為，我國(guó)南方地區(qū)的生態(tài)環(huán)境有利于流感病毒生息和變異，可能成為世界新流感新亞型出現(xiàn)和爆發(fā)的疫源地應(yīng)引起高度重視。全球幾乎每年都有部分國(guó)家和地區(qū)暴發(fā)豬流感，而且不斷有新亞型的豬流感病毒出現(xiàn)，這給豬流感的防治工作帶來(lái)了極大的困難。加強(qiáng)對(duì)豬流感的檢測(cè)力度，盡可能地對(duì)豬流感的流行趨勢(shì)做出預(yù)測(cè)，從而及時(shí)有效地防止豬流感的暴發(fā)。,二、豬在流感病毒種間傳播的作用,已有的研究認(rèn)為，包括豬在內(nèi)的所有哺乳動(dòng)物的流感病毒均來(lái)源于禽。由于人豬鳥(niǎo)和其他哺乳動(dòng)物的密切接觸，給流感病毒的跨越物種傳播提供了一個(gè)自然發(fā)生的機(jī)會(huì)。,,,人豬共居,,由于豬的呼吸道上皮細(xì)胞表面同時(shí)具有SAΑ2,3GAL和SAΑ2,6GAL兩種類(lèi)型的受體，因而降低了豬的種間屏障，使得豬具有最大限度地被人流感病毒和禽流感感染的能力。當(dāng)禽流感病毒感染豬后，在宿主種間屏障、疫苗的選擇壓力下，可以使禽流感病毒受體連接特異性由Α2,3轉(zhuǎn)變?yōu)棣?,6連接，從而為鳥(niǎo)類(lèi)與人之間提供一個(gè)潛在的鏈接，使禽流感病毒可以向人進(jìn)行傳播。,研究表明當(dāng)禽流感病毒和人流感病毒同時(shí)感染豬時(shí)，在豬體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生這兩種病毒的重組毒株。同盡管有些禽病毒不能在豬中復(fù)制，但可以在與豬流感病毒共感染豬時(shí)提供基因產(chǎn)生重組病毒。所有這些均可證明，豬不僅是禽源和人源流感病毒的“中間宿主”，也是“混合器”，而在流感病毒生態(tài)學(xué)上占有重要位置。豬在產(chǎn)生人流感新毒株方面起到重要作用。,由于豬和其他物種尤其是與人的直接或間接接觸在世界范圍內(nèi)都是很密切的，致使豬作為流感病毒中間宿主的角色變得異常重要，為流感病毒的進(jìn)化和種間傳播提供了重要的路徑。流感專(zhuān)家認(rèn)為，豬體內(nèi)的流感病毒是人流感病毒的潛在來(lái)源，下一次人類(lèi)流感大流行的流行株基因中將含有現(xiàn)今流行于歐洲豬群中的禽流感病毒基因片段，對(duì)豬群中禽流感病毒基因的監(jiān)測(cè)可預(yù)兆引發(fā)人類(lèi)下一次流感大流行的病毒株。,三、豬作為中間宿主在人流感病毒進(jìn)化中的作用,回顧20世紀(jì)幾次人類(lèi)流感的大流行，可以看出每次人類(lèi)流感的發(fā)生都伴隨有同種亞型豬流感的發(fā)生。1976年在美國(guó)的新澤西洲軍事基地暴發(fā)的由豬流感病毒引發(fā)的造成一人死亡、數(shù)百人疑似感染的人流感中，懷疑可能發(fā)生了人與人之間的傳播。這一事件在當(dāng)時(shí)震驚了全世界，也最先證明了人可以感染豬流感病毒。1974年以后，美國(guó)已有至少9次人感染豬流感的報(bào)道，其中也包括致死性感染。期間，其他國(guó)家也出現(xiàn)了相關(guān)報(bào)道。,在北美歐洲亞洲已有A型豬流感病毒感染人的報(bào)道。這些感染事例涉及古典的H1N1豬流感病毒、重組的H3N2病毒及重組的H1N1病毒。但這種感染只是零星地發(fā)生在與感染豬有過(guò)直接接觸的人當(dāng)中，所以其感染范圍不大，并沒(méi)有造成世界性的恐慌。,但是，SIV在公共衛(wèi)生和流感病毒的進(jìn)化史上具有重要意義，人類(lèi)的流感爆發(fā)與豬流感的爆發(fā)有驚人的平行性和相關(guān)性。種種跡象表明，H1N1和H3N2亞型SIV與同時(shí)期引起人流感大流行的H1N1和H3N2人流感病毒遺傳關(guān)系十分緊密。,從生態(tài)學(xué)意義上講，豬不可避免的要與人或鳥(niǎo)類(lèi)有密切的接觸，而由于豬對(duì)禽流感病毒和人流感病毒均易感，所以豬自然而然地成為流感病毒的重要宿主。通過(guò)豬的混合器作用，使人和禽流感病毒具有了跨物種傳播的能力，也使豬流感具有了重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義。,四、二十世紀(jì)三次流感大流行,進(jìn)入二十世紀(jì)，人類(lèi)經(jīng)歷過(guò)三次流感大流行，即1918年的西班牙流感、1957年的亞洲流感和1968年的香港流行。每次流感大流行都給人類(lèi)帶來(lái)了巨大的災(zāi)難，并且都可能與SIV保持著千絲萬(wàn)縷的聯(lián)系。,（一）西班牙流感,1918年的西班牙流感是由H1N1亞型流感病毒引起的，是流感大流行最嚴(yán)重的一次，導(dǎo)致全球20004000萬(wàn)人死亡，患病7億以上。SI也正是在西班牙流感期間在美國(guó)、匈牙利和中國(guó)首次被觀察到，同樣也是H1N1亞型流感病毒引起的。它們的病原H1N1亞型流感病毒可能來(lái)自一個(gè)共同的祖先。最近科學(xué)家們利用反向遺傳手段，拯救出該病毒，序列分析表明該病毒來(lái)源于禽流感病毒。但該禽流感病毒究竟是“禽–人”直接的跨種傳播，還是經(jīng)歷“禽–豬–人”種間適應(yīng)，還不得而知。,,1918SPANISHFLU,（二）亞洲流感,1957年的亞洲流感是由H2N2亞型流感病毒引起，首先發(fā)生在我國(guó)貴州西部，隨后同年傳遍全世界，病死率不高，有報(bào)道稱(chēng)共造成全球約280萬(wàn)人死亡。此此流行毒株是二源重組病毒，它的PB1、HA和NA基因來(lái)自于禽流感病毒，而其它5個(gè)（PB2、PA、NP、M、NS）基因來(lái)源于當(dāng)時(shí)流行于人群中的H1N1亞型流感病毒。關(guān)于該流行株產(chǎn)生的機(jī)制很可能是禽流感病毒和人流感病毒經(jīng)歷了豬體內(nèi)的重組過(guò)程，然后由豬傳染給人，從而導(dǎo)致此次流感大流行。,（三）香港流感,1968年首發(fā)于我國(guó)香港特區(qū)并波及全世界，是由H3N2亞型毒株引起的，它的傳播速度和發(fā)病率均不及第二次。此此流行株的PB1和HA基因來(lái)自于禽流感病毒，而其它6個(gè)（PB2、PA、NP、NA、M、NS）基因來(lái)自當(dāng)時(shí)流行于人群中的H2N2病毒，也是來(lái)自人流感病毒和禽流感病毒的二源重組病毒。該流行株產(chǎn)生的機(jī)制與1957年亞洲流感流行株產(chǎn)生的機(jī)制類(lèi)似，同樣可能經(jīng)歷了豬體內(nèi)的重組過(guò)程。,五、當(dāng)前全球A∕H1N1流感流行情況,4月中下旬，墨西哥和美國(guó)相繼出現(xiàn)豬流感疫情，并逐漸向其他國(guó)家蔓延。美國(guó)急控中心證實(shí)，病原是A∕H1N1型流感病毒。這一毒株是一種新型變異病毒，是人類(lèi)流感病毒、北美洲禽流感病毒，以及北美洲、歐洲和亞洲豬流感病毒的混合體。FAO病毒中包含從1998年起就在歐洲、亞洲、美洲的生豬中傳播的病毒（8個(gè)基因片段中5個(gè)來(lái)自豬，2個(gè)來(lái)自禽，1個(gè)來(lái)自人），說(shuō)明病毒是一種在豬上傳播的毒株，經(jīng)1012年逐漸在人類(lèi)身上產(chǎn)生變異，并具備了禽流感和人流感病毒的基因成分。,這次的豬流感病毒可在人際間傳播，目前無(wú)疫苗可防，可使用抗病毒藥物治療。此前大多數(shù)流感的易患人群均為老年人和兒童，而這一次的流感主要攻擊人群為青壯年。全部為人傳人，沒(méi)有證實(shí)是由豬傳播開(kāi)并傳染人（WHO）。所有患者之前都沒(méi)有與豬的接觸史?；颊邼摲腥酒诎l(fā)病第一天就排毒。,豬流感疫情暴發(fā)后，各國(guó)專(zhuān)家組成了世界衛(wèi)生組織豬流感疫情緊急委員會(huì)，于4月25日舉行了第一次會(huì)議。世界衛(wèi)生組織總干事陳馮富珍在25日晚間發(fā)表的聲明表示“建議所有國(guó)家加強(qiáng)對(duì)非正常暴發(fā)的流感類(lèi)疾病和嚴(yán)重肺炎的監(jiān)控?！泵绹?guó)疾控中心專(zhuān)家表示，疫情一旦在地理上的感染范圍擴(kuò)大，這種病毒可能很難控制。,4月27日世界衛(wèi)生組織決定將流感大流行級(jí)別從3級(jí)提高到4級(jí)，4月29日提高到5級(jí)。世衛(wèi)組織的流感大流行警告共分6個(gè)級(jí)別?！暗?級(jí)”意味著一種新的亞型流感病毒正在造成人類(lèi)感染，但還沒(méi)有造成到在人際間有效且持續(xù)地傳播擴(kuò)散?！暗?級(jí)”意味著一種新病毒在人際間傳播，可以引起“群體性”暴發(fā)。第5級(jí)”意味著同一類(lèi)型流感病毒已在同一地區(qū)至少兩個(gè)國(guó)家人際間傳播，并造成持續(xù)性疫情。,命名質(zhì)疑,4月27日，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）總干事瓦拉特表示，墨西哥等國(guó)近日出現(xiàn)的流感病毒是多種病毒的混合體，目前只在人與人之間傳播，并不像人們通常認(rèn)為的完全由豬引起的，因此把目前出現(xiàn)的流感簡(jiǎn)單地命名為豬流感是不準(zhǔn)確的。瓦拉特建議，應(yīng)按照傳統(tǒng)，以發(fā)源地對(duì)流感進(jìn)行命名，將這次流感稱(chēng)為北美流感。,美國(guó)政府官員4月28日表示正考慮為眼下肆虐的流感疫情換名稱(chēng)。美國(guó)官員認(rèn)為，雖然豬流感病毒對(duì)這場(chǎng)疫情災(zāi)難有一定影響，但把目前流行的流感簡(jiǎn)單地命名為“豬流感”并不準(zhǔn)確，將對(duì)北美豬肉及豬肉制品出口造成嚴(yán)重影響。建議稱(chēng)呼當(dāng)下疫情為“2009H1N1流感”,歐盟28日將此疫情的稱(chēng)呼更改為“新型流感”為避免給畜牧業(yè)等一些產(chǎn)業(yè)帶來(lái)負(fù)面影響，將不使用‘豬流感’這一稱(chēng)呼，而是稱(chēng)之為‘新型流感’。世界衛(wèi)生組織4月30日發(fā)布公告指出，從即日起，世衛(wèi)組織在談到本次流感爆發(fā)時(shí)，將使用“A（H1N1）流感”的名稱(chēng)。聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織和世界動(dòng)物衛(wèi)生組織也做出了同樣的決定。5月1日，我國(guó)衛(wèi)生部稱(chēng)“人感染甲型H1N1流感”定為乙類(lèi)傳染病，采取甲類(lèi)傳染病預(yù)防控制措施。,5月2日，加拿大食品檢驗(yàn)局證實(shí)加西部艾伯塔省一豬場(chǎng)的豬身上檢測(cè)出甲型H1N1流感病毒，這是世界首次發(fā)現(xiàn)豬受體這種新病毒感染。這些豬有可能是被一名豬場(chǎng)工人傳染患病的。WHO將豬流感納入重大疫病監(jiān)測(cè)范圍。,國(guó)務(wù)院新聞辦30日舉行加強(qiáng)人感染豬流感防控工作的發(fā)布會(huì)，農(nóng)業(yè)部副部長(zhǎng)高鴻賓在會(huì)上為豬鳴“冤”。“這次是人有病，豬沒(méi)病，這個(gè)病在人際之間傳播，外國(guó)人有病，中國(guó)人沒(méi)病，中國(guó)的豬更沒(méi)有病。”,各國(guó)應(yīng)對(duì)措施,墨西哥總統(tǒng)24日召開(kāi)緊急會(huì)議，宣布全國(guó)進(jìn)入衛(wèi)生緊急狀態(tài)，從24日起關(guān)閉學(xué)校；全民發(fā)放口罩；首都取消一切公共活動(dòng)；總統(tǒng)授權(quán)強(qiáng)制隔離；救援人員發(fā)放防治藥具等。美國(guó)宣布于4月26日進(jìn)入公共衛(wèi)生緊急狀態(tài)，啟動(dòng)CDC的應(yīng)急中心；于WHO、加拿大和墨西哥密切聯(lián)系獲得信息；針對(duì)美國(guó)病例開(kāi)展溯源調(diào)查；在家庭成員和密切接觸者中開(kāi)展血清學(xué)調(diào)查；開(kāi)展健康教育和風(fēng)險(xiǎn)溝通；要求CDC工作人員進(jìn)行自我監(jiān)測(cè)和報(bào)告等。加拿大加強(qiáng)異常流感病例的報(bào)告，尤其是從墨西哥返回的人員；要求對(duì)方上送所有未分型流感病毒及重癥不明原因呼吸道患者的標(biāo)本；進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)溝通和健康教育；及時(shí)發(fā)布和共享信息等。,,根據(jù)世界衛(wèi)生組織最新數(shù)據(jù)，全球甲型H1N1流感確診病例連續(xù)三天以日均千例的數(shù)量增加。而日本、英國(guó)等多個(gè)國(guó)家擔(dān)心經(jīng)濟(jì)遭受打擊，請(qǐng)世衛(wèi)組織在提升全球警告級(jí)別前要深思。據(jù)世衛(wèi)組織最新公布的資料顯示，截至十九日，全球共有甲型H1N1流感確診及死亡病例九千八百三十例，其中死亡七十九例。這些病例來(lái)自40個(gè)國(guó)家個(gè)地區(qū)。全球死于甲型H1N1流感的病例中，多數(shù)人在感染流感前已患有心臟病、糖尿病等慢性疾病，感染流感后病情惡化最終死亡。而根據(jù)目前臨床觀察，全球慢性病患者以及死亡病例的大約百分之八十五都集中在那些中低收入國(guó)家。感染甲型H1N1流感以及死亡風(fēng)險(xiǎn)較高的人群在發(fā)展中國(guó)家最多。此外，孕婦感染甲型H1N1流感及死亡風(fēng)險(xiǎn)較高，尤其在那些醫(yī)療衛(wèi)生體系薄弱的國(guó)家，流感的侵襲將會(huì)增加孕婦的死亡風(fēng)險(xiǎn)。陳馮富珍強(qiáng)烈呼吁各國(guó)密切關(guān)注疫情動(dòng)態(tài)，各盡所能共同保護(hù)發(fā)展中國(guó)家，以避免它們?cè)俅纬蔀槿蛐砸卟≈械淖畲笫芎φ摺?,過(guò)去兩天來(lái)，日本的甲型H1N1流感確診病例迅速攀升到一百七十多例，引起世衛(wèi)組織等高度關(guān)注。輿論預(yù)測(cè)，如果日本的疫情進(jìn)一步惡化，世衛(wèi)組織可能在近期宣布流感大流行警告級(jí)別升至六級(jí)。但在本次世界衛(wèi)生大會(huì)上，日本、英國(guó)、墨西哥等多個(gè)國(guó)家稱(chēng)，世衛(wèi)組織一旦宣布全球流感大流行，勢(shì)必會(huì)引發(fā)各國(guó)民眾恐慌，世界經(jīng)濟(jì)將遭受沉重打擊。比如某些國(guó)家可能關(guān)閉邊界、限制旅行；各國(guó)機(jī)場(chǎng)可能加強(qiáng)檢疫和隔離措施；疫苗生產(chǎn)商將被迫停產(chǎn)季節(jié)性流感疫苗，轉(zhuǎn)產(chǎn)針對(duì)甲型H1N1流感病毒的疫苗；各國(guó)的醫(yī)療衛(wèi)生體系屆時(shí)也可能不堪重負(fù)。這些國(guó)家請(qǐng)世衛(wèi)組織在決定提升警告級(jí)別前一定要深思，并提議應(yīng)修改宣布進(jìn)入流感大流行的標(biāo)準(zhǔn)，認(rèn)為除了流感在全球的傳播范圍，還應(yīng)該考慮病毒的致命程度。,中國(guó),國(guó)務(wù)院4月28號(hào)召開(kāi)專(zhuān)門(mén)會(huì)議研究部署防控工作，要求當(dāng)前要按照“高度重視、積極應(yīng)對(duì)、聯(lián)防聯(lián)控、依法科學(xué)處置”的原則，抓好重點(diǎn)工作。公共衛(wèi)生緊急事件，“堵外防內(nèi)”。國(guó)務(wù)院于5月5日召開(kāi)第61次常務(wù)會(huì)議精神，進(jìn)一步部署甲型H1N1流感防控工作。,農(nóng)業(yè)部緊急部署,一是成立豬流感監(jiān)測(cè)預(yù)防專(zhuān)家組。二是做好應(yīng)急準(zhǔn)備。三是加強(qiáng)監(jiān)測(cè)。四是加強(qiáng)豬流感研究工作。五是促進(jìn)生豬生產(chǎn)穩(wěn)定發(fā)展。六是科學(xué)引導(dǎo)輿論。,強(qiáng)化措施,一是切實(shí)加強(qiáng)甲型H1N1流感監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查工作。二是切實(shí)加強(qiáng)養(yǎng)豬場(chǎng)綜合防疫管理。三是切實(shí)加強(qiáng)檢疫監(jiān)管。四是切實(shí)加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理。五是切實(shí)加強(qiáng)聯(lián)防聯(lián)控。六是切實(shí)加強(qiáng)督促檢查。七是切實(shí)加強(qiáng)應(yīng)急準(zhǔn)備。八是切實(shí)穩(wěn)定生豬生產(chǎn)。,在前期豬群中甲型H1N1流感監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查工作的基礎(chǔ)上，安排對(duì)家禽和野鳥(niǎo)開(kāi)展甲型H1N1流感監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查，進(jìn)一步強(qiáng)化應(yīng)急物資儲(chǔ)備。,應(yīng)急預(yù)案,4月29日，發(fā)布農(nóng)業(yè)部門(mén)應(yīng)對(duì)人感染豬流感病例應(yīng)急預(yù)案，規(guī)范各級(jí)獸醫(yī)主管部門(mén)協(xié)助衛(wèi)生部門(mén)查找人感染豬流感病例的病原，預(yù)防、控制和撲滅豬流感疫情，防治疫情擴(kuò)散蔓延等工作。對(duì)我國(guó)一旦發(fā)生人感染北美豬流感病毒病例后，各級(jí)獸醫(yī)主管部門(mén)會(huì)同有關(guān)部門(mén)開(kāi)展應(yīng)急監(jiān)測(cè)、預(yù)警、疫情報(bào)告、疫情處置、應(yīng)急響應(yīng)等做出詳細(xì)規(guī)定。,5月5日，下發(fā)豬感染甲型H1N1流感應(yīng)急預(yù)案。對(duì)各級(jí)獸醫(yī)主管部門(mén)開(kāi)展甲型H1N1流感感染豬的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、監(jiān)測(cè)、預(yù)警、控制和撲滅、疫情報(bào)告、應(yīng)急響應(yīng)等做出詳細(xì)規(guī)定。,一、應(yīng)急監(jiān)測(cè)臨床觀察、流行病學(xué)調(diào)查、血清學(xué)和病原學(xué)監(jiān)測(cè)二、預(yù)警三、疫情報(bào)告和確認(rèn)對(duì)疑似疫情，采取隔離、疫情溯源和跟蹤。對(duì)確診疫情，要及時(shí)劃定疫點(diǎn)、疫區(qū)、受威脅區(qū)，采取撲殺、無(wú)害化處理、消毒、關(guān)閉受威脅區(qū)生豬交易市場(chǎng)和生豬定點(diǎn)屠宰場(chǎng)等措施。,四、應(yīng)急處置檢測(cè)發(fā)現(xiàn)生豬感染甲型H1N1流感的，立即按照國(guó)家突發(fā)重大動(dòng)物疫情應(yīng)急預(yù)案規(guī)定，啟動(dòng)重大（Ⅱ級(jí)）應(yīng)急響應(yīng)機(jī)制，必要時(shí)啟動(dòng)特別重大（Ⅰ級(jí)）應(yīng)急響應(yīng)機(jī)制，按規(guī)定開(kāi)展處置工作。五、保障措施物資、資金、技術(shù)、人員。,要求各地畜牧獸醫(yī)部門(mén)認(rèn)真執(zhí)行預(yù)案，并結(jié)合本地實(shí)際情況，制定實(shí)施方案，保障生豬生產(chǎn)健康發(fā)展，保障人民身體健康安全。,五、生物安全,一、實(shí)驗(yàn)室生物安全農(nóng)業(yè)部辦公廳關(guān)于加強(qiáng)甲型H1N1流感病毒實(shí)驗(yàn)活動(dòng)監(jiān)管工作的通知，明確甲型H1N1流感是新型人畜共患病，對(duì)涉及甲型H1N1流感病毒實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的，要進(jìn)行嚴(yán)格審批。未經(jīng)農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)，一律不得擅自從事動(dòng)物間甲型H1N1流感病毒的分離工作。二、人員安全防護(hù),六、對(duì)當(dāng)前疫情形勢(shì)的判斷,1、與季節(jié)性流感相似；2、比季節(jié)性流感弱，很快平息；3、與季節(jié)性流感相比，傳播速度快，發(fā)病率高，死亡率高。目前疫情表現(xiàn)的“不確定性”。,七、疫控機(jī)構(gòu)的主要工作,當(dāng)前的流感疫情表明豬被感染的可能性不被排除，盡管經(jīng)濟(jì)學(xué)意義不大，但公共衛(wèi)生意義巨大。為此需做好以下工作1、摸清家底每日觀察豬群狀況，養(yǎng)殖的數(shù)量、規(guī)模、飼養(yǎng)方式，為進(jìn)一步的防控提供背景資料。2、疫情監(jiān)測(cè)農(nóng)業(yè)部已經(jīng)下發(fā)了監(jiān)測(cè)方案，兵團(tuán)也做了相應(yīng)部署，各單位應(yīng)按時(shí)上報(bào)有關(guān)情況和數(shù)據(jù)，對(duì)轄區(qū)防控工作進(jìn)行評(píng)估。,,3、加強(qiáng)衛(wèi)生監(jiān)督管理嚴(yán)格檢疫出證的管理；在監(jiān)測(cè)的基礎(chǔ)上，一旦出現(xiàn)疫情，按1類(lèi)疫病處理（目前OIE將此病列為二類(lèi)疫病，我國(guó)列為三類(lèi)疫?。幚泶胧⒎浅?yán)格，注意人員防護(hù)。4、各級(jí)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理包括轄區(qū)實(shí)驗(yàn)室的管理和自身實(shí)驗(yàn)室的管理，嚴(yán)禁開(kāi)展病原的分離活動(dòng)。5、做好應(yīng)急預(yù)案和防控物質(zhì)準(zhǔn)備。6、做好技術(shù)儲(chǔ)備和相關(guān)技術(shù)培訓(xùn)工作。7、指導(dǎo)養(yǎng)殖者做好其它疫病的防控。,,責(zé)任重大任務(wù)艱巨,

