氟化多肽嵌段共聚物的合成及其基因傳遞性能研究.pdf

1、基因治療已經(jīng)得到廣泛地關(guān)注與研究。基因治療通過將外源的正?；?qū)氚屑?xì)胞，來治療一系列因基因缺陷或異常而引起的疾病，比如遺傳性疾病、綜合性免疫缺陷癥和癌癥等。裸露的基因不能直接進(jìn)入靶細(xì)胞，因?yàn)樗鼤?huì)被生物體內(nèi)的核酸酶分解，所以尋求安全高效的基因傳遞載體是該領(lǐng)域科學(xué)研究中的關(guān)鍵問題。
　　陽離子聚合物因其安全性高并且設(shè)計(jì)靈活易于制備等優(yōu)點(diǎn)被廣泛地用作基因載體。陽離子聚合物可以通過靜電作用結(jié)合帶負(fù)電的基因形成復(fù)合物納米粒子并將其運(yùn)輸?shù)郊?xì)

2、胞內(nèi)。但是在人的生理環(huán)境下，由于血清蛋白和鹽的吸附作用，形成的復(fù)合物納米粒子容易聚集和降解，導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)染效率較低并引起較高的毒性，而且傳統(tǒng)的陽離子聚合物進(jìn)入細(xì)胞后會(huì)增加細(xì)胞內(nèi)的活性氧濃度使細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激，導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)染效率降低。因此設(shè)計(jì)合成具有良好生理穩(wěn)定性和生物相容性的基因傳遞系統(tǒng)尤為重要。
　　本論文設(shè)計(jì)