簡(jiǎn)介：第七章細(xì)菌與病毒的微生物學(xué)檢查法,微生物學(xué)教研室JIZZHAOJ12ZHAOALIYUNCOM,教學(xué)大綱,掌握內(nèi)容標(biāo)本的采集和送檢原則病原菌的檢驗(yàn)程序細(xì)菌感染的血清學(xué)診斷及常用方法了解內(nèi)容病原體的抗原成分、核酸及其他成分的檢測(cè)方法,病原學(xué)檢查的目的,進(jìn)行病因?qū)W診斷指導(dǎo)合理用藥觀察治療進(jìn)行傳染病的流行病學(xué)調(diào)查,,標(biāo)本的采集和送檢六原則※,無(wú)菌操作避免雜菌污染,不同期不同標(biāo)本,用抗生素以前,采集病變明顯部位,,,,,,,,,,,,,運(yùn)送注意保存,采集雙份血清,第一節(jié)細(xì)菌感染的微生物學(xué)檢查法,可疑細(xì)菌感染,,采集標(biāo)本,,,血清學(xué)實(shí)驗(yàn)雙份血清,直接形態(tài)學(xué)檢查,細(xì)菌成分檢測(cè),,特異性抗體檢測(cè),,細(xì)菌分離培養(yǎng),,鑒定,,,形態(tài)學(xué)檢查生化學(xué)檢查血清學(xué)鑒定藥物敏感實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（毒力）實(shí)驗(yàn),,,抗原檢測(cè),核酸檢測(cè),,,直接凝集實(shí)驗(yàn)協(xié)同凝集實(shí)驗(yàn)乳膠凝集實(shí)驗(yàn)免疫熒光檢測(cè)ELISA等,核酸雜交聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）DNA芯片,凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)中和試驗(yàn)ELISA等,,,,,,,細(xì)菌學(xué)診斷,檢測(cè)病原菌成分,檢測(cè)患者血清中特異性抗體,,細(xì)菌病原學(xué)檢查法,形態(tài)學(xué)檢查分離培養(yǎng),純培養(yǎng)生化試驗(yàn)血清學(xué)鑒定藥物敏感試驗(yàn)毒力實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),,抗原,核酸,一、細(xì)菌學(xué)診斷,（一）形態(tài)學(xué)檢查,光學(xué)顯微鏡檢查法細(xì)菌染色檢查法革蘭染色法抗酸染色法負(fù)染法暗視野檢查用于檢查活菌、螺旋體及其動(dòng)力熒光顯微鏡,腦脊液的直接涂片染色肺炎鏈球菌,,鏈球菌,淋病奈瑟球菌膿液直接涂片,結(jié)核分枝桿菌,霍亂弧菌,,暗視野顯微鏡,鉤端螺旋體,肺炎雙球菌,病原菌的分離培養(yǎng)/直接涂片,大小形態(tài)顏色表面性狀透明度溶血性,FLAMESTERILIZEWIRELOOP,METALFORCEPS,ETCBEFOREANDAFTERUSEINAHOODEDBUNSENBURNER,細(xì)菌動(dòng)力的檢測(cè),化膿性球菌,葡萄球菌,鏈球菌,腸道桿菌,大腸埃希菌,沙門(mén)氏菌,志賀菌,細(xì)菌形態(tài)無(wú)特異性可采用生化學(xué)檢查法鑒別細(xì)菌的重要方法,（二）生化試驗(yàn),糖發(fā)酵試驗(yàn)H2S試驗(yàn)枸櫞鹽利用試驗(yàn),鑒定中最重要的生化反應(yīng)※,乳糖發(fā)酵試驗(yàn),腸道非致病菌（埃希菌屬）發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣＋,腸道致病菌（志賀菌屬、沙門(mén)菌屬等）不發(fā)酵乳糖,,,,,（三）血清學(xué)鑒定,利用含已知的特異性抗體的免疫血清，檢測(cè)未知的細(xì)菌抗原，對(duì)細(xì)菌進(jìn)行種的鑒定志賀菌屬、沙門(mén)菌屬常用方法是玻片凝集試驗(yàn),測(cè)定抗生素或其他抗微生物制劑在體外抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的能力方法擴(kuò)散法、稀釋法,（四）藥物敏感試驗(yàn),MICMBC,最低抑菌濃度，MIC最低殺菌濃度，MBC,全自動(dòng)分析儀,全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀,全自動(dòng)生化分析儀,（五）檢測(cè)毒力動(dòng)物實(shí)驗(yàn),1常用動(dòng)物MOUSEGUINEAPIGRABBITDOGMONKEY,接種途徑,皮內(nèi)皮下腹膜內(nèi)靜脈顱內(nèi)椎管內(nèi)鼻內(nèi)灌胃,毒力檢測(cè),半數(shù)致死量LD50半數(shù)感染量ID50,二、檢測(cè)病原菌成分,抗原的檢測(cè)核酸的檢測(cè),（一）抗原的檢測(cè),利用已知的特異性AB檢測(cè)AG的方法常用的方法有玻片凝集協(xié)同凝集試驗(yàn)ELISA免疫熒光法,ELISA,（二）核酸檢測(cè)方法,聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）核酸雜交技術(shù)SOUTHERNBLOTNORTHERNBLOTDOTBLOTINSITUHYBRIDIZATION基因芯片GENECHIP16SRRNA,16SRNA基因序列分析,只存在于原核細(xì)胞型微生物的染色體基因中16SRNA，23SRNA,5SRNA可變區(qū)和保守區(qū)保守區(qū)所有的細(xì)菌所共有可變區(qū)屬和種的特異性,PCR,GENECHIP,,,三、抗體的檢測(cè),用已知細(xì)菌或其AG檢測(cè)相應(yīng)的特異性AB及其量的多少，作為某些病原菌感染的輔助診斷急性期和恢復(fù)期雙份血清，恢復(fù)期效價(jià)升高≥4倍有診斷價(jià)值方法玻片或試管凝集試驗(yàn)、沉淀試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、冷凝集試驗(yàn)、ELISA局限難以早期診斷,第二節(jié)病毒感染的微生物學(xué)檢查法,形態(tài)學(xué)病毒的分離鑒定在培養(yǎng)細(xì)胞中增殖的鑒定指標(biāo)病毒成分的檢測(cè)病毒抗體的檢測(cè),,（一）病毒的形態(tài)學(xué)檢查,電子顯微鏡（EM）免疫電鏡,IEM光學(xué)顯微鏡（CM）包涵體內(nèi)基小體（NEGRIBODY）,HAV,NEGRIBODY,動(dòng)物接種動(dòng)物模型,雞胚接種9～14D,組織培養(yǎng),器官培養(yǎng),組織培養(yǎng),細(xì)胞培養(yǎng),原代細(xì)胞培養(yǎng),,二倍體細(xì)胞培養(yǎng),傳代細(xì)胞培養(yǎng),三大培養(yǎng)方法,（二）病毒的分離培養(yǎng)的方法,,,血凝抑制實(shí)驗(yàn)中和實(shí)驗(yàn)PCR檢測(cè),,,,病毒分離培養(yǎng)及鑒,細(xì)胞病變（CYTOPATHY※紅細(xì)胞吸附HEMADSORPTION病毒干擾作用VIRALINTERFERENCE中和試驗(yàn)NEUTRALIZATIONTEST,NT空斑形成試驗(yàn)PLAQUEFORMATION,病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中增殖的鑒定指標(biāo)※,細(xì)胞病變細(xì)胞病變效應(yīng)※（CPE）,細(xì)胞病變紅細(xì)胞吸附血凝素（HA）病毒干擾作用中和試驗(yàn)病毒數(shù)量及感染性的檢測(cè)空斑形成試驗(yàn)紅細(xì)胞凝集,紅細(xì)胞吸附,病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中增殖的鑒定指標(biāo),,PLAQUE,空斑形成試驗(yàn),用于病毒濃度的精確定量和測(cè)定抗病毒藥物的作用一個(gè)空斑是由一個(gè)病毒大量復(fù)制而成，稱(chēng)為空斑形成單位（PLAQUEFORMINGUNIT，PFU）。病毒的感染量用PFU/ML表示,（三）病毒成分的檢測(cè),病毒抗原的檢測(cè)ELISA病毒核酸的檢測(cè)核酸雜交、PCR、基因芯片,病毒成分的檢測(cè),（四）病毒抗體的檢測(cè),中和試驗(yàn)（NT）血凝抑制試驗(yàn)（HT）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CF）ELISA法蛋白印跡技術(shù),小結(jié),細(xì)菌感染的微生物學(xué)檢查法病原體檢查核酸的檢測(cè)抗原、抗體的檢測(cè)病毒感染的微生物學(xué)檢查法電鏡及免疫電鏡病毒的分離培養(yǎng)和鑒定核酸的檢測(cè)抗原、抗體的檢測(cè),小結(jié),抗細(xì)菌免疫固有免疫※獲得性免疫抗病毒免疫固有免疫干擾素※獲得性免疫,問(wèn)題,采集標(biāo)本的原則病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中增殖的鑒定指標(biāo)干擾素的概念及其抗病毒機(jī)制,自檢內(nèi)容,1機(jī)體抗結(jié)核分枝桿菌的感染免疫主要依賴(lài)A屏障結(jié)構(gòu)B細(xì)胞免疫C抗體的中和作用D非特異性免疫分子E吞噬細(xì)胞的吞噬作用2滅活和清除游離病毒主要依靠A干擾素B抗體C細(xì)胞因子D非特異性免疫分子E皮膚粘膜屏障,自檢內(nèi)容,3抑制病毒的增殖，保護(hù)鄰近細(xì)胞免疫受病毒感染的抗病毒作用機(jī)制是A抗體BNK細(xì)胞C細(xì)胞因子D干擾素ECRP4傷寒病人，病程有5天左右，應(yīng)采集的標(biāo)本是A血液B糞便C尿液D咽部E膿液,

簡(jiǎn)介：1附件2寨卡病毒病流行病學(xué)個(gè)案調(diào)查表一、基本情況一、基本情況（一）患者姓名________________聯(lián)系電話____________如患者年齡14歲，則家長(zhǎng)姓名___________聯(lián)系電話____________（二）性別（1）男（2）女（三）年齡_____歲（四）家庭住址____?。ㄗ灾螀^(qū)直轄市）____市____縣（市區(qū)）_____鄉(xiāng)（鎮(zhèn)街道）_____村（居委會(huì)）（五）工作單位________________________________________________（六）職業(yè)（1）幼托兒童（2）散居兒童（3）學(xué)生（4）教師（5）保育保姆（6）飲食從業(yè)人員（7）商業(yè)服務(wù)（8）醫(yī)務(wù)人員（9）工人（10）民工（11）農(nóng)民（12）牧民（13）漁（船）民（14）干部職員（15）離退人員（16）家務(wù)待業(yè)（17）其他（七）若是輸入性病例，請(qǐng)?zhí)顚?xiě)以下內(nèi)容1國(guó)籍________________________________2從何處入境本地3入境口岸________________________________；入境時(shí)間年月日4入境原因1旅行2商貿(mào)往來(lái)3留學(xué)4探親訪友5其他________________5入境后到經(jīng)地區(qū)及停留時(shí)間地點(diǎn)1___________；日期年月日至年月日地點(diǎn)2___________；日期年月日至年月日二、二、發(fā)病與病與臨床癥狀床癥狀（一）發(fā)病日期_______年______月_______日（二）首發(fā)癥狀______________________________（三）相關(guān)癥狀體征1發(fā)熱（38℃以上）（1）有（2）無(wú)（3）不詳如有，則日期____月_____日至____月___日，最高體溫____℃，或（未）檢測(cè)。2關(guān)節(jié)痛（1）有（2）無(wú)（3）不詳主要累及的關(guān)節(jié)為（可多選）①手腕②腳踝③腳趾④手指⑤膝⑥肘⑦肩關(guān)節(jié)⑧脊柱⑨其他3肌肉痛（1）有（2）無(wú)（3）不詳如有，部位______________________________4皮疹（1）有（2）無(wú)（3）不詳，皮疹為①斑丘疹②麻疹樣皮疹條線狀③猩紅熱樣皮疹簇狀④紅斑疹⑤其他皮疹部位（可多選）①全身②軀干③四肢④面部⑤其他5頭痛（1）有（2）無(wú)（3）不詳6結(jié)膜充血（1）有（2）無(wú)（3）不詳7顏面潮紅（1）有（2）無(wú)（3）不詳8胸紅（1）有（2）無(wú)（3）不詳9出血癥狀（1）有（2）無(wú)（3）不詳如有，則出血部位為（多選）①結(jié)膜出血②鼻出血③牙齦出血④?chē)I血⑤便血⑥血尿⑦其他10神經(jīng)癥狀（1）有（2）無(wú)（3）不詳如有，則日期______月______日至______月______日，癥狀描述____________________________11如為婦女，有無(wú)懷孕（1）有（2）無(wú)（3）不詳如有，則孕期為周3日期家中工作單位公園運(yùn)動(dòng)場(chǎng)所市場(chǎng)學(xué)校醫(yī)院其他備注六、共同暴露者健康狀況六、共同暴露者健康狀況（一）有無(wú)家庭其他成員接觸者出現(xiàn)過(guò)類(lèi)似癥狀（1）有（2）無(wú)（3）不詳（二）家中人口數(shù)___人，出現(xiàn)類(lèi)似癥狀者_(dá)__人；（三）工作單位所在部門(mén)人數(shù)___人，出現(xiàn)類(lèi)似癥狀者_(dá)__人；請(qǐng)將出現(xiàn)類(lèi)似癥狀的家庭成員或同事的相關(guān)情況填入下表姓名與患者關(guān)系年齡性別發(fā)病日期就診情況采樣日期備注七、其他需七、其他需補(bǔ)充內(nèi)容充內(nèi)容八、八、備注（一）血常規(guī)檢查（二）病原學(xué)診斷檢測(cè)（三）病例診斷分類(lèi)本病例屬于（輸入性病例、本地病例）

簡(jiǎn)介：呼吸道病毒,呼吸道病毒是指一大類(lèi)能侵犯呼吸道引起呼吸道局部病變或僅以呼吸道為入侵門(mén)戶，主要引起呼吸道外組織器官病變的病毒。拒統(tǒng)計(jì)，90以上的急性呼吸道感染由該類(lèi)病毒引起。,呼吸道病毒的分類(lèi),呼吸道病毒包括正粘病毒科流感病毒副粘病毒科副流感病毒、呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒其他病毒科腺病毒、風(fēng)疹病毒、鼻病毒、冠狀病毒、呼腸病毒,流行性感冒病毒（INFLUENZAVIRUS）,流行性感冒病毒，簡(jiǎn)稱(chēng)流感病毒，甲、乙、丙三型,引起人和動(dòng)物流感甲型流感病毒是反復(fù)流行最為頻繁和引起流感全球流行的重要病原體。,流感病毒的生物學(xué)性狀,流感病毒呈球形或絲狀，球形直徑8020NM，新分離株絲狀多于球形有包膜，單鏈分片段的RNA病毒。,流感病毒的電鏡照片,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,1,2,4,3,5,6,7,8,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,PB2,PB1,RNP,,,RNA,,,,,M2,,M1,,NA,,HA,分節(jié)段的（）SSRNA,,PA,,,RNA多聚酶,核糖核蛋白（RNP）,,流感病毒的表面結(jié)構(gòu),血凝素HA柱狀，為三聚體，它基本上以相同的間距覆蓋了病毒的全部表面HA1（病毒吸附）HA2（核衣殼釋放）保護(hù)性抗原，血凝抑制抗體保護(hù)性抗體神經(jīng)氨酸酶（NA）四個(gè)亞單位組成的四聚體，并不平均分布在病毒表面，而是聚合成群。與病毒釋放有關(guān)。,流感病毒的內(nèi)部結(jié)構(gòu),核衣殼病毒分片段的RNA，結(jié)合有核蛋白（NP）以及與復(fù)制和轉(zhuǎn)錄有關(guān)的三種依賴(lài)RNA的RNA多聚酶蛋白。呈螺旋對(duì)稱(chēng)?；|(zhì)蛋白（M蛋白）覆蓋在核衣殼外面，M蛋白抗原性穩(wěn)定，也具有型特異性。M1增加包膜厚度M2輔助HA2釋放核衣殼外膜來(lái)自宿主細(xì)胞的脂質(zhì)雙層膜。,流感病毒的結(jié)構(gòu),,核心,分節(jié)段的（）SSRNA,核蛋白（NP）,RNA多聚酶,,基質(zhì)蛋白M蛋白,具型特異性,包膜,刺突,血凝素HA,神經(jīng)氨酸酶NA,,M1,M2,流感病毒的復(fù)制,病毒侵入遺傳物質(zhì)的釋放病毒的復(fù)制與病毒蛋白的合成病毒的裝配出芽,流感病毒復(fù)制過(guò)程示意圖,流感病毒的分型與抗原變異,分型據(jù)RNP和M蛋白抗原性分甲、乙、丙三型甲型根據(jù)HA和NA抗原性不同，再區(qū)分為若干亞型（H1H15、N1N9）乙型、丙型至今未發(fā)現(xiàn)亞型命名型別/宿主/分離地點(diǎn)/病毒株/序號(hào)/分離年代HA與NA亞型號(hào)（A/HONGKONG/1/68H3N2,流感病毒的抗原變異,抗原漂移（ANTIGENICDRIFT）因HA或NA的點(diǎn)突變?cè)斐桑儺惙刃?，屬量變，引起局部中、小型流行?？乖D(zhuǎn)換（ANTIGENICSHIFT）因HA或NA的大幅度變異造成，屬質(zhì)變，導(dǎo)致新亞型的出現(xiàn)，引起世界性的暴發(fā)流行。,,致病性與免疫,致病性,傳染源病人或病毒攜帶者,致病機(jī)理病毒不入血,病毒呼吸道毒素樣物質(zhì)進(jìn)入血液,全身中毒癥狀,局部粘膜上皮炎癥,,,同型有12年免疫力,免疫物質(zhì)為SIGA及中和抗體（IGG、IGM）,免疫性,傳播途徑病毒飛沫，呼吸道傳播,流感病毒的其他生物學(xué)特性,培養(yǎng)特性可在雞胚和培養(yǎng)細(xì)胞中增殖，但不引起明顯的病變；培養(yǎng)液中加入胰液，促使HA裂解，可擴(kuò)大培養(yǎng)細(xì)胞范圍。抵抗力不耐熱，對(duì)干燥、乙醚、甲醛和乳酸等敏感。,流行性感冒（INFLUENZA）,“流行性感冒”（INFLUENZA）是英國(guó)人JOHNHUZXAM在1743年創(chuàng)造的字，他依據(jù)意大利語(yǔ)中用來(lái)描述這個(gè)疾病起源的片語(yǔ)“UNINFUENZADIFREDDO”，即“寒冷的影響”。它主要發(fā)生在深秋、冬天和早春季節(jié)。每年都有數(shù)以百萬(wàn)計(jì)的人群受到感染。,常見(jiàn)癥狀,發(fā)熱UPTO39畏寒肌肉酸痛出汗咳嗽鼻塞咽痛頭痛厭食乏力,微生物學(xué)檢查,病毒分離取患者咽漱液或鼻咽拭，接種雞胚或培養(yǎng)細(xì)胞血清學(xué)診斷血凝抑制試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、酶免疫測(cè)定抗原檢測(cè)直接從病人呼吸道分泌物、脫落細(xì)胞中檢測(cè)抗原分型鑒定核酸雜交、PCR、序列分析,流感的防治,藥物治療鹽酸金剛烷氨、干擾滴鼻素、板蘭根、大青葉接種疫苗流感病毒滅活疫苗病毒表面抗原疫苗減毒活疫苗,副粘病毒（PARAMYXOVIRUS）,與正粘病毒一樣，核衣殼呈螺旋對(duì)稱(chēng)，有包膜的單負(fù)鏈RNA病毒，同時(shí)又有自己的特點(diǎn)病毒體積大（）SSRNA不分節(jié)段包膜刺突蛋白不同（HN、H、G、F蛋白）,麻疹病毒（MEASLESVIRUS）,麻疹病毒是麻疹的病原體。臨床表現(xiàn)為高熱、畏光，結(jié)膜炎、鼻炎、咳嗽是三個(gè)主要的前驅(qū)癥狀。麻疹本身可自愈，但常引起嚴(yán)重的并發(fā)癥而導(dǎo)致死亡。,麻疹病毒的生物學(xué)性狀及免疫,包膜刺突為H蛋白和F蛋白免疫力牢固，抗H抗體和抗F抗體可抵御再感染恢復(fù)期主要為細(xì)胞免疫母親抗體可保護(hù)新生兒,麻疹病毒的傳播,人是麻疹病毒的自然宿主急性期患者為傳染源通過(guò)飛沫或鼻腔分泌物傳播,麻疹病毒的致病機(jī)理,入侵（CD46為病毒受體）,呼吸道上皮細(xì)胞內(nèi)增殖,,入血（第一次病毒血癥）,侵入淋巴組織和單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng),增殖后再次入血（第二次病毒血癥）,多種組織、器官受累，表現(xiàn)為細(xì)胞融合成多核巨細(xì)胞，核內(nèi)形成嗜酸性包涵體等,,,,,,麻疹的臨床表現(xiàn),潛伏期約1012天體溫略高、咳嗽、流涕、好打噴嚏及淚眼，癥狀持續(xù)35天體溫突然升高（達(dá)到40405C），口頰粘膜出現(xiàn)柯氏斑，隨后出現(xiàn)紅色班丘疹，從耳部開(kāi)始，23天后遍及全身4天后消退，脫屑,柯氏斑,,麻疹的并發(fā)癥,呼吸道最為常見(jiàn)，如肺炎、肺結(jié)核消化道腹瀉、闌尾炎或盲腸炎營(yíng)養(yǎng)失調(diào)神經(jīng)中樞系統(tǒng)亞急性硬化性全腦炎（SSPE）,麻疹的治療,控制高熱保持室內(nèi)濕度及時(shí)補(bǔ)液注意飲食營(yíng)養(yǎng)兒童應(yīng)補(bǔ)充維生素A注意并發(fā)癥,麻疹的預(yù)防,雞胚細(xì)胞麻疹病毒減毒活疫苗我國(guó)接種年齡為8個(gè)月，發(fā)達(dá)國(guó)家一般為15個(gè)月7歲時(shí)再次免疫孕婦不宜接種疫苗緊急被動(dòng)免疫用丙種球蛋白或胎盤(pán)球蛋白,腮腺炎病毒（MUMPSVIRUS）,有包膜，單鏈負(fù)義RNA兩種表面包膜蛋白HN和F蛋白另外有四種結(jié)構(gòu)蛋白,傳播方式,腮腺炎病毒是流行性腮腺炎的病原體，只有一個(gè)血清型，人是其唯一宿主病毒通過(guò)飛沫或直接接觸傳播咳嗽、噴嚏甚至說(shuō)話都可傳播病毒學(xué)齡兒童為易感人群出現(xiàn)癥狀前23天及癥狀消失后9天仍有傳染性,致病性,潛伏期23周在上皮細(xì)胞和局部淋巴結(jié)內(nèi)增殖入血，病毒隨血侵入腮腺及其它器官主要癥狀為腮腺腫大睪丸炎、卵巢炎及病毒性腦炎病可獲牢固的免疫力,微生物學(xué)檢查及預(yù)防,分離時(shí)可取患者唾液、尿液或腦脊液在雞胚羊膜腔、雞胚細(xì)胞內(nèi)培養(yǎng)增殖血清學(xué)診斷病毒特異性的IGM或4倍上升的IGG血凝抑制試驗(yàn)、ELISA和免疫熒光檢測(cè)病毒抗原或抗體預(yù)防可接種MMR三聯(lián)疫苗,呼吸道合胞病毒（RESPIRATORYSYSCYTIALVIRUS，RSV）,包膜刺突為G蛋白嬰幼兒細(xì)支氣管炎和細(xì)支氣管肺炎成人上呼吸道感染通過(guò)手、污染物品和呼吸道傳播易在冬季流行是醫(yī)源性感染的重要病原體,RSV的致病機(jī)制,呼吸道上皮細(xì)胞內(nèi)增殖病毒不入血支氣管壞死物與粘液、纖維蛋白粘連在一起，易導(dǎo)致氣道阻塞可并發(fā)嚴(yán)重的細(xì)支氣管炎和肺炎,RSV的免疫及預(yù)防,感染后免疫力不強(qiáng)，不能防止再感染至今未有有效的預(yù)防疫苗,腺病毒（ADENOVIRUS）,線型雙鏈DNA，不分節(jié)段基因組長(zhǎng)3000042000BP，編碼約30種蛋白病毒無(wú)包膜，二十面立體對(duì)稱(chēng)，直徑約7090NM具12個(gè)頂角和纖維刺突,腺病毒的EM照片,傳播途徑,糞口途徑呼吸道傳播接觸傳播手眼途徑性接觸,致病性,咽炎急性呼吸系統(tǒng)疾病濾泡性結(jié)膜炎，流行性角膜結(jié)膜炎咽結(jié)膜熱尿路感染（子宮頸炎、尿道炎、出血性膀胱炎）無(wú)癥狀的持續(xù)感染,臨床特征,潛伏期58天通常為局部感染一些病毒亞型可導(dǎo)致細(xì)胞病變（細(xì)胞腫脹、變圓，核內(nèi)出現(xiàn)嗜堿性包涵體）約5的兒童急性呼吸道疾病及約10的嬰幼兒腹瀉由腺病毒引起腦膜腦炎可為腺病毒呼吸道感染的并發(fā)癥,微生物學(xué)檢查,取樣用咽拭子、眼結(jié)膜分泌物接種原代人胚細(xì)胞后傳代HELA細(xì)胞等上皮細(xì)胞初步鑒定可觀察細(xì)胞的病變效應(yīng)酶聯(lián)免疫測(cè)定、熒光免疫測(cè)定,預(yù)防及治療,普通抗病毒藥物治療效果不理想感染后對(duì)同型病毒可產(chǎn)生牢固的免疫力母親的抗體對(duì)新生兒有保護(hù)作用目前無(wú)理想疫苗,風(fēng)疹病毒（RUBELLAVIRUS）,單正鏈RNA，有包膜包膜刺突有血凝性核衣殼為二十面立體對(duì)稱(chēng)只有一個(gè)血清型人是其唯一自然宿主,致病性,兒童是主要易感者呼吸道傳播局部淋巴節(jié)增殖后經(jīng)病毒血癥散播全身可垂直傳播導(dǎo)致胎兒先天性感染,預(yù)防及免疫,自然感染后可獲持久免疫力母親抗體可保護(hù)胎兒接種風(fēng)疹減毒活疫苗三聯(lián)疫苗（MMR）,

簡(jiǎn)介：概述,中國(guó)不僅是一個(gè)人口大國(guó)，而且也是病毒性肝炎的高發(fā)區(qū)。目前已知的甲、乙、丙、丁、戊、庚及TTV型肝炎，在我國(guó)均有發(fā)生，其中尤以甲、乙、丙、戊4個(gè)型別的流行情況嚴(yán)重。僅乙肝病毒攜帶者以達(dá)12億之多?？梢哉f(shuō)，病毒性肝炎是對(duì)我國(guó)危害最為嚴(yán)重的傳染病。,肝炎病毒,甲型肝炎病毒與戊型肝炎病毒由消化道傳播，引起急性肝炎，不轉(zhuǎn)為慢性肝炎或慢性攜帶者。乙型與丙型肝炎病毒主要由血液及體液、密切接觸、母嬰傳播、醫(yī)源性等而傳播，除引起急性肝炎外，可致慢性肝炎，暴發(fā)性肝炎并與肝硬化及肝癌相關(guān)。丁型肝炎病毒為一種缺陷病毒庚型肝炎病毒（HGV）TT型肝炎病毒（TTV）,一、甲型肝炎病毒（HAV）,,HAV的生物學(xué)性狀,屬小RNA病毒科，直徑27NM，無(wú)包膜呈20面立體對(duì)稱(chēng)外面為一獨(dú)立外殼，內(nèi)含一個(gè)單鏈RNA分子,HAV的電鏡照片,HAV的結(jié)構(gòu),HAV的其他生物學(xué)特性,培養(yǎng)特性原代肝細(xì)胞或恒河猴胚腎傳代株細(xì)胞對(duì)HAV敏感，生長(zhǎng)緩慢，不引起細(xì)胞裂解抵抗力比腸道病毒更耐熱，60℃1H不被滅活，100OC5分鐘可滅活，對(duì)乙醚、酸處理（PH3）均有抵抗力。氯消毒、紫外線照射、福爾馬林處理均可破壞其傳染性,HAV的致病性,糞－口途徑傳播,口咽部或唾液腺中早期增殖,腸道與局部淋巴結(jié)中大量增殖,入血并形成病毒血癥,肝臟為最終靶器官（病毒直接損傷或免疫病理作用）,通過(guò)膽汁隨糞便排出體外,,,,,,,HAV的免疫性,HAV只存在單一的抗原抗體系統(tǒng)，即HAVAG和抗HAV無(wú)論顯性感染還是隱性感染均能誘生出高效價(jià)抗HAV抗HAVIGM陽(yáng)性是甲肝的確診依據(jù)IGM型抗體在感染后僅持續(xù)存于36個(gè)月IGG型抗體則可存在多年,甲型肝炎,糞－口途徑傳播傳染源多為甲肝患者通過(guò)污染的水源、食物、海產(chǎn)品、食具等傳播常造成散發(fā)性流行或大面積流行,常見(jiàn)癥狀,流感樣癥狀厭食惡心黃疸（眼部及皮膚呈黃色）尿黃腹痛乏力,甲肝的防治,控制傳染源隔離治療急性期病人所有廢棄物及日常用水均需嚴(yán)格消毒切斷傳播途徑養(yǎng)成良好的衛(wèi)生飲食習(xí)慣水產(chǎn)品不宜生吃水果蔬菜要洗干凈,免疫預(yù)防,人工被動(dòng)免疫可用丙種球蛋白及胎盤(pán)球蛋白制劑。應(yīng)急預(yù)防甲型肝炎有一定效果。人工主動(dòng)免疫可用減毒活疫苗。我國(guó)生產(chǎn)的甲肝活疫苗只注射一次即可獲得持久免疫力?；蚬こ桃呙缪兄埔嘁殉晒Α?二、乙型肝炎（HBV）,生物學(xué)性狀形態(tài)結(jié)構(gòu)DANE顆粒HBV的小球形顆粒HBV的管形顆粒,,,,,電鏡下的HBV,形態(tài)與結(jié)構(gòu)（1）,大球形顆粒亦稱(chēng)DANE顆粒，它是一種由外殼和一個(gè)含有DNA分子的核衣殼組成的病毒顆粒，直徑約42NM。核衣殼為20面體對(duì)稱(chēng)結(jié)構(gòu)。DANE顆粒表面（外衣殼）含有HBSAG、PRES1、PRES2；內(nèi)衣殼含有HBCAGHBEAG；核心含有雙股有缺口的DNA鏈和依賴(lài)DNA的DNA多聚酶。目前認(rèn)為DANE顆粒即完整的HBV。,DANE顆粒,形態(tài)與結(jié)構(gòu)（2）,小形球顆粒直徑約22NM，是HBV感染后血液中最多見(jiàn)的一種。它由HBSAG、PRES1、PRES2組成。未檢出DNA多聚酶活性。目前認(rèn)為HBV的小顆粒不是HBV，可能是HBV感染肝細(xì)胞時(shí)合成過(guò)剩的外殼蛋白而游離于血循環(huán)中。,HBV的小球形顆粒,形態(tài)與結(jié)構(gòu)（3）,管形顆粒直徑約22NM，長(zhǎng)度可在100～700NM之間實(shí)際上它是一串聚合起來(lái)的小顆粒。同樣具有HBSAG、PRES1、PRES2的抗原性。,HBV的管形顆粒,HBV的抗原組成,表面抗原（HBSAG）核心抗原（HBCAG）E抗原（HBEAG）前S1（PRES1）前S2（PRES2）,表面抗原HBSAG,存在于三型顆粒中是HBV感染的主要標(biāo)志分亞型（A,D/Y,W/R）ADR、ADW、AYR、AYW四種產(chǎn)生抗HBS，是HBV的中和抗體，具有免疫保護(hù)作用。,核心抗原（HBCAG）,僅存在于DANE顆粒的核心和乙型肝炎患者的肝細(xì)胞核內(nèi)。不易在血液中檢出。刺激機(jī)體產(chǎn)生抗HBC（IGG、IGM）。在乙型肝炎的急性期、恢復(fù)期和HBCAG攜帶者中?？蓽y(cè)出抗～HBC。此抗體對(duì)病毒無(wú)中和作用。體內(nèi)如發(fā)現(xiàn)HBCAG或抗～HBC表示HBV在肝內(nèi)持續(xù)復(fù)制。HBCAG可被TC細(xì)胞識(shí)別，觸發(fā)TC細(xì)胞的殺傷機(jī)制，破壞清除受染的肝細(xì)胞。,E抗原HBEAG,僅存在于DANE顆粒中游離存在于血液中為病毒復(fù)制及強(qiáng)傳染性的指標(biāo)提示病人易轉(zhuǎn)為慢性產(chǎn)生抗－HBE，是預(yù)后良好的征象,PRES1抗原、PRES2抗原,前S1（PRES1）抗原及前S2（PRES2）抗原主要存在于三型顆粒的表面。可吸附于肝細(xì)胞表面的相應(yīng)受體，其免疫原性比表面抗原（HBSAG）更強(qiáng)，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗PRES1和抗PRES2可阻斷HBV與肝細(xì)胞結(jié)合。,HB抗原抗體系統(tǒng),HBSAG、抗HBSHBEAG、抗HBEHBCAG、抗HBCPRES1、抗PRES1PRES2、抗PRES2,HBV的其它生物學(xué)性狀,培養(yǎng)黑猩猩動(dòng)物模型、鴨動(dòng)物模型用分子生物學(xué)技術(shù)的細(xì)胞培養(yǎng)成功抵抗力抵抗力強(qiáng)于HAV對(duì)低溫干燥紫外線耐受不被70％乙醇滅活100℃10分鐘可滅活,致病性及免疫性,HBV的致病性,傳染源主要傳染源是患者或無(wú)癥狀HBSAG攜帶者傳播途徑血液及體液母嬰傳播密切接觸（主要是性接觸）注射、針刺、文身等（醫(yī)源性）,HBV的致病機(jī)制,病毒直接損傷或免疫病理作用免疫低下HBSAG無(wú)癥狀攜帶者病毒變異逃逸免疫細(xì)胞介導(dǎo)的免疫損傷為主免疫復(fù)合物性的免疫損傷肝外損傷自身免疫反應(yīng)的免疫損傷肝特異性脂蛋白抗原,乙型肝炎的特點(diǎn),我國(guó)約有4060人群曾受到過(guò)HBV的感染表現(xiàn)急性乙肝的僅占011亞臨床3075慢性乙肝15乙肝病毒攜帶720急性乙肝如治療不徹底，10患者可轉(zhuǎn)為慢性乙肝,HBV與原發(fā)性肝癌,流行病學(xué)方面動(dòng)物模型病毒分子結(jié)構(gòu),免疫性,1抗體的保護(hù)作用2細(xì)胞免疫的保護(hù)作用,微生物學(xué)檢查,乙肝五項(xiàng)（兩對(duì)半）及HBVDNA的臨床意義,HBSAG、抗HBSHBEAG、抗HBE抗HBC（HBCAG）HBVDNADNA多聚酶,,病毒抗原抗體系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果分析,四、預(yù)防及免疫,控制傳染源，切斷傳播途徑人工自動(dòng)免疫疫苗（血源性、基因工程人工被動(dòng)免疫高效價(jià)人血清球蛋白（HBIG）,丙型肝炎病毒（HCV）,HCV的生物學(xué)性狀,40～60NM球形有包膜單正鏈RNA,HCV的致病性與免疫性,傳播途徑似HBV是引起輸血后慢性肝炎和肝硬化的主要原因潛伏期48周無(wú)癥狀HCV攜帶者和慢性丙肝者多見(jiàn)誘發(fā)肝外損傷腎小球腎炎免疫力不牢固,丙型肝炎的特點(diǎn),我國(guó)丙肝病毒攜帶者的比例在25隨著年齡的增長(zhǎng)，丙肝病毒攜帶率亦增高易感人群感染HCV后，慢性化的比例高達(dá)50以上乙肝患者容易重疊HCV感染,HCV的診斷及預(yù)防,檢查病毒RNA檢測(cè)抗HCV因HCV免疫原性不強(qiáng)及變異，目前尚無(wú)可用疫苗,丁型肝炎病毒（HDV）,HDV是一種缺陷病毒由HBSAG構(gòu)成其外殼HDV定位于肝細(xì)胞核內(nèi)，在血液中由HBSAG包被，形成3537NM顆粒單負(fù)鏈環(huán)狀RNA,HDV的結(jié)構(gòu),RIZZETTO于1977年首先發(fā)現(xiàn)，又稱(chēng)?抗原3537NM球形顆粒；17KBSSRNA含9個(gè)ORF,丁型肝炎的特點(diǎn),只能感染HBSAG陽(yáng)性的病人我國(guó)丁肝感染率在165，西南地區(qū)感染率高患者可不定期隔離，或隔離至肝功能正常，或HBSAG陰轉(zhuǎn)。病原學(xué)檢查為HDAG、抗HD及HDVRNA。持續(xù)高滴度IGG型抗HD是慢性HDV感染的主要血清學(xué)標(biāo)志。一旦乙肝患者感染了HDV，尤其是在慢性乙肝的基礎(chǔ)上感染，容易發(fā)展成為重度慢性乙肝、重型肝炎，甚至肝硬化。,微生物學(xué)檢查及預(yù)防,診斷為檢測(cè)抗HD、HDVRNA丁型肝炎傳播途經(jīng)與乙型肝炎相似。傳播途徑和防治原則似HBV。,戊型肝炎病毒（HEV）,球形，無(wú)包膜直徑32～34NM單正鏈RNA，3個(gè)ORF兩個(gè)血清型,致病性及免疫,主要為糞－口途徑傳播由膽汁經(jīng)糞便排出體外對(duì)肝細(xì)胞的直接損傷及免疫病理作用多表現(xiàn)為急性戊型肝炎孕婦感染常致流產(chǎn),

簡(jiǎn)介：病毒學(xué)VIROLOGY,病毒的基本性狀,3000BC，埃及孟非思壁畫(huà)中長(zhǎng)老患小兒麻痹癥。,什么是病毒,病毒是一類(lèi)體積微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、只含有一種類(lèi)型的核酸、嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的、對(duì)抗生素不敏感，而對(duì)干擾素敏感的非細(xì)胞型微生物。,病毒與其它微生物的區(qū)別,第一節(jié)病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成,病毒體VIRION具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)和感染性的完整病毒顆粒。,一、病毒的大小和形態(tài)大小50－250NM左右。形態(tài)球形、桿狀或絲狀、磚形、子彈形、蝌蚪形等。,,,,,,,,,,,,,,,葡萄球菌1000NM）,,,,,,,,,牛痘病毒300250NM,A,B,C,D,E,F,G,立克次體450NM,,,衣原體390NM,A、大腸桿菌噬菌體6595NM,B、腺病毒70NM,C、脊髓灰質(zhì)炎病毒30NM,D、乙腦病毒40NM,E、蛋白分子10NM,F、流感病毒100NM,G、煙草花葉病毒,二、病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成基本結(jié)構(gòu)NUCLEOCAPSID輔助結(jié)構(gòu)VIRALENVELOPE,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,病毒體結(jié)構(gòu)模式圖,,,,殼粒,,,衣殼,,,核心（核樣物）,,,,,核衣殼,,包膜,,包膜病毒,,,,,包膜子粒（刺突）,化學(xué)組成－病毒核酸,分子量差別顯著3ＫＢ－400ＫＢ多種形式存在ＲＮＡ或ＤＮＡ；不同形式復(fù)制；病毒基因組可相互重疊，轉(zhuǎn)錄的ＲＮＡ前體可以多種方式拼接；與真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)相似，有內(nèi)含子及非編碼區(qū)；具有感染性。,化學(xué)組成－病毒蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白CAPSID,ENVELOPEPROTEIN非結(jié)構(gòu)蛋白酶與病毒復(fù)制有關(guān)的酶；與致病有關(guān)的酶；調(diào)控蛋白HIVTAT,REVETC,病毒衣殼病毒20面體立體對(duì)稱(chēng)模式圖,不同病毒核酸結(jié)構(gòu)不同，殼粒數(shù)目和排列也不相同。根據(jù)殼粒的排列方式稱(chēng)為對(duì)稱(chēng)，病毒結(jié)構(gòu)由以下幾種對(duì)稱(chēng)型,ICOSAHEDRALSYMMETRY（二十面體立體對(duì)稱(chēng)型）,,病毒衣殼螺旋對(duì)稱(chēng)模式圖,病毒衣殼復(fù)合對(duì)稱(chēng)模式圖,,衣殼的主要功能保護(hù)病毒核酸參與感染過(guò)程具有抗原性,病毒衣殼電鏡照片,病毒包膜電鏡照片,包膜的主要功能維護(hù)病毒體結(jié)構(gòu)的完整性與病毒入侵有關(guān)具有抗原性,第二節(jié)病毒的增殖,一、VIRUSREPLICATIONCIRCLE吸附ADSORPTION穿入PENETRATION脫殼UNCOATING生物合成BIOSYNTHESIS裝配與釋放ASSEMBLYANDRELEASE,1吸附ADSORPTION（幾分至幾十分鐘）,23PENETRATION、UNCOATING,融合有包膜病毒胞飲無(wú)包膜病毒直接穿入,,在溶酶體酶作用下，脫殼。,4生物大分子合成BIOSYNTHESIS（隱蔽期）,6大類(lèi)型雙鏈DNA病毒單鏈DNA病毒單正鏈RNA病毒單負(fù)鏈RNA病毒雙鏈RNA病毒逆轉(zhuǎn)錄病毒區(qū)域DNA病毒核內(nèi)（除痘病毒）RNA病毒胞質(zhì)（除流感病毒及逆轉(zhuǎn)錄病毒）,生物合成（以DSDNA為例）,親代DNAMRNA早期蛋白（酶）（功能蛋白）子代DNA子代MRNA晚期蛋白（結(jié)構(gòu)蛋白）子代病毒,,,,,,,,RNA病毒的生物合成,單正鏈RNAMRNA結(jié)構(gòu)和非結(jié)構(gòu)蛋白中間復(fù)制體子代核酸單負(fù)鏈RNA正鏈RNA蛋白質(zhì)中間復(fù)制體子代核酸（依賴(lài)RNA的RNA多聚酶）,,,,,,,,逆轉(zhuǎn)錄病毒,病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄酶RNADNA中間體雙鏈DNA整合入細(xì)胞染色體子代病毒MRNA和子代核酸,,,,,57ASSEMBLY，MATURATION,ANDRELEASE,裝配（ASSEMBLY）,釋放（RELEASE）,裂解（DISINTEGRATION）NAKEDVIRUSCAUSETHEHOSTCELLLYSIS出芽（BUDDING）ENVELOPEDVIRUSES,二、病毒的生長(zhǎng)曲線,1、隱蔽期2、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期3、細(xì)胞死亡期,缺陷病毒因病毒基因組不完整或基因發(fā)生改變，而不能進(jìn)行正常增殖所產(chǎn)生的子代病毒。缺陷干擾顆粒DEFECTIVEINTERFERINGPARTICLE,DIP缺陷病毒，具有干擾同種成熟病毒體進(jìn)入細(xì)胞的作用。輔助病毒可以輔助缺陷病毒完成正常增殖的病毒。,三、與病毒增殖有關(guān)的異?，F(xiàn)象,,頓挫感染病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞后，如細(xì)胞不能為病毒增殖提供所需要的酶、能量及必要的成分，則病毒在細(xì)胞中不能合成本身的成分，稱(chēng)為頓挫感染。非容納細(xì)胞、容納細(xì)胞。干擾現(xiàn)象兩種病毒感染同一種細(xì)胞，常發(fā)生一種病毒抑制另一種病毒復(fù)制的現(xiàn)象，稱(chēng)干擾現(xiàn)象。機(jī)制IFN、受體、DIP。,第三節(jié)理化因素對(duì)病毒的影響,一、物理因素的影響溫度大多數(shù)病毒耐冷不耐熱。在－70℃（數(shù)月）或－196℃（數(shù)年）條件下，病毒感染性可保持?jǐn)?shù)月至數(shù)年。一般加熱60℃經(jīng)30MIN或100℃數(shù)秒鐘可使大多數(shù)病毒滅活。PH值多數(shù)病毒在PH6～8范圍內(nèi)穩(wěn)定。射線和UV射線使核苷酸鏈發(fā)生致死性斷裂；UV則是在病毒的多核苷酸上形成雙聚體如胸腺核苷與尿核苷，抑制病毒DNA或RNA的復(fù)制。,二、化學(xué)因素的影響脂溶劑乙醚、氯仿、去氧膽酸鹽等脂溶劑可使有包膜病毒的包膜脂質(zhì)溶解而滅活病毒，失去吸附能力。消毒劑過(guò)氧乙酸、甲醛等均能使大多數(shù)病毒滅活。與細(xì)菌相比，病毒對(duì)消毒劑抵抗力強(qiáng)，特別是無(wú)包膜的小型病毒。中草藥板藍(lán)根、大青葉、大黃、貫仲和七葉一枝花等對(duì)某些病毒有一定的抑制作用。,第四節(jié)病毒分類(lèi)動(dòng)物病毒,DNA病毒,RNA病毒,亞病毒一類(lèi)比病毒還小的、結(jié)構(gòu)更簡(jiǎn)單的微生物。包括類(lèi)病毒和PRION。,病毒的感染與致病機(jī)制,,第一節(jié)病毒的傳播方式和感染類(lèi)型,,一、病毒感染,來(lái)源感染途徑傳播方式水平傳播垂直傳播,二、病毒感染的類(lèi)型,機(jī)體感染病毒后1按有無(wú)臨床癥狀，可分為隱性感染和顯性感染。2依病毒感染后在機(jī)體內(nèi)滯留的時(shí)間長(zhǎng)短，分為急性感染和持續(xù)性感染。3持續(xù)性感染根據(jù)發(fā)展和預(yù)后又分為慢性感染、潛伏感染、慢發(fā)病毒感染和急性感染的遲發(fā)并發(fā)癥。,（一）隱性病毒感染與顯性病毒感染,1隱性病毒感染病毒進(jìn)入機(jī)體后不引起臨床癥狀的感染，對(duì)組織和細(xì)胞的損傷不明顯。相關(guān)因素病毒毒力弱、機(jī)體防御能力強(qiáng)、病毒種類(lèi)、病毒的性質(zhì)。病毒仍可在體內(nèi)增殖并向外界播散病毒，可成為重要的傳染源。隱性感染者雖不出現(xiàn)臨床癥狀，但仍可獲得免疫力而終止感染。病毒攜帶者有部分隱性感染者一直不產(chǎn)生對(duì)此種病毒的免疫力叫病毒攜帶者，無(wú)癥狀，但病毒可在體內(nèi)增殖并向外界排泄播散，也是重要的傳染源。,有的病毒如天花病毒、麻疹病毒等進(jìn)入機(jī)體，到達(dá)靶細(xì)胞后大量增殖，使細(xì)胞和組織損傷，機(jī)體出現(xiàn)明顯的臨床癥狀，這樣的感染稱(chēng)為顯性病毒感染或臨床感染；按癥狀出現(xiàn)早晚、持續(xù)時(shí)間的長(zhǎng)短以及病毒在體內(nèi)持續(xù)存在狀態(tài)等顯性感染又分為急性病毒感染和持續(xù)性病毒感染兩種。,2顯性病毒感染,（二）急性病原消滅型病毒感染,病毒侵入機(jī)體后，在細(xì)胞內(nèi)增殖，經(jīng)數(shù)日以至數(shù)周的潛伏期后突然發(fā)病。在潛伏期內(nèi)1、病毒增殖到一定水平，由靶細(xì)胞的損傷和死亡而導(dǎo)致組織器官的損傷和功能障礙，出現(xiàn)臨床癥狀。2、宿主動(dòng)員非特異性和特異性免疫因素清除病毒。宿主一般能在癥狀出現(xiàn)一段時(shí)間內(nèi)，把病毒清除掉而進(jìn)入恢復(fù)期。特點(diǎn)為潛伏期短，發(fā)病急，病程數(shù)日至數(shù)周。病后常獲得特異性免疫。因此，特異性抗體可作為受過(guò)感染的證據(jù)。,（三）持續(xù)性病毒感染,病毒可在機(jī)體內(nèi)持續(xù)存在數(shù)月數(shù)年數(shù)十年?？沙霈F(xiàn)癥狀，可不出現(xiàn)癥狀而長(zhǎng)期帶病毒，成為重要的傳染源。持續(xù)性病毒感染有病毒和機(jī)體兩方面的因素機(jī)體免疫功能低下，無(wú)力完全清除病毒；病毒抗原性弱，機(jī)體難以產(chǎn)生免疫應(yīng)答以清除；病毒存在于受保護(hù)的部位或病毒發(fā)生突變,可以逃避宿主免疫作用；某些病毒的抗原性弱，難以產(chǎn)生免疫應(yīng)答；病毒基因整合在宿主細(xì)胞的基因組中，長(zhǎng)期與宿主細(xì)胞共存。,持續(xù)性感染有下述四種類(lèi)型,1．潛伏性病毒感染LATENTVIRALINFECTION2．慢性病毒感染（CHRONICVIRALINFECTION）3．慢發(fā)病毒感染SLOWVIRUSINFECTION或稱(chēng)遲發(fā)病毒感染DELAYEDVIRALINFECTION4．急性病毒感染的遲發(fā)并發(fā)癥（DELAYEDCOMPLICATIONAFTERACUTEVIRALINFECTION）,1潛伏性病毒感染,經(jīng)急性或隱性感染后，病毒基因組存在于一定組織或細(xì)胞內(nèi)，但并不能產(chǎn)生有感染性的病毒體。在某些條件下病毒被激活而急性發(fā)作，病毒僅在臨床出現(xiàn)間歇性急性發(fā)作時(shí)才被檢出。在非發(fā)作期，用一般常規(guī)法不能分離出病毒。例如，單純皰疹病毒Ⅰ型（HSV1）感染水痘帶狀皰疹病毒（VZV）感染,2慢性病毒感染,經(jīng)顯性或隱性感染后，病毒并未完全清除，可持續(xù)存在于血液或組織中并不斷排出體外，病程長(zhǎng)達(dá)數(shù)月至數(shù)十年?；颊呖杀憩F(xiàn)輕微或無(wú)臨床癥狀。如乙型肝炎病毒（HBV）、巨細(xì)胞病毒（CMV）及EB病毒（EBV）等常形成慢性感染。,3慢發(fā)病毒感染,病毒感染后潛伏期很長(zhǎng)可達(dá)數(shù)月、數(shù)年甚至數(shù)十年之久。此時(shí)機(jī)體無(wú)癥狀，也分離不出病毒。一旦發(fā)病出現(xiàn)慢性進(jìn)行性疾病，最終常為致死性感染。如AIDS、羊瘙癢?。⊿CRAPIE）、人克雅病（CJD）、庫(kù)魯?。↘URU）等。庫(kù)魯病是朊病毒感染機(jī)體后，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)達(dá)數(shù)十年的潛伏期后，引起的一種進(jìn)行性小腦退行性疾病。,4急性病毒感染的遲發(fā)并發(fā)癥,急性感染后1年或數(shù)年，發(fā)生致死性的病毒病。如亞急性硬化性全腦炎（SSPE）。該病是在兒童期感染麻疹病毒后，有些到青春期才表現(xiàn)為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，用電鏡在腦組織中可查到類(lèi)似麻疹病毒樣顆粒。有人認(rèn)為這是麻疹病毒的缺陷病毒。,第二節(jié)病毒的致病機(jī)制,病毒能否感染機(jī)體引起疾病取決于病毒的致病性病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)增殖，導(dǎo)致宿主細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能改變，并擴(kuò)延到多數(shù)細(xì)胞，便可形成組織器官的損傷及功能障礙。宿主免疫力在病毒和機(jī)體細(xì)胞相互作用過(guò)程中，機(jī)體的免疫應(yīng)答有時(shí)也可對(duì)機(jī)體造成某些免疫病理性損傷，介導(dǎo)疾病的發(fā)生與發(fā)展。,一、病毒感染引起宿主細(xì)胞的變化,病毒對(duì)細(xì)胞的致病作用包括來(lái)自病毒的直接損傷和機(jī)體免疫病理應(yīng)答兩個(gè)方面。敏感的宿主細(xì)胞被病毒感染后，兩者相互作用下可表現(xiàn)為溶細(xì)胞作用穩(wěn)定狀態(tài)感染細(xì)胞凋亡包涵體的形成細(xì)胞增生和轉(zhuǎn)化病毒基因的整合,（一）溶細(xì)胞作用,病毒在宿主易感細(xì)胞內(nèi)增殖成熟后，短時(shí)間釋放大量子代病毒造成細(xì)胞破壞與死亡，這種作用稱(chēng)殺細(xì)胞效應(yīng)，或稱(chēng)為溶細(xì)胞作用。主要見(jiàn)于無(wú)包膜，殺傷性強(qiáng)的病毒。病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖引起細(xì)胞變性、死亡裂解的作用稱(chēng)病毒的細(xì)胞病變效應(yīng)（CYTOPATHICEFFECT,CPE）。,,病毒培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)的CPE,二穩(wěn)定狀態(tài)感染,一些不具有殺細(xì)胞效應(yīng)的病毒（多為有包膜病毒）所引起的感染稱(chēng)穩(wěn)定狀態(tài)感染STEADYSTATEINFECTION。病毒在感染宿主細(xì)胞的過(guò)程中，對(duì)細(xì)胞代謝、溶酶體膜影響不很大。成熟的病毒多以出芽方式釋放出來(lái)，其過(guò)程緩慢、病變輕微，細(xì)胞暫時(shí)還不會(huì)出現(xiàn)裂解和死亡，但可發(fā)生宿主細(xì)胞膜受體被破壞、細(xì)胞膜成分發(fā)生變化，出現(xiàn)細(xì)胞融合及細(xì)胞表面產(chǎn)生新的抗原等。,1細(xì)胞融合感染與未感染的細(xì)胞融合，可以使病毒從感染的細(xì)胞直接進(jìn)入相鄰的正常細(xì)胞，有利于病毒在細(xì)胞間的擴(kuò)散。2細(xì)胞膜出現(xiàn)新抗原病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖過(guò)程中，將病毒基因編碼的蛋白質(zhì)插入細(xì)胞膜表面，導(dǎo)致細(xì)胞膜表面抗原的改變。有利于進(jìn)行病毒感染的診斷。,（三）細(xì)胞凋亡,細(xì)胞凋亡（CELLAPOPTOSIS）是由細(xì)胞基因自身指令發(fā)生的一種生物學(xué)過(guò)程。實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)有些病毒（腺病毒、人免疫缺陷病毒等）增殖可直接誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，也可通過(guò)病毒基因組編碼的蛋白質(zhì)間接作用下誘發(fā)細(xì)胞凋亡。,（四）包涵體的形成,某些受病毒感染的細(xì)胞內(nèi)，用普通光學(xué)顯微鏡可看到有與正常細(xì)胞結(jié)構(gòu)和著色不同的圓形或橢圓形斑塊，稱(chēng)為包涵體（INCLUSIONBODYORIBCLUSION）。因病毒種類(lèi)不同，包涵體有位于胞漿內(nèi)的痘病毒，也有在細(xì)胞核內(nèi)的皰疹病毒；或者兩者都有麻疹病毒；有嗜酸性的或嗜堿性的。包涵體的本質(zhì)①有些病毒的包涵體就是病毒顆粒的聚集體；②有些是病毒增殖留下的痕跡；③病毒感染引起的細(xì)胞反應(yīng)物?？勺鳛樵\斷依據(jù)和鑒定病毒的參考。如從可疑為狂犬病的腦組織切片或涂片中發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)有嗜酸性包涵體，即內(nèi)基小體NEGRIBODY，可診斷為狂犬病。,（五）細(xì)胞轉(zhuǎn)化增生和病毒基因組的整合,某些DNA病毒的全部或部分核酸，或RNA病毒基因組經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后產(chǎn)生的DNA，結(jié)合至細(xì)胞染色體中，稱(chēng)為整合。整合作用可使細(xì)胞遺傳性狀發(fā)生改變，即轉(zhuǎn)化（TRANSFORMATION）。轉(zhuǎn)化的細(xì)胞生長(zhǎng)、分裂失控，細(xì)胞可發(fā)生惡性變。,病毒的致腫瘤作用,DNA病毒（1）乙型肝炎病毒（HBV）與原發(fā)性肝癌有關(guān)；（2）EB病毒（EBV）與鼻咽癌、非洲兒童惡性淋巴瘤有關(guān)；（3）人乳頭瘤病毒（HPV）與子宮頸癌有關(guān)。RNA病毒只有逆轉(zhuǎn)錄病毒科與癌癥有關(guān)。人類(lèi)T細(xì)胞白血病病毒HTLVI型。,二、病毒感染引起的機(jī)體變化,一組織器官的損傷及組織器官的親嗜性病毒對(duì)細(xì)胞的殺傷作用，在大多數(shù)情況下，必然導(dǎo)致組織和器官的損傷和功能障礙。病毒對(duì)人體組織的致病作用是有選擇性的。例如，流感病毒和鼻病毒對(duì)呼吸道粘膜有親嗜性；天花病毒和皰疹病毒對(duì)皮膚粘膜細(xì)胞有親嗜性；而腦炎病毒和脊髓灰質(zhì)炎病毒則對(duì)神經(jīng)組織具有親嗜性。,（二免疫病理?yè)p傷,1．體液免疫病理作用許多病毒如狂犬病病毒、HSV、流感病毒等有包膜病毒侵入細(xì)胞后，能誘發(fā)細(xì)胞表面出現(xiàn)新抗原。這種抗原與特異性抗體結(jié)合后，在補(bǔ)體參與下引起細(xì)胞的破壞。2．細(xì)胞免疫病理作用細(xì)胞免疫在某些病毒感染的恢復(fù)上起著重要作用。但特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞CTL可以同時(shí)損傷受病毒感染而出現(xiàn)膜新抗原的靶細(xì)胞。病毒蛋白亦可因與宿主細(xì)胞的某些蛋白間存在共同抗原性而導(dǎo)致自身免疫應(yīng)答。由于某些病毒可引起免疫病理性損傷，因此，一般在臨床上不宜應(yīng)用免疫功能增強(qiáng)劑治療這類(lèi)疾病。綜上，病毒感染早期所致細(xì)胞損傷主要是病毒引起，感染后期由免疫復(fù)合物、補(bǔ)體活化、ADCC作用、CD4T細(xì)胞介導(dǎo)的復(fù)雜反應(yīng)引起機(jī)體局部組織器官的嚴(yán)重?fù)p傷和炎癥。,三病毒感染對(duì)免疫系統(tǒng)的影響,1．病毒感染引起的免疫抑制許多病毒感染可引起暫時(shí)性免疫抑制。如麻疹病毒、風(fēng)疹病毒、CMV等感染，急性期和恢復(fù)期患者外周血淋巴細(xì)胞對(duì)特異性抗原和促有絲分裂原PHA、CONA）的反應(yīng)減弱。同時(shí)，對(duì)結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)也出現(xiàn)轉(zhuǎn)陰的情況。2．病毒感染對(duì)免疫活性細(xì)胞的殺傷已發(fā)現(xiàn)引起AIDS的人類(lèi)免疫缺陷病毒HIV）對(duì)輔助性T細(xì)胞CD4＋具有強(qiáng)親和性和殺傷性。因而在感染者出現(xiàn)CD4＋細(xì)胞減少，CD8細(xì)胞數(shù)相對(duì)增多，兩種細(xì)胞比值倒置的現(xiàn)象。3．病毒感染引起自身免疫性疾病隱蔽在細(xì)胞內(nèi)的一些抗原暴露或釋放出來(lái)；病毒抗原也可能與機(jī)體細(xì)胞結(jié)合，改變細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)成為“非已物質(zhì)”，這些細(xì)胞可成為靶細(xì)胞而受到免疫細(xì)胞和免疫因子的作用，從而發(fā)生自身免疫性疾病。,第三節(jié)抗病毒免疫ANTIVIRALIMMUNITY,干擾素,定義,由病毒或其他干擾素誘生劑刺激人或動(dòng)物細(xì)胞所產(chǎn)生的一類(lèi)分泌性蛋白具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等多種生物學(xué)活性。,,種類(lèi),種類(lèi)產(chǎn)生細(xì)胞抗病毒免疫調(diào)節(jié)抗腫瘤?人白細(xì)胞強(qiáng)弱弱?人成纖維細(xì)胞強(qiáng)弱弱?T細(xì)胞弱強(qiáng)強(qiáng),抗病毒意義,抗病毒特點(diǎn),種的特異性、間接性、廣譜性,早期中斷病毒復(fù)制，阻止病毒擴(kuò)散,LYSISOFVIRUSINFECTEDCELLSBYCYTOTOXICEFFECTORCELLS,體液免疫,病毒中和抗體針對(duì)病毒某些表面抗原血凝抑制抗體血凝素補(bǔ)體結(jié)合抗體病毒內(nèi)部抗原或表面非中和抗原,HUMORALIMMUNITY,MECHANISMSOFVIRUSNEUTRALIZATIONBYANTIBODYATTHECELLULARLEVEL,EXTRACELLULARNEUTRALIZATIONOFVIRUSBYANTIBODY,ANTIBODYDEPENDENTCELLULARCYTOTOXICITYORADCC,細(xì)胞免疫,細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞直接殺傷靶細(xì)胞（細(xì)胞裂解、細(xì)胞凋亡）分泌多種細(xì)胞因子（IFN－GAMMA、TNF）等發(fā)揮抗病毒作用。TH1細(xì)胞,LYSISOFVIRUSINFECTEDCELLSBYCYTOTOXICEFFECTORCELLS,CELLMEDIATEDEVENTSINVIRALINFECTIONS,抗病毒免疫持續(xù)時(shí)間,牢固持久免疫力有病毒血癥的全身性病毒感染水痘、天花單一血清型的病毒感染乙型腦炎病毒短暫免疫力局部或粘膜表面感染流感病毒、鼻病毒多血清型病毒感染鼻病毒易發(fā)生抗原變異的病毒感染流感病毒,病毒感染的診斷與防治,常用的病毒學(xué)診斷方法包括病毒的分離鑒定病毒的血清學(xué)檢查病毒蛋白和核酸的檢測(cè),一、病毒感染的診斷,（一）標(biāo)本的采取與送檢,應(yīng)注意下列原則1對(duì)本身帶有雜菌如咽拭子、糞便或易受污染的標(biāo)本，要進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)使用抗生素。2因病毒在室溫中易失去活性，標(biāo)本應(yīng)低溫保存并盡快送檢。3血清學(xué)診斷標(biāo)本的采取應(yīng)在發(fā)病初期和病后2～3W內(nèi)各取1份血清，以便對(duì)比雙份血清抗體效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化。,（二）病毒的分離與鑒定,病毒的分離1動(dòng)物接種是最原始的病毒培養(yǎng)方法，根據(jù)病毒種類(lèi)不同，選擇敏感動(dòng)物及適宜接種部位，如嗜神經(jīng)性病毒（狂犬病毒）可接種于小鼠腦內(nèi)，痘病毒可接種于家兔角膜或皮內(nèi)。,,2雞胚培養(yǎng)雞胚對(duì)多種病毒敏感。一般采用孵化9～14天的雞胚，根據(jù)病毒種類(lèi)不同，將病毒標(biāo)本接種于雞胚的不同部位，最常用的雞胚接種部位有羊膜腔、尿囊腔、絨毛尿囊膜和卵黃囊等。,3組織培養(yǎng)法TISSUECULTURE或細(xì)胞培養(yǎng)CELLCULTURE法是將離體活組織塊或分散的組織細(xì)胞加以培養(yǎng)的技術(shù)總稱(chēng)，為病毒分離鑒定中的最常用的基本方法。,細(xì)胞的變化有些病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖時(shí)可引起特有的細(xì)胞病變，稱(chēng)為細(xì)胞病變效應(yīng)CYTOPATHICEFFECT，CPE。常見(jiàn)的變化有細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等。有些病毒如麻疹病毒、CMV、RSV等作用于細(xì)胞膜，可使鄰近的細(xì)胞相互融合，形成多核巨細(xì)胞或稱(chēng)融合細(xì)胞。有些病毒如狂犬病病毒、麻疹病毒等可在培養(yǎng)細(xì)胞中形成胞漿或核內(nèi)的包涵體。,病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中增殖的指標(biāo),,病毒培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)的CPE,,2紅細(xì)胞吸附HEMADSORPTION,HAD流感或副流感病毒等感染細(xì)胞后，由于細(xì)胞膜上出現(xiàn)了血凝素HAEMAGGLUTININ,HA，具有吸附脊椎動(dòng)物豚鼠、雞、猴等紅細(xì)胞的能力，這一現(xiàn)象稱(chēng)紅細(xì)胞吸附，常用來(lái)測(cè)定具有HA的粘病毒與副粘病毒的增殖。若有相應(yīng)的抗血清，則能中和細(xì)胞膜上的HA，HAD不再發(fā)生，稱(chēng)紅細(xì)胞吸附抑制試驗(yàn)。,3干擾現(xiàn)象INTERFERENCE某些病毒感染細(xì)胞時(shí)不出現(xiàn)CPE或其他易于測(cè)出的變化如HAD，但能干擾在其后感染的另一病毒的增殖。如風(fēng)疹病毒感染VERO細(xì)胞時(shí)CPE不明顯，但它能干擾后感染的?？刹《綞CHOV的增殖，從而阻抑后者所特有的CPE。,4細(xì)胞代謝的改變病毒感染細(xì)胞的結(jié)果可使培養(yǎng)液的PH值改變，說(shuō)明細(xì)胞的代謝在病毒感染后發(fā)生了變化。這種培養(yǎng)環(huán)境的生化改變也可作為判斷病毒增殖的指標(biāo)。,病毒的數(shù)量與感染性測(cè)定,空斑形成單位（PLAQUEFORMINGUNIT，PFU）限于用在有產(chǎn)生空斑能力的病毒。測(cè)定單層細(xì)胞培養(yǎng)中病毒裂解空斑的形成。50組織細(xì)胞感染量（50TISSUECULTUREINFECTIOUSDOSE，TCID50）引起50雞胚、動(dòng)物死亡或50的培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生CPE的最小病毒量。,（三）病毒感染的血清學(xué)診斷,原理是用已知病毒抗原來(lái)檢測(cè)病人血清中有無(wú)相應(yīng)抗體，故須待病人感染后體內(nèi)產(chǎn)生抗體時(shí)才能檢出。另外，在采取臨床標(biāo)本及病人血清應(yīng)注意病程，必須采取患者急性期血清與恢復(fù)期血清雙份血清進(jìn)行血清學(xué)試驗(yàn)。若第2次血清抗體滴度比第1次高出4倍以上時(shí)，才有診斷意義。,（四）病毒感染的快速診斷,快速診斷主要是指從含有病毒標(biāo)本及感染機(jī)體的血清中檢測(cè)病毒顆粒、蛋白抗原、IGM抗體和核酸等，往往在數(shù)小時(shí)內(nèi)即可得出結(jié)果。,形態(tài)學(xué)檢查,1電鏡和免疫電鏡檢查2普通光學(xué)顯微鏡檢查有些病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)增殖后，在細(xì)胞的一定部位胞核、胞漿或兩者兼有出現(xiàn)一個(gè)或數(shù)個(gè)、圓形或橢圓形、嗜酸性或嗜堿性的結(jié)構(gòu)，即包涵體。包涵體對(duì)病毒感染的診斷有一定價(jià)值。,病毒蛋白抗原檢查,用熒光素、放射性同位素、過(guò)氧化物酶等標(biāo)記抗體，采用免疫學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)，檢測(cè)標(biāo)本中的病毒蛋白抗原，具有敏感、特異、快速等優(yōu)點(diǎn)。1免疫熒光技術(shù)IMMUNOFLUORESCENCE,IF2固相放射免疫測(cè)定SOLIDPHASERADIOIMMUNOASSAY,SPRIA3酶免疫技術(shù)ENZYMEIMMUNOASSAY,EIA此法可檢測(cè)多種病毒及其抗體，主要是酶免疫組化法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法ELISA。,特異性IGM抗體的檢測(cè),檢測(cè)病毒特異性IGM抗體可診斷急性感染，特別是對(duì)證實(shí)孕婦感染風(fēng)疹病毒尤為重要，但應(yīng)注意類(lèi)風(fēng)濕因子IGM的干擾。另外，檢測(cè)早期抗原的抗體是快速診斷的另一途徑。如檢測(cè)針對(duì)EBV的早期抗原EA、核心抗原EANA和衣殼抗原VCA等的抗體，可以區(qū)別急性或慢性EBV感染。此外，分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)、氣相色譜技術(shù)等，均可用來(lái)分析和鑒定病毒感染。,檢測(cè)病毒核酸,1核酸雜交技術(shù)用于病毒檢測(cè)的有斑點(diǎn)雜交、細(xì)胞內(nèi)原位雜交、DNA印跡雜交、RNA印跡雜交等。2核酸擴(kuò)增法目前多數(shù)病毒基因已通過(guò)分子克隆技術(shù)被明確了核苷酸序列，使得DNA擴(kuò)增技術(shù)逐步發(fā)展為常規(guī)診斷技術(shù)之一。3基因芯片技術(shù),,,病毒的快速診斷,光鏡包涵體,電鏡,免疫熒光,ELISA,分子生物學(xué)技術(shù),雜交,SOUTHERNBLOT,PCR,NORTHERNBLOT,,,,,,,,,,,,,,,二、病毒感染的防治,免疫預(yù)防,人工主動(dòng)免疫,滅活疫苗,乙腦疫苗,狂犬疫苗,流感滅活疫苗,HAV等,減毒活疫苗,脊髓灰質(zhì)炎疫苗,麻疹疫苗,腮腺炎疫苗,風(fēng)疹疫苗,HAV疫苗,其他疫苗基因工程疫苗，核酸疫苗，亞單位疫苗等,,,,,藥物防治,金剛烷胺抑制病毒脫殼預(yù)防感冒,核苷類(lèi)藥物,病毒蛋白酶的抑制物INDINAVIR其他干擾素及干擾素誘生劑，中草藥抗病毒基因治療ASODN，ASON，核酶,皰疹凈，阿昔洛韋，AZT,,抗病毒藥物,特異性抗體治療性疫苗,免疫制劑,,,

簡(jiǎn)介：病毒學(xué)各論,微生物及免疫學(xué),雙股DNA病毒,單股DNA病毒,具有反轉(zhuǎn)錄過(guò)程的病毒,單負(fù)股病毒目,分節(jié)段的負(fù)股RNA病毒,套式病毒,其他正股病毒,朊病毒,雙股RNA病毒,病毒顆粒無(wú)囊膜，直徑27NM，20面體對(duì)稱(chēng)外表光滑呈球形，由60多個(gè)亞單位組成，每個(gè)亞單位含有4種衣殼蛋白。基因組為單分子線狀正股RNA。,一、微RNA病毒科（PICORNAVIRIDAE）,,口蹄疫是全球性最重要的動(dòng)物疫病，常在牛群、豬群大范圍流行。多種偶蹄動(dòng)物都易感。感染率很高，致死率較低。人類(lèi)偶能感染，表現(xiàn)發(fā)熱、食欲差及口、手、腳產(chǎn)生水泡。,口蹄疫病毒FMDV,診斷申報(bào)被列為必須申報(bào)的疾病，診斷只能在指定的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。檢測(cè)方法OIE推薦使用商品化及標(biāo)準(zhǔn)化的ELISA試劑盒用于診斷，數(shù)小時(shí)出結(jié)果。也用細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒，分離的病毒通過(guò)ELISA或者中和試驗(yàn)加以鑒定。,疫苗弱毒疫苗可能散毒，不安全。推薦使用濃縮的滅活疫苗。,檢測(cè)豬血清中抗豬口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC的抗體,腸道病毒EV71,手足口病HFMD是由腸道病毒引起的傳染病，多發(fā)生于5歲以下的嬰幼兒，可引起發(fā)熱和手、足、口腔等部位的皮疹、潰瘍，個(gè)別患者可引起心肌炎、肺水腫、無(wú)菌性腦膜腦炎等并發(fā)癥。引發(fā)手足口病的腸道病毒有20多種，其中柯薩奇病毒A16型COXA16和腸道病毒71型（EV71）最常見(jiàn)。,二分節(jié)段的負(fù)股RNA病毒,,分節(jié)段的RNA病毒有3個(gè)科即正粘病毒科、布尼病毒科和砂粒病毒科。正粘病毒科中禽流感病毒在動(dòng)物病毒中較為重要，核酸分8個(gè)節(jié)段，基因易發(fā)生基因重配，使病毒變異率較高，給預(yù)防帶來(lái)困難。流行的禽流感病毒毒株差異很大。布尼病毒中裂谷熱病毒是其中較為重要的病毒。,第一節(jié)正黏病毒科（ORTHOMYXOVIRIDAE）病毒顆粒多形性，多球形；有囊膜及纖突，甲、乙型病毒纖突上有兩種糖蛋白（棒狀的凝血素蛋白H、蘑菇狀的神經(jīng)氨酸酶蛋白N）；基因組為8節(jié)段線狀負(fù)股單股RNA；細(xì)胞核內(nèi)復(fù)制，胞漿膜出芽成熟釋放；對(duì)脂溶劑敏感，在外環(huán)境中極不穩(wěn)定。,禽流感病毒AIV1與人及哺乳動(dòng)物流感有關(guān)雖然早在1901年即分離禽流感病毒，但直到1955年才明確它與人及哺乳動(dòng)物流感的關(guān)系。禽流感病毒某些毒株，可不經(jīng)過(guò)豬體混合重配而直接感染人。2基因庫(kù)水禽是流感病毒的“基因庫(kù)”，并對(duì)養(yǎng)禽業(yè)構(gòu)成潛在威脅。,禽流感電鏡照片,3病毒毒力禽流感的高致病力毒株HPALV對(duì)雞有較強(qiáng)致病性，舊稱(chēng)真性雞瘟。高致病性禽流感HPAL是OIE規(guī)定的A類(lèi)疫病。病毒毒力有很大差異。高致病力毒株主要有H7N7、H5N2、H5N1亞型的某些毒株。,診斷分離病毒非常必要，對(duì)鑒定病原及其毒力均不可少。病料一般從泄殖腔內(nèi)采樣，也可采肝、脾、血液、肺等。分離接種810日齡雞胚尿囊腔。鑒定取尿囊液用雞紅細(xì)胞作HAHI或ELISA等。進(jìn)一步鑒定亞型需送國(guó)家級(jí)指定實(shí)驗(yàn)室完成。毒力分析可將分離株接種雞，或用分離毒作空斑試驗(yàn)，檢測(cè)其毒力，有毒株能產(chǎn)生空斑，無(wú)毒株則否。,高致病OIE規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)為將含病毒的雞胚尿囊液原液用滅菌生理鹽水作110稀釋靜脈內(nèi)接種48周齡SPF雞8只，每只02ML，隔離飼養(yǎng)觀察10D，死亡≥6只者，判為高致病性禽流感病毒。預(yù)防與控制預(yù)防措施應(yīng)包括在國(guó)際、國(guó)內(nèi)及局部養(yǎng)禽場(chǎng)3個(gè)不同水平。高致病力禽流感被OIE列為A類(lèi)疫病，一旦發(fā)生應(yīng)立即通報(bào)。國(guó)內(nèi)措施主要為防止病毒傳人及蔓延。養(yǎng)禽場(chǎng)還應(yīng)側(cè)重防止由野禽傳給家禽，要有隔離設(shè)施阻擋野禽。一旦發(fā)生高致病力禽流感，應(yīng)采取斷然措施防止擴(kuò)散。滅活疫苗可作預(yù)防用。,三彈狀病毒科（RHABDOVIRIDAE）,,病毒顆粒子彈狀，直徑20NM長(zhǎng)170NM。圓柱形核衣殼螺旋形對(duì)稱(chēng)，有囊膜及膜粒。基因組為單分子負(fù)股單股RNA。,彈狀病毒結(jié)構(gòu)模式圖,彈狀病毒電鏡照片,狂犬病毒1感染動(dòng)物病毒感染所有溫血?jiǎng)游?，引致人與動(dòng)物狂犬病，感染的動(dòng)物和人一旦發(fā)病，兒乎都難免死亡。2癥狀狂犬病表現(xiàn)神經(jīng)癥狀，有興奮型及麻痹型兩種。,透射電鏡下的狂犬病毒,3致病機(jī)理傳播主要傳播途徑為被帶毒動(dòng)物咬傷，病犬唾液具有高度傳染性。病毒復(fù)制病毒特異結(jié)合神經(jīng)肌肉結(jié)合處的乙酰膽堿受體及神經(jīng)節(jié)苷脂等受體。在傷口附近的肌細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，而后侵入外周神經(jīng)系統(tǒng)，沿神經(jīng)軸索上行至中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在腦的邊緣系統(tǒng)大量復(fù)制，導(dǎo)致腦組織損傷，行為失控出現(xiàn)癥狀。病毒從腦沿傳出神經(jīng)擴(kuò)散至唾液腺等器官，在其內(nèi)復(fù)制，并以很高的滴度分泌到唾液中。,4診斷具有確認(rèn)資格的人員才能作出狂犬病的實(shí)驗(yàn)室診斷。往往要確定咬人的動(dòng)物是否患狂犬病，需作腦組織切片，檢測(cè)包涵體。取其腦組織如小腦或海馬或唾液腺檢測(cè)，方法為熒光抗體染色。RTPCR技術(shù)檢測(cè)組織中的病毒RNA，敏感度高。5預(yù)防與控制應(yīng)及時(shí)撲滅狂犬病患畜。對(duì)家養(yǎng)犬、貓進(jìn)行弱毒疫苗免疫接種。,（1）形狀20面體（2）核衣殼類(lèi)型20面體（3）抵抗力熱、光及脂溶劑敏感；耐干燥、不耐酸；（4）基因組線狀雙股DNA，125KB235KB。（5）有囊膜，糖蛋白纖突,四皰疹病毒科HERPESRIVIDAE,,一、主要特征,皰疹病毒構(gòu)造模擬圖,細(xì)胞介導(dǎo)的單純皰疹病毒內(nèi)吞作用,二、病毒的復(fù)制與感染,1、偽狂犬病病毒豬為病毒原始宿主，成年豬多為隱性感染，懷孕母豬50％可發(fā)生流產(chǎn)、死胎或木乃伊胎?；蚬こ桃呙缬糜陬A(yù)防。,三、主要的皰疹病毒,2、馬立克病病毒MDV是雞的重要的傳染病病原，具有致腫瘤特性?？蔀樯窠?jīng)淋巴瘤病，出現(xiàn)麻痹等癥狀。疫苗預(yù)防。3、禽傳染性喉氣管炎病毒各年齡段雞均易感，以418周齡雞易感性高，表現(xiàn)為咳嗽、咳血。,三、主要的皰疹病毒,4、鴨瘟病毒鴨等多種水禽均易感，有弱毒疫苗。,三、主要的皰疹病毒,主要特征有囊膜，E2纖突重要，20面體對(duì)稱(chēng)，基因組線性單股正鏈RNA，黃病毒屬以VERO細(xì)胞培養(yǎng)。瘟病毒屬以原動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，多無(wú)CPE，抵抗力差。,五黃病毒科,重要的動(dòng)物病毒（1）日本乙型腦炎病毒人畜共患，多種動(dòng)物感染，使幼駒表現(xiàn)神經(jīng)癥狀，孕豬繁殖障礙，以三喙庫(kù)蚊傳播，弱毒和滅活苗預(yù)防（2）牛病毒性腹瀉病毒分CPE和非CPE兩型，可致?tīng)倥?、羊、鹿腹瀉。豬也可感染，牛黏膜病，引起綿羊抑制，經(jīng)胎盤(pán)傳播。,（3）豬瘟病毒主要特征感染豬有典型和非典型豬瘟，使孕豬繁殖障礙。預(yù)防控制Ⅰ垃圾飼料注意消毒Ⅱ撲殺有效，疫苗接種,六痘病毒科（POXVIRIDAE）,英國(guó)醫(yī)生JENNER1798開(kāi)創(chuàng)用牛痘病毒預(yù)防人天花，是病毒免疫的里程碑。目前痘苗病毒被作為基因工程疫苗載體廣泛應(yīng)用，雞痘、綿羊痘及羊口瘡為害較嚴(yán)重。,一、主要特征（1）形狀磚狀,,（2）核衣殼類(lèi)型復(fù)合對(duì)稱(chēng)。（3）抵抗力熱差、冷強(qiáng)、耐干燥、不耐酸；（4）基因組線狀雙股DNA，130KB375KB（5）復(fù)制與釋放胞漿內(nèi)復(fù)制，胞吐釋放。,二、傳播方式傳播途徑皮膚傷口感染、呼吸道、昆蟲(chóng)叮咬感染。痘病毒感染宿主譜較窄。三、培養(yǎng)特點(diǎn)痘病毒可在雞胚絨毛尿囊膜上生長(zhǎng)，多數(shù)可在膜上形成痘斑。痘斑的形態(tài)等因痘病毒的種類(lèi)而異?？筛鶕?jù)痘斑特征，對(duì)病毒作出初步鑒定。,四、主要的痘病毒1痘苗病毒痘苗病毒一直作為痘病毒的模型，同時(shí)廣泛用作疫苗預(yù)防天花。該病毒分布廣泛，而且宿主譜寬，在自然條件下能引致牛乳頭感染。,2綿羊痘病毒只感染綿羊，可致全身性皰疹，傷口、呼吸道感染。疫苗預(yù)防。,3雞痘病毒禽痘病毒屬的代表種為雞痘病毒。所有禽痘病毒均以吸血昆蟲(chóng)為機(jī)械傳播媒介有皮膚型及黏膜型兩種形式，黏膜型雞痘又稱(chēng)雞白喉，死亡率較高。,七套式病毒目,,1冠狀病毒科,病毒顆粒為球形，直徑80220NM，核衣殼螺旋對(duì)稱(chēng)有囊膜及長(zhǎng)達(dá)20NM的棒狀纖突。基因組為單分子線狀正股單股RNA。,豬傳染性胃腸炎病毒TGEV,已報(bào)道4種冠狀病毒能感染豬豬血凝性腦脊髓炎病毒豬流行性腹瀉病毒豬傳染性胃腸炎病毒豬呼吸道冠狀病毒PRCV。,致病TGEV在世界各地均有發(fā)現(xiàn)，引致仔豬腹瀉，伴有嘔吐，3周齡以下的仔者有較高死亡率。但有時(shí)成年豬也有高死亡率，母豬表現(xiàn)為厭食、發(fā)熱、腹瀉及無(wú)乳等。防制仔豬可通過(guò)初乳及奶液獲得母源IGA抗體，產(chǎn)生被動(dòng)免疫。,二、動(dòng)脈炎病毒科主要特征20面體對(duì)稱(chēng)，有囊膜，核酸為單股正鏈RNA復(fù)制和釋放方式與冠狀病毒相似。,套式病毒目,,,,,,豬呼吸與繁殖綜合征病毒分為歐洲株和美洲株、我國(guó)美洲株。母豬感染流產(chǎn)，仔豬感染呼吸困難。病毒可能來(lái)源于小鼠乳酸脫氫酶病毒。病毒感染單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生免疫抑制。冬季流行。分離病毒可用肺巨噬細(xì)胞或MA104/MAC145細(xì)胞?；蛉笔绾蜏缁蠲珙A(yù)防。,,（1）病毒無(wú)囊膜，球狀，直徑1722NM；（2）基因組為單分子單股DNA，環(huán)狀，在細(xì)胞核復(fù)制；（3）60℃30MIN，PH39。,十圓環(huán)病毒科CIRCOVIRIDAE,,一、主要特征,二、主要成員包括豬、禽及植物的圓環(huán)病毒，是目前已知最小的動(dòng)植物病毒,雞貧血病毒CAV1979年在日本發(fā)現(xiàn)，曾稱(chēng)雞傳染性貧血因子CAA，現(xiàn)已是養(yǎng)禽業(yè)的世界性問(wèn)題。除雞以外不感染其他禽，只有一個(gè)血清型。雛雞表現(xiàn)為急性免疫抑制性疾病。由于紅細(xì)胞生成減少造成貧血，血液可成水樣，凝結(jié)緩慢。常發(fā)生繼發(fā)性細(xì)菌感染。本病毒通過(guò)直接接觸傳遞，亦可經(jīng)卵垂直傳遞。大多數(shù)雞群均攜帶本病毒。,豬圓環(huán)病毒（PCV）能引起仔豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征（僵豬綜合征）。,雙股RNA病毒,,呼腸孤病毒科和雙RNA病毒核酸類(lèi)型為雙股RNA，核酸是分節(jié)段的，常常具有較高的變異率。屬于該類(lèi)的動(dòng)物較為重要的病毒有藍(lán)舌病毒、輪狀病毒、傳染性囊病病毒。雞的傳染性法氏囊炎是臨床上常見(jiàn)多發(fā)病，對(duì)我國(guó)乃至世界養(yǎng)禽業(yè)危害極大。,1、主要特征有囊膜，線性雙股RNA，分節(jié)段，三層衣殼，每層均為20面體對(duì)稱(chēng)。（1）藍(lán)舌病毒綿羊藍(lán)舌病，吸血昆蟲(chóng)傳播（2）輪狀病毒幼齡動(dòng)物易感發(fā)病，激發(fā)大腸桿菌病情加重,一、呼腸孤病毒科,1．主要特征雙股RNA，無(wú)囊膜，20面體對(duì)稱(chēng)，基因組分2節(jié)段，對(duì)熱穩(wěn)定。雞傳染性法氏囊炎病毒（1）主要特征2個(gè)血清型，1型有致病性，2型無(wú)致病性，兩者抗原交叉性差，流行過(guò)程中毒力可變強(qiáng)，主要感染25－65日齡雞。（2）微生物學(xué)診斷①制備觸片②瓊擴(kuò)③雞胚接種④雞源細(xì)胞培養(yǎng)⑤ELISA（3）預(yù)防與控制疫苗的效果不盡如人意。,雙股RNA病毒科,主要特征無(wú)囊膜，20面體對(duì)稱(chēng)，32個(gè)杯狀殼粒，核酸單股正鏈RNA。兔出血熱病毒（兔瘟）家兔野兔出血性敗血癥，2月齡一下幼兔，急性或亞急性敗血癥，死亡率100％，病毒有血凝性，尚未分離到病毒，組織苗可用于預(yù)防。,兔出血熱病毒,嵌杯病毒科,副粘病毒科（PARAMYXOVIRIDAE）,,病毒多形性，有時(shí)呈長(zhǎng)絲狀，有囊膜，表面有血凝性和/或神經(jīng)氨酸酶纖突，使細(xì)胞融合，負(fù)股RNA。,人副粘病毒電鏡照片,人副粘病毒電鏡照片,動(dòng)物的副粘病毒電鏡照片,新城疫病毒NDV引致雞、火雞、鵝、鴿、鸚鵡等新城疫，已成為世界養(yǎng)禽業(yè)最重要的疾病之一。1病癥感染雞呼吸道、循環(huán)系統(tǒng)、胃腸道紊亂及神經(jīng)癥狀都很明顯，蛋雞可有突發(fā)，生產(chǎn)蛋下降、產(chǎn)薄殼蛋或雞蛋白蛋白減少?；痣u等與雞類(lèi)似，有呼吸道及神經(jīng)系統(tǒng)癥，最常見(jiàn)氣囊炎。鴨鵝多為隱性感染。人類(lèi)亦可感染。,2致病機(jī)理感染病毒首先在呼吸道及腸道黏膜上皮復(fù)制，借助血流擴(kuò)散到脾及骨髓，產(chǎn)生二次病毒血癥，從而感染肺、腸及中樞神經(jīng)系統(tǒng)。血清型NDV只有一個(gè)血清型，但毒株毒力有較大差異?？煞殖?個(gè)類(lèi)型強(qiáng)毒型、中毒型和弱毒型。強(qiáng)毒型又名嗜內(nèi)臟型，致死率可達(dá)100％，引致廣泛的出血性損傷。天然弱毒株已作為疫苗使用。傳播病毒通過(guò)氣霧、污染的食物及飲水傳播。,3診斷必須作病毒分離及血清學(xué)試驗(yàn)?？扇∑ⅰ⒛X或肺勻漿，接種10日齡雞胚尿囊腔分離病毒。病毒能凝集雞、人及小鼠等紅細(xì)胞，再作HI試驗(yàn)鑒別。4預(yù)防與控制新城疫是OIE規(guī)定的A類(lèi)疫病，許多國(guó)家都有相應(yīng)的立法。控制措施包舌良好衛(wèi)生及免疫。通常采用由天然弱毒活毒苗及強(qiáng)毒株的油乳劑滅活苗。,朊病毒PRION是動(dòng)物與人傳染性海綿狀腦病TSE的病原，實(shí)質(zhì)上不是傳統(tǒng)意義上的病毒。它沒(méi)有核酸，只有傳染性的蛋白質(zhì)顆粒。早在15世紀(jì)發(fā)現(xiàn)的綿羊的癢病就是由朊病毒所致，1986年在英國(guó)發(fā)現(xiàn)的“瘋牛病”牛海綿狀腦病，嚴(yán)重打擊了養(yǎng)牛業(yè)，并危及人類(lèi)健康，震驚全世界，至今余波未平。,朊病毒（PRION）,,“瘋牛病”牛海綿狀腦病病原也是朊病毒。美國(guó)科學(xué)家PRUSINER獲1997年諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)，就是為了表彰其在研究朊病毒的性質(zhì)及其所致的TSE的致病機(jī)理所取得的突破性進(jìn)展。,朊病毒蛋白的一張快照表明該蛋白喜歡彼此配對(duì)存在,性質(zhì)朊病毒是細(xì)胞正常蛋白經(jīng)變構(gòu)后而獲得致病性。這種正常的細(xì)胞蛋白名為PRPC。大多數(shù)哺乳動(dòng)物的基因組均編碼，并在許多組織尤其是神經(jīng)元及淋巴內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)。PRPC與PRPSCPRP是朊病毒蛋白PRIONPROTEIN的縮寫(xiě)。PRPC是正常細(xì)胞的一種糖蛋白，分子量2700030000，稱(chēng)為PRP2730。PRP2730是PRP3335蛋白酶K不完全消化的產(chǎn)物。,朊病毒的特性,,具有反轉(zhuǎn)錄過(guò)程的病毒有反轉(zhuǎn)錄病毒科和嗜肝病毒科；嗜肝病毒科在動(dòng)物疾病方面重要性較差。反轉(zhuǎn)錄病毒科在動(dòng)物疾病方面的主要特點(diǎn)是多數(shù)病毒具有致腫瘤作用，潛伏期較長(zhǎng)。比較重要的動(dòng)物反轉(zhuǎn)錄病毒有牛白血病病毒、梅迪/維斯納病毒和馬傳染性貧血病毒。,反轉(zhuǎn)錄病毒科,反轉(zhuǎn)錄病毒科,,（1）形狀球形，有囊膜；（2）衣殼對(duì)稱(chēng)性二十面體對(duì)稱(chēng)；（3）基因組為二倍體，由兩個(gè)線狀正股單鏈RNA組成；3’端聚A尾；多聚A5’端有帽子結(jié)構(gòu)；能編碼反轉(zhuǎn)錄酶基因；（4）具有三層結(jié)構(gòu)，最內(nèi)層為基因組核蛋白復(fù)合物，包含反轉(zhuǎn)錄酶，螺旋對(duì)稱(chēng)。,一、主要特征,1可引致腫瘤的病毒甲乙丙丁戊型反錄病毒屬如禽白血?。饬霾《?、貓白血病病毒、牛白血病病毒等。2可引起免疫缺陷的多種病毒,二、主要成員,慢病毒屬如人免疫缺陷病毒1型和2型、牛、猴、貓免疫缺陷病毒、馬傳染性貧血病毒等。,腺病毒科ADENOVIRIDAE,,二、主要特征,（1）形狀五鄰體（2）核衣殼類(lèi)型20面體對(duì)稱(chēng)，有纖絲，具血凝性；（3）抵抗力熱差、冷強(qiáng)、耐干燥、不耐酸；（4）基因組線狀雙股DNA，無(wú)囊膜；（5）核內(nèi)組裝，細(xì)胞崩解釋放。,犬傳染性肝炎病毒、減蛋綜合征病毒等。,一、成員,腺病毒電鏡彩色照片,腺病毒結(jié)構(gòu)模擬圖,腺病毒標(biāo)本模擬圖,,1、犬傳染性肝炎病毒致犬傳染性肝炎，犬狐易感染；病毒經(jīng)鼻咽、口及黏膜途徑進(jìn)入體內(nèi)，最初感染扁桃體、產(chǎn)生病毒血癥，后感染實(shí)質(zhì)組織，導(dǎo)致出血及壞死，感染犬通過(guò)尿、糞及唾液排毒。,三、重要的腺病毒,2、減蛋綜合征病毒EDSV多發(fā)于產(chǎn)蛋高峰時(shí)的雞，除雞以外，鴨及鵝也發(fā)病。感染禽產(chǎn)蛋下降6080，產(chǎn)褪色蛋、軟殼蛋或無(wú)殼蛋。滅活疫苗效果好。,EDSV病毒電鏡照片,細(xì)小病毒科PARVOVIRIDAE,,（1）形狀球形（2）核衣殼類(lèi)型20面體對(duì)稱(chēng)（3）細(xì)胞核內(nèi)復(fù)制（4）基因組線狀單股DNA，無(wú)囊膜。,一、主要特征,1、豬細(xì)小病毒豬細(xì)小病毒病，病豬表現(xiàn)繁殖障礙、呼吸道癥狀，嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)。易感豬群發(fā)病率非常高。目前只發(fā)現(xiàn)一個(gè)血清型。病毒高度穩(wěn)定，在環(huán)境中能存活多月。用滅活苗或弱毒苗免疫預(yù)防。2、犬細(xì)小病毒所有犬科均易感，犬出血性腹瀉，有血凝性。3、鵝細(xì)小病毒又名小鵝瘟，高免血清與弱毒苗混合用。,

簡(jiǎn)介：普通病毒學(xué),曾勇EMAILZY110CNYAHOOCOMCNCELLPHONE15053532606,教學(xué)參考書(shū)基礎(chǔ)病毒學(xué)莽克強(qiáng)，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年，第一版普通病毒學(xué)謝天恩、胡志紅，科學(xué)出版社、2002年，第一版獸醫(yī)微生物學(xué)陸承平，中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2007年，第四版病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)傅繼華，山東科技出版社，2001年，第一版分子病毒學(xué)吳柏春，華中師范大學(xué)出版社，1999年病毒學(xué)概覽姜莉等譯，化學(xué)工業(yè)出版社，2006年HOWPATHOGENICVIRUSESWORKBASICVIROLOGYEDWARDKWAGNERMARTINEZJHEWLETT，BLACKWELLPUBLISHING,2004,SECONDEDITIONPRINCIPLESOFVIROLOGYFLINTSJ,ETAL2004,ASMPRESSSECONDEDITIONPRINCIPLESOFMOLECULARVIROLOGYCANNAJELSEVIERACADEMICPRESSFOURTHEDITION2005,課件下載煙臺(tái)大學(xué)網(wǎng)絡(luò)教學(xué)平臺(tái)用戶名2009ZENGYONG密碼123,主要章節(jié),第一章導(dǎo)論病毒學(xué)概述第二章病毒的形態(tài)與結(jié)構(gòu)第三章病毒的分類(lèi)與命名第四章病毒的侵染與復(fù)制第五章病毒的遺傳與變異第六章病毒與寄主的相互作用第七章病毒基因工程第八章幾種重要病毒的簡(jiǎn)介第九章病毒與腫瘤第十章病毒學(xué)技術(shù)第十一章病毒病的防治,國(guó)家規(guī)定強(qiáng)免（強(qiáng)制免疫）的疫苗是必須打的，即強(qiáng)制免疫的，也是免費(fèi)的，小孩日后入托、入學(xué)甚至出國(guó)都要憑打過(guò)的接種證辦理的。以下是規(guī)定強(qiáng)免的疫苗（2006年3月1日?qǐng)?zhí)行）出生時(shí)乙肝疫苗（第一次）、卡介苗1月齡乙肝疫苗（第二次）2月齡脊髓灰質(zhì)炎疫苗（第一次）3月齡脊髓灰質(zhì)炎疫苗（第二次）、百白破（第一次）4月齡脊髓灰質(zhì)炎疫苗（第三次）、百白破（第二次）5月齡百白破（第三次）6月齡乙肝疫苗（第三次）、A群流腦疫苗（第一次）8月齡麻疹疫苗（第一次）、乙腦疫苗（非活第一、二次）、（減活第一次）9月齡A群流腦疫苗（第二次）,18月齡百白破（第四次）、麻疹疫苗（第二次）2歲乙腦疫苗（非活第三次）、（減活第二次）3歲A群流腦疫苗（第三次）4歲脊髓灰質(zhì)炎疫苗（第四次）6歲乙腦疫苗（非活第四次）、（減活第三次）、A群流腦疫苗（第四次）、精白破（第一次）16歲精白破（第二次）還有一些疫苗不屬于強(qiáng)免范圍，如麻腮風(fēng)、風(fēng)疹、腮腺炎、肺炎、水痘等，都要收費(fèi)的，可自愿選擇打或不打。記住一點(diǎn),凡是收費(fèi)的疫苗都需要家長(zhǎng)簽名認(rèn)可,方可接種。,接種疫苗可以有效預(yù)防傳染病，但是在疫苗的接種過(guò)程中，由于多種原因，可能會(huì)發(fā)生極少數(shù)接種疫苗人出現(xiàn)不良反應(yīng)，在學(xué)術(shù)上叫做疫苗的相關(guān)病例。對(duì)于疫苗相關(guān)病例，國(guó)家將給予一定的補(bǔ)償。,由于中國(guó)使用的脊灰疫苗是減毒活疫苗，加上受種者個(gè)體差異等，兒童服用后有可能發(fā)生疫苗相關(guān)麻痹病例，但發(fā)生率極低，每250萬(wàn)至1000萬(wàn)孩子接種后，可能有1人出現(xiàn)接種后的麻痹甚至下身癱瘓等副反應(yīng)，這種副反應(yīng)主要發(fā)生在首次接種的兒童中。1994年，我國(guó)報(bào)告了最后1例本土脊髓灰質(zhì)炎病例，以后再無(wú)病例發(fā)生。2008年，衛(wèi)生部等部門(mén)聯(lián)合發(fā)布關(guān)于做好脊髓灰質(zhì)炎疫苗相關(guān)病例鑒定及善后處理工作的指導(dǎo)意見(jiàn)，承諾對(duì)因接種脊灰疫苗后出現(xiàn)相關(guān)小兒麻痹副反應(yīng)的兒童，由地方和衛(wèi)生部門(mén)相助，開(kāi)展醫(yī)療鑒定、賠償。同年，北京市衛(wèi)生局等相關(guān)部門(mén)印發(fā)北京市疫苗預(yù)防接種異常反應(yīng)相關(guān)麻痹型脊髓灰質(zhì)炎病例補(bǔ)償辦法試行，其中提出，當(dāng)事人應(yīng)在出現(xiàn)癥狀滿2年后的1年內(nèi)，向北京市醫(yī)學(xué)會(huì)提出傷殘等級(jí)鑒定申請(qǐng)，補(bǔ)償費(fèi)用實(shí)行一次性結(jié)算，由市財(cái)政部門(mén)在預(yù)防接種工作經(jīng)費(fèi)中安排，最高可達(dá)24萬(wàn)元。,第一章導(dǎo)論病毒學(xué)概述,第一節(jié)病毒學(xué)知識(shí)的起源及發(fā)展第二節(jié)病毒和病毒學(xué)第三節(jié)病毒的起源,本章重點(diǎn),1、了解病毒學(xué)發(fā)展歷程中的主要事件。2、病毒的基本特點(diǎn)。3、幾種亞病毒的定義。4、病毒性病原確定的標(biāo)準(zhǔn)。5、病毒的起源。,第一節(jié)病毒學(xué)知識(shí)的起源及發(fā)展,一、病毒學(xué)發(fā)展的動(dòng)力1、防治病毒性疾病2、分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的重要模式生物,二、病毒學(xué)發(fā)展的歷史,1、經(jīng)驗(yàn)時(shí)期公元前1400年，古埃及象形文字就描述了一位司祭人員的病狀是典型的脊髓灰質(zhì)炎。,公元前1000年，中國(guó)已有天花發(fā)生，到公元1000年，宋真宗時(shí)代已有吸入病痂接種人痘預(yù)防天花的辦法，1796年英國(guó)人EDWARDJENNER提出接種牛痘預(yù)防天花。1966年世界衛(wèi)生組織提出對(duì)對(duì)接觸天花患者的人進(jìn)行計(jì)劃免疫；1977年10月索馬里最后一位患者治愈，宣布全世界消滅了天花病。,天花的種痘預(yù)防,1979年10月26日聯(lián)合國(guó)世界衛(wèi)生組織在肯尼亞首都內(nèi)羅畢宣布，全世界已經(jīng)消滅了天花病，并且為此舉行了慶祝儀式?，F(xiàn)在美國(guó)和俄羅斯的兩個(gè)實(shí)驗(yàn)室（美國(guó)亞特蘭大的疾病控制中心、俄羅斯新西伯利亞的維克托實(shí)驗(yàn)室）還暫時(shí)保存有天花病毒。,在家畜的病毒病中，狂犬病的相關(guān)記載可能最早。巴斯德18221895法國(guó)著名科學(xué)家發(fā)明巴氏消毒法、1884年研制成功狂犬疫苗。,家蠶“高節(jié)”、“腳腫”郁金香碎色花病,2、病毒的發(fā)現(xiàn)時(shí)期,煙草花葉病1886年麥爾MAYER證明其有傳染性，但認(rèn)為是細(xì)菌。1892年伊萬(wàn)諾夫斯基IVANOVSKI證明通過(guò)細(xì)菌濾器的汁液仍有致病性，但認(rèn)為是細(xì)菌毒素。,CHAMBERLAND氏濾器,1898年貝杰林克BEIJERINCK荷蘭著名科學(xué)家（麥爾的助手）A能通過(guò)細(xì)菌濾器B僅能在感染的細(xì)胞內(nèi)繁殖，在體外非生命的物質(zhì)中不能生長(zhǎng)C“有感染性的、活的物質(zhì)”，并將其命名為VIRUS,第一個(gè)動(dòng)物病毒的病例?？谔阋撸?898）德國(guó)細(xì)菌學(xué)家勒夫勒（LOEFFLER）和費(fèi)羅施（FROSH）發(fā)現(xiàn)引起牛口蹄疫的病原也可以通過(guò)細(xì)菌濾器，從而再次證明伊萬(wàn)諾夫斯基和貝杰林克的重大發(fā)現(xiàn)。證明高度稀釋的濾液可以再現(xiàn)疾病，否定了毒素說(shuō)。第一個(gè)有關(guān)噬菌體的報(bào)道葡萄球菌噬菌體PHAGE來(lái)自希臘文，意指”吃”。,認(rèn)為病毒是一種與細(xì)菌類(lèi)似的病原體，不同僅在于病毒必須在活細(xì)胞內(nèi)才能繁殖，體積很小，能通過(guò)細(xì)菌濾器，被稱(chēng)為“超顯微的濾過(guò)性病毒”。,3、病毒本質(zhì)的研究時(shí)期,早期的工作證實(shí)病毒的活性與蛋白有關(guān)。1935年美國(guó)生物化學(xué)家斯坦利得到了TMV的蛋白晶體，晶體溶解后保持致病性。病毒是由蛋白質(zhì)和核酸組成，核酸可分為RNA和DNA兩種，核酸是感染、致病、復(fù)制的主體。,20世紀(jì)30年代的后期，電子顯微鏡的發(fā)展，進(jìn)一步促進(jìn)了病毒學(xué)的發(fā)展，證明病毒顆粒的內(nèi)部是核酸，外面包裹著蛋白質(zhì)。ELECTRONMICROGRAPHSOFHIGHLYPURIFIEDPREPARATIONSOFSOMEVIRUSESAADENOVIRUSBROTAVIRUSCINFLUENZAVIRUSCOURTESYOFGEORGELESERDVESICULARSTOMATITISVIRUSETOBACCOMOSAICVIRUSFALFALFAMOSAICVIRUSGT4BACTERIOPHAGEHM13BACTERIOPHAGE,4、病毒學(xué)發(fā)展中的主要成就,斯坦利（19041971）美國(guó)著名化學(xué)家，1935年提純了煙草花葉病毒，1946年獲得諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng),蒂勒（THEILERM）美國(guó)著名病毒學(xué)家，確證了黃熱病毒，成功地開(kāi)發(fā)了減毒疫苗而榮獲1951年諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。,美國(guó)科學(xué)家恩德斯ENDERSJF、韋勒WELLERTH、羅賓斯ROBBINSFC因?qū)⒓顾杌屹|(zhì)炎病毒成功地在培養(yǎng)細(xì)胞中培養(yǎng)而榮獲1954年諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng),法國(guó)科學(xué)家雅各布JACOBF、利沃夫LWOFFAM、莫諾MONODJL因提出“操縱子”概念，預(yù)言了MRNA的存在，導(dǎo)致MRNA的證實(shí)，從而使遺傳密碼的實(shí)驗(yàn)研究得以開(kāi)始，因而使分子遺傳學(xué)的整個(gè)體系得以建立，其意義十分深遠(yuǎn)。發(fā)現(xiàn)酶和病毒合成的遺傳控制機(jī)制獲1965年諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。,勞斯（PEYTONROUS18791970）美國(guó)著名病毒學(xué)家，證明病毒可引起動(dòng)物的癌癥，獲1966年諾貝爾生理學(xué)醫(yī)學(xué)獎(jiǎng),德?tīng)柌紖慰耍―ELBRUCKM）德國(guó)、赫爾希（HERSHEYA）美國(guó)、盧里亞（LURIAS）（意大利）因提出病毒的“一步生長(zhǎng)曲線”，發(fā)現(xiàn)病毒的復(fù)制機(jī)理與噬菌體的基因重組現(xiàn)象，證明遺傳物質(zhì)是DNA而不是蛋白質(zhì)，獲1969年諾貝爾生理學(xué)醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。,巴爾的摩（BALTIMORED）（美國(guó)）、杜爾貝科（DULBECCOR）（意大利）、特明（TEMINHM）（美國(guó)）巴爾的摩和特明發(fā)現(xiàn)了逆轉(zhuǎn)錄酶，證明遺傳信息不僅由DNA到RNA，也可由RNA到DNA；杜爾貝科發(fā)現(xiàn)了腫瘤病毒和細(xì)胞遺傳之間的相互作用，他倡導(dǎo)了向細(xì)胞內(nèi)注入已知功能的單個(gè)病毒基因而不注入完整病毒的技術(shù)。獲1975年諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。,畢曉普（美國(guó)）JMICHAELBISHOP,瓦爾姆斯（美國(guó)）HAROLDEVARMUS,發(fā)現(xiàn)了逆轉(zhuǎn)錄酶病毒致癌基因的細(xì)胞起源，否定以前的看法癌基因必然源自病毒。獲1989年諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。,普魯西納（美國(guó)）（SBPRUSINER１９９７年諾貝爾醫(yī)學(xué)或生理學(xué)獎(jiǎng)、發(fā)現(xiàn)感染性蛋白子（PRION）,德國(guó)科學(xué)家哈拉爾德楚爾豪森（HARALDZURHAUSEN）,法國(guó)科學(xué)家弗朗索瓦絲巴爾－西諾西（FRAN?OISEBARRéSINOUSSI）,法國(guó)科學(xué)家呂克蒙塔尼（LUCMONTAGNIER）,德國(guó)科學(xué)家哈拉爾德楚爾豪森（HARALDZURHAUSEN）因發(fā)現(xiàn)人乳頭瘤病毒引發(fā)子宮頸癌獲此殊榮，兩名法國(guó)科學(xué)家弗朗索瓦絲巴爾－西諾西（FRAN?OISEBARRéSINOUSSI）和呂克蒙塔尼（LUCMONTAGNIER）因發(fā)現(xiàn)人類(lèi)免疫缺陷病毒獲此殊榮。,2008年度諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng),美國(guó)12/21法國(guó)5/21德國(guó)2/21意大利2/21女科學(xué)家1/21,第二節(jié)病毒和病毒學(xué),一、病毒與其他微生物的區(qū)別要點(diǎn),二、病毒的特點(diǎn),①結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，不具細(xì)胞結(jié)構(gòu)，僅含一種核酸，DNA或RNA。②嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生，沒(méi)有新陳代謝機(jī)能，利用宿主細(xì)胞的酶、能量合成系統(tǒng)、核糖體、細(xì)胞因子、大分子以及病毒自身組分進(jìn)行自身繁殖。③在宿主細(xì)胞內(nèi)，子代病毒粒子由新合成的結(jié)構(gòu)組分進(jìn)行裝配而增殖。④純化的病毒可被結(jié)晶。⑤感染周期中組裝的子代病毒粒子在它們感染另外的宿主細(xì)胞時(shí)將病毒基因轉(zhuǎn)染給新的宿主細(xì)胞。⑥對(duì)一般抗生素和作用于微生物代謝途徑的藥物均不敏感。⑦絕大多數(shù)病毒在不同程度上對(duì)干擾素敏感。⑧有些病毒的核酸能整合到宿主細(xì)胞的DNA中，從而誘發(fā)潛伏性感染。,病毒的定義是一類(lèi)比較原始的、有生命特征的、能夠自我復(fù)制和嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的非細(xì)胞生物。,三、病毒學(xué),病毒學(xué)作為一獨(dú)立的學(xué)科出現(xiàn)在20世紀(jì)50年代。它是一門(mén)在充分了解病毒的一般形態(tài)和結(jié)構(gòu)特征基礎(chǔ)上，研究病毒基因組的結(jié)構(gòu)與功能，探尋病毒基因組復(fù)制、基因表達(dá)及其調(diào)控機(jī)制，從而揭示病毒感染、致病的分子本質(zhì)，為病毒基因工程疫苗和抗病毒藥物的研制以及病毒病的診斷、預(yù)防和治療提供理論基礎(chǔ)及其依據(jù)的科學(xué)。,研究病毒學(xué)的主要目的A預(yù)防疾病B利用病毒C作為模式生物，研究分子間的相互作用以及基因的復(fù)制、突變等D認(rèn)識(shí)生命的起源,四、病毒類(lèi)型,根據(jù)寄主的不同植物病毒動(dòng)物病毒噬菌體,根據(jù)核酸的不同,單鏈DNA病毒雙鏈DNA病毒DNA與RNA反轉(zhuǎn)錄病毒雙鏈RNA病毒負(fù)鏈單鏈RNA病毒正鏈單鏈RNA病毒,根據(jù)病毒組成成分與復(fù)制方式的不同,（真）病毒EUVIRUS至少含有蛋白質(zhì)和核酸兩類(lèi)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)病毒與缺損病毒病毒在增殖過(guò)程中，由于病毒基因組因某種環(huán)境因素的影響或轉(zhuǎn)錄過(guò)程的錯(cuò)誤而發(fā)生的突變，以致有裝配不全的病毒顆粒產(chǎn)生，成為缺損病毒（DEFECTIVEVIRUSPARTICLE），又稱(chēng)干擾缺損顆粒（DEFECTIVEINTERFERINGPARTICLESDI）（DI顆粒），必須依賴(lài)于其同源的完全病毒才能復(fù)制。許多病毒都有標(biāo)準(zhǔn)病毒與缺損病毒的兩重性，如脊髓灰質(zhì)炎病毒。假病毒與真病毒假型病毒（PSEUDOTYPEVIRUS）一種病毒的核酸被以另一種病毒編碼的外殼。假病毒或假病毒顆粒（PESUDOVIRION）由細(xì)胞的DNA片段被病毒的外殼包被形成。雜種病毒與純種病毒雜種病毒一種病毒顆粒中含有兩種病毒的遺傳物質(zhì)。,衛(wèi)星病毒SATELLITEVIRUS和衛(wèi)星核酸它們?nèi)鄙侏?dú)立復(fù)制的能力，需要輔助病毒HELPERVIRUS才能復(fù)制，或由輔助病毒提供外殼蛋白來(lái)包被核酸。其核酸序列大部分與輔助病毒不同，僅末端小段為同源。其中核酸編碼自己外殼蛋白的稱(chēng)為衛(wèi)星病毒，否則稱(chēng)為衛(wèi)星核酸SSDNA,SSRNA,DSRNA。類(lèi)病毒VIROID它是最小的（240375BP）單鏈、環(huán)狀RNA；有獨(dú)力侵染、自主復(fù)制能力，無(wú)需輔助病毒；沒(méi)有外殼蛋白；其核酸不編碼任何蛋白。目前僅知類(lèi)病毒侵染植物。朊病毒或朊粒PRION是一種不含有核酸的傳染性蛋白質(zhì)顆粒，能通過(guò)分子自身的構(gòu)想變化，并傳到其他分子引起同樣的變化而致病。,亞病毒SUBVIRUS,五、病毒性病害的確立,科赫法則（病毒不能用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)增殖）1937年RIVERS法則A必須發(fā)現(xiàn)某種特異病毒以一定程度的規(guī)律與某種疾病有聯(lián)系，并從患病寄主中分離病毒。B在實(shí)驗(yàn)寄主或寄主細(xì)胞中培養(yǎng)。C證明培養(yǎng)物的濾過(guò)性。D在原始寄主或有關(guān)的種內(nèi)產(chǎn)生類(lèi)似病害。E能重新分離出同一種病毒。,1973年EVANS提出免疫學(xué)證據(jù)A病毒必須存在于病人的組織、血液，并在該處反復(fù)出現(xiàn)。B能在實(shí)驗(yàn)室中很好地經(jīng)動(dòng)物或組織傳代。C在患病前期有規(guī)律地缺乏病毒特異抗體。D在疾病期間抗體有規(guī)律地出現(xiàn)。1暫時(shí)的病毒特異IGM抗體2持續(xù)的IGG抗體3局部抗體IGA在原發(fā)增殖部位E抗體的產(chǎn)生伴隨在相應(yīng)組織中存在病毒。F無(wú)類(lèi)似有關(guān)的其他病毒或抗體。G能用特異性疫苗預(yù)防。,六、病毒生命形式的兩重性,病毒存在的兩重性細(xì)胞內(nèi)（核酸分子形式）細(xì)胞外（不顯示復(fù)制活性，保持感染活性，病毒體或病毒顆粒形式）病毒的結(jié)晶性與非結(jié)晶性結(jié)晶是很多無(wú)機(jī)化合物存在的一種形式,七、病毒研究的發(fā)展趨勢(shì),1988年，世界衛(wèi)生組織（WHO）提出2000年底全球消滅脊髓灰質(zhì)炎，計(jì)劃修訂到2008年。病毒功能基因組學(xué)和功能蛋白質(zhì)組學(xué)的研究朊病毒的研究DNA疫苗的研究病毒與宿主的相互作用及致病機(jī)制,第三節(jié)病毒的起源,病毒的起源有三類(lèi)學(xué)說(shuō)1）退化性起源學(xué)說(shuō)退化性起源學(xué)說(shuō)認(rèn)為病毒是細(xì)胞內(nèi)寄生物的退化形式。這種細(xì)胞內(nèi)寄生的產(chǎn)生原因可能是由于微生物對(duì)某種不能穿過(guò)細(xì)胞膜的代謝發(fā)生了嚴(yán)重依賴(lài)。退化性起源學(xué)說(shuō)可以把病毒的起源解釋為兩個(gè)階段首先，寄生物在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生獨(dú)立復(fù)制的DNA質(zhì)粒，然后，編碼寄生物亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)單位的基因發(fā)生突變，形成病毒的衣殼蛋白。隨著進(jìn)化的發(fā)生，新獲得的可在細(xì)胞間轉(zhuǎn)移的特性被進(jìn)一步選擇下來(lái)。,2）病毒起源于宿主細(xì)胞中的RNA和（或）DNA成分的學(xué)說(shuō)這種學(xué)說(shuō)認(rèn)為，病毒是正常的細(xì)胞組分在進(jìn)化過(guò)程中獲得了自主復(fù)制的能力獨(dú)立進(jìn)化而來(lái)的。該學(xué)說(shuō)能解釋所有病毒的起源DNA病毒起源于質(zhì)粒或轉(zhuǎn)移因子；反轉(zhuǎn)錄病毒起源于反轉(zhuǎn)座子；RNA病毒起源于自主復(fù)制的MRNA。,3）病毒起源于具有自主復(fù)制功能的原始大分子的學(xué)說(shuō)病毒起源于自主復(fù)制的RNA分子。核糖核酸多聚體具有自主復(fù)制的信息和能力。由于發(fā)現(xiàn)RNA分子具有催化化學(xué)反應(yīng)的能力使得RNA為生命和病毒的起源的學(xué)說(shuō)變得更具有吸引力。小而簡(jiǎn)單的RNA分子具有至少下列三種化學(xué)功能①核糖核酸酶的活性；②能自我拼接去掉內(nèi)部的核酸序列；③有實(shí)驗(yàn)表明，以RNA作引物可以合成依賴(lài)于模板的多聚胞嘧啶核酸。RNA分子可以進(jìn)行復(fù)制和進(jìn)化相關(guān)的三個(gè)基本反應(yīng)。,這些觀察都有利于RNA是現(xiàn)今生物的進(jìn)化起源的學(xué)說(shuō)。首先是RNA的形成和復(fù)制，然后演變出RNA蛋白介導(dǎo)的一系列反應(yīng)，第三步產(chǎn)生了DNA。DNA由于比RNA穩(wěn)定而最終成為遺傳信息。RNA的反應(yīng)性有利于它作為催化物而不利于它成為遺傳物質(zhì)。有些分子被包裝在細(xì)胞和組織中，形成宿主細(xì)胞，另一些分子則自我復(fù)制或寄生在宿主細(xì)胞中，進(jìn)化成為病毒。這一理論認(rèn)為病毒與宿主是共進(jìn)化的?，F(xiàn)今的類(lèi)病毒和衛(wèi)星RNA，仍保留有部分的RNA催化性能，因而被一些學(xué)者認(rèn)為是生命形式出現(xiàn)以前的RNA世界的化石。,研究病毒的進(jìn)化有多種方法，可以通過(guò)序列同源性、基因組排列順序、基因組的基因組成等方面構(gòu)建病毒的進(jìn)化樹(shù)。研究基因組成的演化對(duì)揭示基因的起源及病毒與宿主之間的關(guān)系具有重要意義。DNA病毒和RNA病毒相比相對(duì)穩(wěn)定。一方面，DNA復(fù)制時(shí)，其酶具有校正功能；另一方面，DNA病毒容易在宿主體內(nèi)形成持續(xù)性或慢性感染，它們可以在宿主體內(nèi)存在多年而后爆發(fā)，其間可能幾乎不發(fā)生變異，因此，這類(lèi)病毒的變異速率可能表現(xiàn)得比裂解型病毒慢一些。一般來(lái)講，DNA病毒不會(huì)像RNA病毒那樣引起人類(lèi)世界范圍的流行性疾病。RNA病毒引起的疾病流行和變異成為研究RNA病毒進(jìn)化，特別是進(jìn)化時(shí)間的良好素材。,相關(guān)病毒學(xué)研究單位,中國(guó)科學(xué)院武漢病毒研究所武漢大學(xué)，病毒學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室中國(guó)疾病預(yù)防控制中心軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院,習(xí)題,1列舉5例病毒學(xué)發(fā)展史上的突出成就2列舉5本有影響的病毒學(xué)雜志3病毒的特點(diǎn)4病毒基因組的特點(diǎn)5病毒性病原確立的標(biāo)準(zhǔn),

簡(jiǎn)介：病毒學(xué)研究方法簡(jiǎn)介,生物安全實(shí)驗(yàn)室,P1實(shí)驗(yàn)室研究的病毒危險(xiǎn)性較低，試驗(yàn)人員連口罩都不用帶，穿上白大褂就可以了，試驗(yàn)人員在這里很放松；P2實(shí)驗(yàn)室研究的是中度危險(xiǎn)的病原，像肝炎、流行性感冒等等，要求戴防護(hù)性較好的口罩；P3實(shí)驗(yàn)室研究的是高度危險(xiǎn)的病毒，傳染性很強(qiáng)，而且沒(méi)有疫苗，試驗(yàn)人員的保護(hù)措施要比P1/P2實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)密得多；P4實(shí)驗(yàn)室全球級(jí)別最高的生物安全實(shí)驗(yàn)室，研究的是極度危險(xiǎn)的病毒，如令人談之色變的埃博拉病毒、馬爾堡病毒，進(jìn)入這種實(shí)驗(yàn)室的工作人員，處于防護(hù)服的嚴(yán)密保護(hù)之下，連空氣都不能在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)呼吸，紅色螺旋狀管子，是專(zhuān)門(mén)用來(lái)向室內(nèi)輸送新鮮空氣的，試驗(yàn)人員一進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，要先屏住呼吸，馬上接上這種管子，然后才能呼吸。,,根據(jù)微生物及其毒素的危害程度不同，分為４級(jí)，一級(jí)最低，四級(jí)最高。,病毒學(xué)研究的主要方法,生物學(xué)特性測(cè)定在宿主上的反應(yīng)癥狀、傳播等病毒分離與培養(yǎng)提純與純化、二元培養(yǎng)法光鏡與電鏡觀察病毒粒子和病毒與相應(yīng)抗血清的特異免疫吸附情況免疫學(xué)技術(shù)以血清學(xué)和組織免疫化學(xué)方法檢測(cè)帶毒情況、多克隆抗體、單克隆抗體分子生物學(xué)技術(shù)核酸分子雜交、PCR等,一、生物學(xué)特性測(cè)定,在宿主上的反應(yīng)宿主范圍、癥狀表現(xiàn)、傳播方式等病毒的理化性質(zhì)病毒粒子的形態(tài)、大小、對(duì)理化因子的耐受性、體外存活期等病毒接種方法注射接種、病毒組織培養(yǎng)技術(shù)植物病毒汁液摩擦接種、昆蟲(chóng)介體接種、嫁接接種、菟絲子接種法等,巨細(xì)胞病毒感染細(xì)胞的典型“貓頭鷹眼”樣核內(nèi)包涵體,冠狀病毒感染“非典”X線胸部檢查可見(jiàn)肺部不同程度的片狀陰影，少數(shù)病人進(jìn)展迅速，呈大片狀陰影，大多數(shù)為雙側(cè)改變，陰影吸收消散較慢。,TMVTRANSMISSIONBYANAPISSP,ASEVEREMOSAICSYMPTOMONTOMATOLEAFTMV,腿色斑CHLOROTICSPOTING,黃化YELLOWING,病毒檢測(cè),二、病毒的分離與鑒定,,提純EXTRACTION/純化PURIFICATION,病毒的分離與鑒定,病毒的提純是將宿主中的病毒粒子與宿主細(xì)胞組分區(qū)分開(kāi)來(lái)的過(guò)程。原理是利用病毒的蛋白質(zhì)和大分子粒體的特性，及其與宿主細(xì)胞組分在理化特性上的差異將病毒粒子區(qū)分出來(lái)，并盡可能保持侵染力。目的是確切地研究病毒理化、生物學(xué)特性、化學(xué)組分、組成、增殖過(guò)程及機(jī)制，還可用于制備高效價(jià)的抗血清。,1953年，斯坦利第一次提取并結(jié)晶了TMV，這是病毒學(xué)史上一個(gè)重要的里程碑。,（一）病毒的純化與提純,,一般純化方法動(dòng)物病毒的純化從空斑、病斑分離，用終點(diǎn)稀釋法植物病毒的純化如確定是一種病毒，且可機(jī)械摩擦接種，則接種到適當(dāng)寄主上；如可能有多種病毒，則要嫁接傳染，先將病毒保存，然后試用蟲(chóng)媒或其他方法分離。,二、病毒的分離與培養(yǎng),,,1、差速離心和密度梯度離心差速離心交替使用高速和低速離心高速離心（4000080000G）使病毒沉淀，取沉淀低速離心（約4000G）僅去除大的細(xì)胞碎片等雜質(zhì)，取上清密度梯度離心部分或完全根據(jù)顆粒在一個(gè)無(wú)對(duì)流介質(zhì)中的密度而獲得分離蔗糖1040CSCL等,（三）病毒提純的技術(shù),二、病毒的分離與培養(yǎng),,,2、沉淀法簡(jiǎn)便快速但粗糙易變性鹽析法硫酸銨濃度達(dá)3050飽和度時(shí)多數(shù)病毒沉淀等電點(diǎn)沉淀加醋酸或鹽酸丙酮沉淀濃度達(dá)4070聚乙二醇沉淀濃度達(dá)48乙醇沉淀濃度達(dá)20沉淀植物蛋白，上清夜用硫酸銨沉淀3、吸附法磷酸鈣、離子交換樹(shù)脂、羧甲基纖維素4、酶處理許多病毒抗蛋白酶和核酸酶,（三）病毒提純的技術(shù),二、病毒的分離與培養(yǎng),,,5、有機(jī)溶劑萃取有機(jī)溶劑可溶掉脂肪、有色雜質(zhì)或非病毒的變性蛋白，如脊髓灰質(zhì)炎病毒提純中用正丁醇要考慮病毒對(duì)有機(jī)溶劑的耐受性,（三）病毒提純的技術(shù),,,,脂肪,變性非病毒蛋白,病毒,水,醇,,,,,,二、病毒的分離與培養(yǎng),,,6、電泳法普通電泳、密度梯度電泳、等電聚焦電泳等7、柱層析法吸附用離子交換或吸附法分子篩瓊脂糖或葡聚糖制成凝膠柱8、抗血清處理針對(duì)宿主蛋白的血清來(lái)沉淀雜蛋白加病毒的抗血清形成病毒抗體復(fù)合物,（三）病毒提純的技術(shù),二、病毒的分離與培養(yǎng),要證明某種疾病是某一感染因子所引起．則必須滿足RIVERS法則①?gòu)幕疾≌唧w內(nèi)分離出病毒；②在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或寄主細(xì)胞中可以培養(yǎng)；③證明這種培養(yǎng)物具有濾過(guò)性；④在原始宿主或相關(guān)種內(nèi)能產(chǎn)生同樣的病癥；⑤能重新分離出病毒。病毒的分離與鑒定組成了病毒學(xué)診斷技術(shù)的主體。病毒分離VIRUSISOLATION是診斷病毒感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”GOLDSTANDARD。,二、病毒的分離,病毒的分離,組織培養(yǎng)雞胚培養(yǎng)動(dòng)物接種,,組織培養(yǎng)原代細(xì)胞新鮮組織胰蛋白酶消化，分散培養(yǎng)液成單層細(xì)胞二倍體細(xì)胞株原代細(xì)胞傳代（為二倍體細(xì)胞）傳代細(xì)胞系腫瘤組織或二倍體細(xì)胞自發(fā)轉(zhuǎn)化（非整倍體）,二、病毒的分離與培養(yǎng),,卵黃囊接種用58D雞胚，以細(xì)長(zhǎng)針由氣室端刺入卵黃囊，孵育后收集卵黃囊膜檢查。常用于一些嗜神經(jīng)病毒羊膜腔用1214D雞胚，將檢材注入羊膜腔，孵育后取羊水檢查。常用于流感病毒的初次分離尿囊腔用912D雞胚，將標(biāo)本接種于尿囊腔，孵育后取尿囊液檢查。常用于培養(yǎng)流感病毒和腮腺炎病毒等絨毛尿囊膜用1012D雞胚，無(wú)菌下開(kāi)一小窗，將材料滴在絨毛尿囊膜上，孵育后觀察膜上有無(wú)斑點(diǎn)病變。常用于培養(yǎng)單純皰疹病毒，天花病毒和痘病毒,雞胚接種,絨毛尿囊膜痘病毒特異性損傷,3動(dòng)物接種,常用動(dòng)物小鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、猴等。不同病毒對(duì)動(dòng)物的敏感性不同，根據(jù)病毒種類(lèi)加以選擇。接種途徑按病毒侵襲部位選擇相應(yīng)的接種途徑乙型腦炎病毒及狂犬病毒小鼠腦內(nèi)接種柯薩奇病毒乳鼠腹腔接種乙肝病毒黑猩猩靜脈注射流感病毒鼻腔滴種用途分離鑒定病毒，制備疫苗，制備抗血清,標(biāo)本制備濃縮標(biāo)本有以下幾種方法①超速離心離心的時(shí)間和速度取決于病毒顆粒的大小和離心機(jī)轉(zhuǎn)頭的半徑，一般是30MIN到3H．沉淀的樣本用滅菌蒸餾水洗后再放到銅網(wǎng)上；②超過(guò)濾法用于分子篩的蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量為10000；③接種細(xì)胞接種細(xì)胞增殖病毒，然后快速包埋、切片；④免疫凝集如有特異抗血清，且病毒已知，也可用該法濃縮病毒,三、病毒的光鏡與電鏡觀察法,光鏡宿主組織切片、包涵體,三、病毒的電鏡觀察法,1、正染法（超薄切片法、病組織）將細(xì)胞用戊二醛固定，然后脫水、包埋、切片、染色、觀察病毒顆粒，通常12D完成。操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí)，但樣品可長(zhǎng)期保存，可觀察病毒粒子形態(tài)與發(fā)生過(guò)程。2、負(fù)染法直接將病毒懸液也可用細(xì)胞滴在銅網(wǎng)上，用重金屬通常用磷鎢酸進(jìn)行染色，觀察病毒顆粒，1020MIN可出結(jié)果。原理負(fù)性染料不滲入病毒顆粒，而是將病毒顆粒包繞，由于負(fù)性染料含重金屬使電子束不能穿透，病毒顆粒具有亮度，在周?chē)当尘吧巷@示亮區(qū)較正染法顯示的圖像清晰，可顯示病毒的結(jié)構(gòu)。缺點(diǎn)敏感性低，要求病毒量在107／ML以上，同科病毒難于鑒別。3、投影技術(shù)4、膠體金標(biāo)記技術(shù)、與免疫學(xué)技術(shù)結(jié)合等,采用幾種電鏡技術(shù)觀察病毒粒子的形態(tài),ORFVIRUS口瘡病毒接觸性膿皰皮炎,EBOLAVIRUS埃博拉病毒（正染技術(shù)）,VACCINIAVIRUS痘苗病毒（投影技術(shù)）,負(fù)染技術(shù),美國(guó)疾病控制和預(yù)防中心公布的一張未標(biāo)明日期的彩色電子顯微照片。它顯示出H5N1型禽流感病毒（金黃色）在MDCK細(xì)胞（綠色）培養(yǎng)液中的活動(dòng)狀態(tài),電鏡技術(shù)的應(yīng)用,研究病毒形態(tài)、鑒定觀察病毒的形態(tài)及形態(tài)發(fā)生學(xué)過(guò)程；亞顯微結(jié)構(gòu)；病毒與宿主細(xì)胞的關(guān)系；病毒感染細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)改變；病毒的分類(lèi)等。診斷病毒病檢測(cè)不能在體外培養(yǎng)的病毒，如輪狀病毒、星狀病毒、嵌杯病毒、HAV等都是用電鏡最先發(fā)現(xiàn)的能進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)新的病毒和病毒病。,四、免疫學(xué)技術(shù),1、病毒抗原2、病毒抗體3、免疫學(xué)診斷方法免疫熒光法IF免疫酶法（ELISA）單克隆抗體技術(shù),血凝抑制（HI）試驗(yàn),血凝試驗(yàn)HA,瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),五、病毒抗原檢查,可檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)、外的游離病毒抗原。敏感、特異，簡(jiǎn)便、快速。適用于多種病毒性疾病的早期快速診斷。,INFLUENZAVIRUSA培養(yǎng)物DFA染色陽(yáng)性,生殖道HSV2涂片DFA染色陽(yáng)性,五、分子生物學(xué)技術(shù),,聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）核酸分子雜交SOUTHERNBLOT、NOUTHERNBLOT和WESTHERNBLOT蛋白質(zhì)組學(xué)基因組學(xué)核酸序列測(cè)定及基因功能基因工程抗病毒疫苗或抗病毒的大分子多肽、病毒載體,

簡(jiǎn)介：導(dǎo)游應(yīng)急救護(hù)知識(shí),1,2,導(dǎo)游為什么要學(xué)急救,2004年10月17日，北京“首都高校馬拉松挑戰(zhàn)賽”2人猝死,其實(shí)我們應(yīng)該做到全民普及急救知識(shí),3,時(shí)間就是生命,心搏驟停的嚴(yán)重后果以秒計(jì)算●心跳驟停黑朦，意識(shí)障礙，突然倒地●15秒抽搐●30秒呼吸停止●1～2分鐘瞳孔固定●4分鐘糖無(wú)氧代謝停止●5分鐘腦內(nèi)ATP枯竭、能量代謝完全停止●6分鐘神經(jīng)元不可逆性損傷,等急救車(chē)來(lái)就是等死,旅游途中更是如此,4,研究背景,最美列車(chē)女孩,也許什么時(shí)候你就是“最美（帥）導(dǎo)游”,5,主要內(nèi)容,一、心肺復(fù)蘇術(shù)二、氣道異物梗塞急救三、外傷現(xiàn)場(chǎng)急救四、毒蛇咬傷處理,6,一、心肺復(fù)蘇術(shù),7,8,,那些因猝死而逝去的明星,柯受良,王小波,梁左,古月,侯耀文,馬季,謝晉,高秀敏,心搏呼吸驟停判斷,心搏呼吸驟停的快速判斷，要求在10秒種內(nèi)完成突然倒地和/或意識(shí)喪失。自主呼吸停止。頸動(dòng)脈搏動(dòng)消失不能確認(rèn)即行心肺復(fù)蘇術(shù)）。,頸動(dòng)脈在喉節(jié)旁開(kāi)2～3CM單側(cè)觸摸、力度適中、時(shí)間＜5秒,意識(shí)判斷要領(lǐng),拍打雙肩，湊近耳邊大聲呼喚“喂你怎么了”如認(rèn)識(shí)對(duì)方，可直呼其名。如均無(wú)反應(yīng)，則確定為意識(shí)喪失。,高聲呼救,如確定意識(shí)喪失，應(yīng)立即高聲呼救“來(lái)人吶救命啊”讓人撥打120急救電話。第一目擊者必須在病人身旁，開(kāi)始徒手心肺復(fù)蘇的救助。,搶救的體位要求,呼救的同時(shí)，應(yīng)迅速將病人擺放成仰臥位。翻身時(shí)整體轉(zhuǎn)動(dòng)，保護(hù)頸部。身體平直，無(wú)扭曲。擺放的地點(diǎn)地面或硬板床。,部位胸骨中線中下1/3交界處。最好采用跪姿，雙膝平病人肩部。雙臂繃直，肘關(guān)節(jié)不得彎曲。雙臂形成一直線，與患者胸部垂直，用上半身重量垂直往下壓。下壓和放松時(shí)間為11。手掌根部始終緊貼胸部，放松不離位。,CCIRCULATION人工循環(huán),頻率至少100次/MIN18秒鐘內(nèi)完成30次。深度成人胸骨下陷至少5CM，兒童約5CM，嬰兒約4CM。,CCIRCULATION人工循環(huán),胸外按壓,胸外按壓,胸外心臟按壓注意事項(xiàng),1胸外心臟按壓如操作不標(biāo)準(zhǔn)，常會(huì)導(dǎo)致并發(fā)癥的發(fā)生。2按壓部位不正確。3搶救者按壓時(shí)肘部彎曲，導(dǎo)致用力不垂直，按壓力量不足，按壓深度達(dá)不到5公分。4沖擊式按壓、猛壓、按壓放松時(shí)抬手離開(kāi)胸骨定位點(diǎn)，導(dǎo)致下次按壓部位錯(cuò)誤等情況，均可由此引起骨折。,AAIRWAY（氣道的開(kāi)放）,徒手開(kāi)放氣道,1、壓頭抬頜，解除舌根后墜對(duì)氣道的壓迫。2、首先清理口腔，將其頭偏向一側(cè)，用手指探入口腔，清除分泌物及異物。,3、然后壓頭抬頜，使頭部后仰，后仰程度為下頜、耳廓的連線與地面垂直。4、動(dòng)作輕柔，防止頸部過(guò)度伸展，防止壓迫氣道。,徒手開(kāi)放氣道,BBREATHING人工呼吸,判斷呼吸要領(lǐng)●壓頭抬頜后，隨即低下頭判斷呼吸?！裱劭?、耳聽(tīng)、面感?！?秒鐘內(nèi)完成?！袷冀K保持氣道開(kāi)放位置。,●若自主呼吸消失可行口對(duì)口人工呼吸?！袷冀K保持氣道開(kāi)放?！翊禋鈺r(shí)不能漏氣。●連吹2次，讓病人出氣?！衩看未禋饬?00～800ML，以患者胸部抬起為宜?！癫皇恰按迪灎T”，吹氣持續(xù)2秒。,人工呼吸,口對(duì)口呼吸,人工呼吸,CAB協(xié)調(diào),采用按壓通氣比為302,1MIN30CC18S2B8S30CC2B13CC8S,25,2011年7月23日，重慶酉陽(yáng)，一名溺水老人被人從河中救起，渾身是水的他已重度昏迷，此時(shí)，你若在身邊，選是打120急救打110求助還是大聲呼救或是替溺水者按壓心臟,這才是酉陽(yáng)最美麗的女孩,實(shí)例,26,照片里年輕的藍(lán)衣女孩在臨危一刻給出了她的答案跪下去，嘴對(duì)嘴為溺水老人實(shí)施人工呼吸。,隨后又采用胸外心臟按壓的方式搶救。,27,路人將老人匍匐，不停拍打背部看是否能讓體內(nèi)積水排出路過(guò)的護(hù)士快速查看了溺水老人的心跳和瞳孔口對(duì)口為老人進(jìn)行人工呼吸（進(jìn)行了4MIN，期間老人的眼睛微微張開(kāi)過(guò)）不停按壓老人的胸口120趕到聽(tīng)了聽(tīng)老人的心音，把老人抬上救護(hù)車(chē)送醫(yī)院去了老人因搶救無(wú)效死亡,,,,,,事件過(guò)程,28,發(fā)達(dá)國(guó)家和我國(guó)為何差距這么大,發(fā)達(dá)國(guó)家猝死搶救成功率3070我國(guó)搶救成功率低于1,我國(guó)大多普通市民缺乏心肺復(fù)蘇意識(shí)公共場(chǎng)所很少配備自動(dòng)體外除顫儀,從20～25CM向胸骨中部心前區(qū)拳擊1、2次每次可達(dá)5J能量,適用于心臟驟停1MIN內(nèi)，無(wú)脈搏性室速或室顫除顫儀未到位時(shí)、完全性房室傳導(dǎo)阻滯。,胸前拳擊,30,“自我”心肺復(fù)蘇,獨(dú)處時(shí),心臟病發(fā)作感覺(jué)馬上就要不省人事怎樣急救,31,“自我”心肺復(fù)蘇咳嗽CPR,答案不要驚慌,要不?？人杂昧Φ目让恳淮慰人郧?都要先深吸一大口氣。然后,用力地、深深地、長(zhǎng)長(zhǎng)地咳,好像要把胸腔深處的痰咳出來(lái)一般每間隔大約兩秒鐘,要做一次吸、一次咳,一直要做到救護(hù)趕到時(shí),或者已經(jīng)感到心跳恢復(fù)正常,才能休息。,32,二、氣道異物梗塞急救,先看一段視頻,33,34,嬰幼兒嬰幼兒喉保護(hù)機(jī)制及吞咽功能不健全，進(jìn)食時(shí)又常常嬉笑、啼哭、玩耍，容易將食物、小玩具等異物吸入氣管內(nèi)造成呼吸道梗阻。青壯年成人多因在進(jìn)食時(shí)談話大笑，拋高接食花生米等食物，或進(jìn)食過(guò)快，吞咽過(guò)猛，將食物碎塊吸入氣管梗阻。老年人近年來(lái)有資料表明，老年人或體弱多病者因吞咽機(jī)能減退，更容易將口中食物等吸入氣管造成氣道梗阻。,氣道梗阻常見(jiàn)原因,35,顏面青紫不能發(fā)聲“V”形手勢(shì)肢體抽搐呼吸停止,癥狀表現(xiàn),36,自救腹部沖擊法,成人氣道梗阻急救（自救）,成人氣道梗阻急救（互救）,對(duì)于尚清醒者，可囑其彎腰并用手掌擊打其后背中間46次?；蚓戎握哂秒p手環(huán)繞患者腰間，一手握拳抵于其臍上兩橫指處，另一手握緊此拳向上、向后沖擊勒壓46次。,如果患者已經(jīng)窒息昏迷倒地，且嘗試口對(duì)口吹氣無(wú)效，可跨坐其腿上用掌根推壓臍上兩橫指處46次。,成人氣道梗阻急救（互救）,如異物被沖出，須迅速將其掏出口外?？捎檬謱⑸囝^及下巴抓住抬高然后用另一側(cè)之手指將異物鉤出，清除口腔異物（不可盲目掏挖）但應(yīng)注意不要將其推入氣道更深處，或被患者反射性閉嘴咬合，傷及救治者手指。,成人氣道梗阻急救（互救）,嬰幼兒氣道梗阻急救（互救）,三、外傷急救,外傷現(xiàn)場(chǎng)急救技術(shù),止血包扎固定搬運(yùn),止血,指壓動(dòng)脈止血法直接壓迫止血法加壓包扎止血法填塞止血法止血帶止血法,指壓止血,當(dāng)大血管（動(dòng)脈）出血時(shí)，直接用手指壓迫出血處血管的上端（近心臟部），用力壓骨頭，達(dá)到止血的目的。,指壓顳淺動(dòng)脈頭頂、額部、顳部的大出血,指壓面動(dòng)脈顏面部大出血壓下頜角前凹陷處指壓耳后動(dòng)脈耳后動(dòng)脈大出血耳后乳突下凹陷處,指壓枕動(dòng)脈一側(cè)頭后枕骨附近大出血用四指壓耳后和枕骨粗隆間的凹陷,指壓肱動(dòng)脈肘關(guān)節(jié)以下大出血上臂中段以下內(nèi)側(cè),,指壓股動(dòng)脈一側(cè)下肢大出血雙拇指壓腹股溝中點(diǎn)稍下方指壓脛前后動(dòng)脈腳部大出血雙手拇食指壓足背前及足跟和內(nèi)踝間動(dòng)脈,指壓尺橈動(dòng)脈手部大出血同時(shí)手腕兩側(cè)指壓指址動(dòng)脈指址部大出血指址跟部?jī)蓚?cè),止血帶止血,只用于四肢其它方法無(wú)法應(yīng)用時(shí)有橡皮止血帶,氣性止血帶,布制止血帶三種,注意事項(xiàng),部位上臂不能扎在中1/3部襯墊必須有松緊度以出血停止，遠(yuǎn)端摸不到搏動(dòng)為宜時(shí)間小于5小時(shí)，每小時(shí)放松一次，約3分鐘標(biāo)記標(biāo)記時(shí)間和患者,壓迫止血法,較小的傷口壓迫不少于10分鐘,加壓包扎止血,用于各種傷口可靠，最常用包扎范圍較傷口大,填塞止血法,頸部和臀部大而深傷口先填塞再包扎,包扎,應(yīng)用范圍廣保護(hù)創(chuàng)面、防止污染、止血止痛、固定敷料動(dòng)作要輕、包扎要?jiǎng)?、松緊要適宜傷口接觸面要無(wú)菌,包扎目的、材料,目的簡(jiǎn)易止血、保護(hù)傷口和固定。材料主要有繃帶、三角帶等，如無(wú)上述物品，可以用清潔的毛巾、圍巾、衣物替代，,,注意,包扎時(shí)力量以達(dá)到止血目的為準(zhǔn)。包扎過(guò)程中，如發(fā)現(xiàn)傷口有骨折端外露，切忌將骨折端還納，否則可導(dǎo)致深層感染。腹壁傷致腸管外露時(shí)，應(yīng)使用清潔的碗等物扣住外露腸管，達(dá)到保護(hù)目的，嚴(yán)禁將流出的腸管還納。,材料,三角巾等邊三角形有頂?shù)籽鼛饺墙硌辔彩饺墙砜噹в?005CM和6008CM兩種,,方法,頭部包扎有三角巾帽式包扎三角巾面具式包扎雙眼三角巾包扎頭部三角巾十字包扎,,三角巾帽式包扎,三角巾面具式包扎用于顏面外傷眼鼻處可開(kāi)窗,雙眼三角帶包扎用于雙眼外傷頭部三角帶十字包扎用于下頜耳部前額顳部外傷,頸部三角帶包扎頸部包扎用于頸部外傷有三角巾包扎繃帶包扎兩種,胸肩背腋下部包扎胸部三角巾包扎用于一側(cè)胸外傷背部三角巾包扎似胸部,胸背部包扎,側(cè)胸部三角巾包扎用于單側(cè)側(cè)胸壁外傷,側(cè)胸部三角巾包扎,肩部三角巾包扎用于一側(cè)肩部外傷,腋下部三角巾包扎用于一側(cè)腋下外傷,腹部包扎用于腹部及會(huì)陰部外傷,上下肢包扎關(guān)節(jié)8字包扎,手部腳部包扎三角帶和繃帶都可用,手部三角巾包扎,固定,針對(duì)骨折防止骨折移位而損傷血管神經(jīng)并不是骨折復(fù)位,操作要點(diǎn),動(dòng)作要輕固定要牢松緊要適宜要有襯墊,材料,木制夾板鋼絲夾板充氣夾板負(fù)壓氣墊塑料夾板其他頸圍等各種特殊固定架就地取材,方法,頭部固定胸部固定鎖骨骨折固定肋骨骨折固定（同胸部外傷包扎）,鎖骨骨折固定,四肢骨折固定,肱骨骨折固定,肘關(guān)節(jié)固定,尺橈骨骨折固定,,指骨骨折固定,股骨骨折固定,脛腓骨骨折固定,頸椎骨折固定,胸腰椎骨折固定,骨盆骨折固定,搬運(yùn),徒手搬運(yùn)器械搬運(yùn),攙扶,單人搬運(yùn)背馱注呼吸困難胸外傷不適用,徒手搬運(yùn)手托背扛,徒手搬運(yùn)雙人搭椅注雙人協(xié)調(diào)合作步調(diào)一致,徒手搬運(yùn)拉車(chē)式,,脊柱脊髓損傷搬運(yùn)注防止扭曲脊柱部,就地取材,四、毒蛇咬傷,毒蛇咬傷癥狀,出血性傷口灼痛530MIN,心跳加速,血壓下降,冒冷汗,昏迷,死亡神經(jīng)性傷口發(fā)腐數(shù)小時(shí)內(nèi),起水泡,頭痛,抽筋,視力模糊,呼吸困難,死亡,毒蛇VS無(wú)毒蛇,毒蛇VS無(wú)毒蛇,毒蛇,,毒蛇咬傷緊急處理,詳記蛇的特征，如打死蛇帶上阻止毒液吸收綁扎法傷肢制動(dòng)冰敷法促進(jìn)蛇毒排出及破壞嘴吸允（口腔無(wú)破潰，邊吸邊漱口）切開(kāi)排毒抑制蛇毒作用季德勝蛇藥片口服外用,毒蛇咬傷緊急處理,立即尋求醫(yī)療資源或撥打120,93,謝謝,

簡(jiǎn)介：醫(yī)學(xué)病毒學(xué),MEDICALVIROLOGY,病毒是如何發(fā)現(xiàn)的,1886年MAYER證實(shí)了煙草花葉病的傳染性1892年IWANOWASKI證實(shí)其病原是一種新的病原因子。1896年BEIGERINK給這種病原起拉丁名叫VIRUS。,,FIGLEAFOFTOBACCOANDEMOFTOBACCOMOSAICVIRUS,臨床病毒學(xué)現(xiàn)狀,發(fā)病率高，傳染性強(qiáng)；人類(lèi)部分腫瘤與病毒感染有關(guān)；某些病毒感染有致畸作用；其他一些疾病與病毒感染的關(guān)系；目前病毒感染的診療還相對(duì)滯后，部分尚缺乏有效疫苗；,病毒的概念,病毒（VIRUS）是一類(lèi)體積微小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，僅含一種類(lèi)型核酸，必須在活的敏感細(xì)胞內(nèi)才能生長(zhǎng)繁殖的非細(xì)胞型微生物。,第二十三章病毒的基本性狀,,第一節(jié)病毒的形態(tài)第二節(jié)病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成,VIRION完整性?感染性,（一）大小測(cè)量單位為納米NM，最大的痘苗病毒為300NM，最小的脊髓灰質(zhì)炎病毒為30NM準(zhǔn)確測(cè)量方法電鏡ELECTRONMICROSCOPE,EM,,病毒體,,FIGEMOFINFLUENZAVIRUSSCALEBAR100NM,FIG1THECOMPARATIVESIZESOFREPRESENTATIVEVIRUSES,?300NM,?20NM,（二）形態(tài),（三）病毒的結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成,1基本化學(xué)組成,核酸蛋白質(zhì),2病毒的結(jié)構(gòu),裸病毒,,核心（核酸）,外披蛋白質(zhì)衣殼,,包膜,核衣殼,,包膜病毒,NAKEDVIRUSES,NEUCLEOCAPSID,ENVELOPEDVIRUSES,GENERALSTRUCTUREOFAVIRION,衣殼組成殼粒CAPSOMERES,殼粒,,數(shù)目,排列,,螺旋對(duì)稱(chēng)型,20面體立體對(duì)稱(chēng)型,復(fù)合對(duì)稱(chēng)型,衣殼分為螺旋對(duì)稱(chēng)型、20面體立體對(duì)稱(chēng)型等,FIGAICOSAHEDRALSYMMETRYBHELICALSYMMETRY,FIGANICOSAHEDRALVIRUS,FIGAHELICALVIRUS,FIGEMOFCOMPLEXVIRUSESPOXVIRUSSCALEBAR100NM,包膜ENVELOPE糖脂,包膜子粒PEPLOMERE或刺突SPIKE,,3病毒核酸及功能,多樣性（1）核酸種類(lèi)DNA/RNA（2）形態(tài)分類(lèi)線形/環(huán)形；（3）單/雙；/；節(jié)段；（4）開(kāi)放讀碼框OPENREADINGFRAME,ORF間可有基因重疊。,不分節(jié)段（脊髓灰質(zhì)炎病毒）RNAV分節(jié)段（RNA腫瘤病毒）SSRNA不分節(jié)段（副黏病毒）RNAVRNAV分節(jié)段（正黏病毒）DSRNA±RNAV分節(jié)段（呼腸病毒）SSDNADNAAAVDNAVDSDNA±DNAHSV,,,,,,,FIGOVERLAPPINGREADINGFRAMES,RNA病毒基因組的極性（1）RNA病毒的基因組可直接充當(dāng)MRNA的稱(chēng)為‘POSITIVESTRANDED’（2）由新合成的RNA充當(dāng)MRNA的RNA病毒，其基因組稱(chēng)為‘NEGATIVESTRANDED’,,核酸的功能,遺傳物質(zhì)／復(fù)制／變異；感染性核酸；檢測(cè)的物質(zhì)基礎(chǔ)；研究生命物質(zhì)的模型；分子生物學(xué)工具；,4病毒蛋白質(zhì)及功能,分類(lèi)結(jié)構(gòu)蛋白衣殼、基質(zhì)或包膜等；非結(jié)構(gòu)蛋白調(diào)節(jié)蛋白、酶類(lèi)等；功能結(jié)構(gòu)蛋白衣殼保護(hù)作用；抗原性；受體配體；細(xì)胞毒性；非結(jié)構(gòu)蛋白復(fù)制有關(guān)酶類(lèi)；致病有關(guān)酶；調(diào)節(jié)蛋白等；部分可作檢測(cè)的靶點(diǎn)；,第三節(jié)病毒的增殖,VIRALMULTIPLICATION,一、病毒的復(fù)制周期（VIRALREPLICATIONCYCLE）,特點(diǎn)復(fù)制（自我復(fù)制SELFREPLICATION）病毒的復(fù)制周期（VIRALREPLICATIONCYCLE）病毒進(jìn)入敏感細(xì)胞后，以其基因組為模板，借助細(xì)胞中的原料、能量及場(chǎng)所合成自己的大分子（蛋白質(zhì)與核酸）以組裝子代病毒顆粒，最終按一定方式釋放出細(xì)胞。分為吸附和穿入、脫殼、生物合成、組裝成熟和釋放,吸附ABSORPTION,,?（受體－配體）,穿入PENETRATION,,,,融合ENVELOPEDVIRUSES,胞飲NAKEDVIRUSES,,脫殼UNCOATING,,?酶,生物合成BIOSYNTHESIS,,合成產(chǎn)物,,合成地點(diǎn),,,,裝配ASSEMBLY,,?場(chǎng)所,,釋放RELEASE,,裸病毒,殺細(xì)胞型,?,出芽型,?,（包膜病毒）,,FIGSCANNINGELECTRONMICROGRAPHOFVIRUSPARTICLESBUDDINGFROMTHECELLSURFACE,FIGTYPICALGROWTHCURVEOFAVIRUSCOMPAREDWITHTHATOFABACTERIUM,1吸附與穿入ABSORPTIONANDPENETRATION,吸附通過(guò)病毒的包膜或無(wú)包膜病毒表面的配體位點(diǎn)與細(xì)胞表面的特異受體結(jié)合而吸附，如脊髓灰質(zhì)炎病毒神經(jīng)系統(tǒng)，HIV病毒GP120TH（CD4）穿入包膜病毒包膜與宿主細(xì)胞膜融合無(wú)包膜病毒胞飲方式,2脫殼UNCOATING,病毒在細(xì)胞內(nèi)脫去衣殼后，核酸才可發(fā)揮指令作用，多數(shù)是在細(xì)胞的溶酶體酶作用下脫殼釋放出病毒基因組,3生物合成BIOSYNTHESIS,通過(guò)病毒基因組表達(dá)與復(fù)制來(lái)完成的，包括蛋白質(zhì)的合成與核酸的復(fù)制,此階段無(wú)完整病毒可見(jiàn)，也不能用血清學(xué)檢測(cè)出病毒的抗原，稱(chēng)為隱蔽期發(fā)生在病毒核酸復(fù)制之前的轉(zhuǎn)錄稱(chēng)為早期轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)物為早期MRNA，翻譯出早期蛋白；發(fā)生在病毒核酸復(fù)制開(kāi)始或之后的轉(zhuǎn)錄稱(chēng)為晚期轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)物為晚期MRNA，翻譯出晚期蛋白,早期蛋白EARLYPROTEIN是功能性蛋白質(zhì)，為病毒核酸復(fù)制提供酶類(lèi)，參與調(diào)節(jié)宿主細(xì)胞的自身代謝過(guò)程。晚期蛋白LATEPROTEIN主要是病毒的結(jié)構(gòu)蛋白，與病毒的形態(tài)構(gòu)成有關(guān)。,4裝配與釋放ASSEMBLYANDRELEASE,裝配部位可在核內(nèi)、胞質(zhì)內(nèi)、核膜、胞質(zhì)膜上無(wú)包膜病毒裝配成核衣殼即為成熟病毒體包膜病毒裝配成核衣殼后以出芽方式釋放，釋放時(shí)包有核膜或胞質(zhì)膜成為成熟病毒體,二、病毒實(shí)例1,DSDNAVHSV（１）DNA半保留復(fù)制；（２）根據(jù)病毒核酸復(fù)制時(shí)點(diǎn)將轉(zhuǎn)錄分為早期轉(zhuǎn)錄／晚期轉(zhuǎn)錄；,FIGREPLICATIONSTRATEGYOFADENOVIRUS,ADNAVIRUS,病毒實(shí)例2,SSRNAVPOLIOVIRUS（１）本身具有MRNA功能；（２）復(fù)制中間體（REPLICATIVEINTERMEDIATE,RI）；±RNA；（３）早、晚期轉(zhuǎn)錄時(shí)相似不明顯；多聚大蛋白；,FIGREPLICATIONSTRATEGYOFPOLIO,APOSITIVESTRANDEDRNAVIRUS,病毒實(shí)例3,RETROVIRUSHIV（１）逆轉(zhuǎn)錄酶；（２）復(fù)制中間體（REPLICATIVEINTERMEDIATE,RI）；RNADNA雜交體；（３）前病毒PROVIRUS；,三、病毒的異常增殖,宿主細(xì)胞方面的原因非容納細(xì)胞NONPERMISSIVECELLS頓挫感染ABORTIVEINFECTION病毒本身的原因缺陷病毒DEFECTIVEVIRUSES輔助病毒HELPERVIRUSES缺陷干擾顆粒DEFECTIVEINTERFERINGPARTICLE，DIP,四、病毒的干擾現(xiàn)象,當(dāng)兩種病毒同時(shí)感染同一細(xì)胞時(shí)，可發(fā)生一種病毒的增殖抑制另一種病毒增殖的現(xiàn)象INTERFERENCE；機(jī)制可能為受體的占據(jù)或細(xì)胞代謝途徑改變；干擾素（INTERFERON產(chǎn)生,,,第四節(jié)理化因素對(duì)病毒的影響,滅活（INACTIVATION）失去感染性；但仍可保留其抗原性、紅細(xì)胞吸附等生物學(xué)功能；物理因素TMPH射線；化學(xué)因素脂溶劑；化學(xué)消毒劑；抗生素等；,病毒的遺傳和變異,1．病毒變異的類(lèi)型遺傳型變異非遺傳型變異,,2病毒變異的機(jī)制,（１）遺傳型變異基因突變（GENEMUTATION）突變株（MUTANT）,,表現(xiàn)為宿主范圍、組織親嗜性、抗原成分、耐藥性、毒力等性狀改變；,Ⅰ自發(fā)突變SPONTANEOUSMUTATIONRNAV﹥DNAVⅡ誘發(fā)突變INDUCEDMUTATION理化方法；,條件致死性突變?nèi)鏣S突變株；高溫下TS變異株基因編碼的蛋白或酶失去功能；宿主范圍突變株HOSTRANGEMUTANT,HR改變了對(duì)細(xì)胞的吸附或相互作用街病毒→固定病毒；,耐藥突變株DRUGRESISTANTMUTANT病毒靶酶基因發(fā)生改變→耐藥；HIV→AZT變異株；基因重組GENETICRECOMBINATION形成兼有兩親代病毒特性的子代病毒；,基因重配GENETICREASSORTMENT,通過(guò)交換RNA節(jié)段而進(jìn)行的重組；,,（2）非遺傳型變異（基因產(chǎn)物的相互作用）Ⅰ互補(bǔ)作用；Ⅱ表型混合；,,第五節(jié)病毒的分類(lèi),分類(lèi)原則1核酸類(lèi)型與結(jié)構(gòu)2病毒體的形狀和大小3病毒體的形態(tài)結(jié)構(gòu)4對(duì)脂溶劑的敏感性現(xiàn)一般分為DNA病毒、RNA病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒三類(lèi)。,其他,非尋常病毒1衛(wèi)星病毒SATELLITES基因組為5002000個(gè)核苷酸的單鏈RNA2類(lèi)病毒VIROIDS基因組為200400個(gè)單鏈環(huán)狀RNA，有二級(jí)結(jié)構(gòu)，不含蛋白質(zhì)。3朊粒PRIONPROTEINACEOUSINFECTIONPARTICLES，蛋白侵染顆粒生物學(xué)地位待定。結(jié)構(gòu)僅由一種耐蛋白酶K的蛋白分子組成。,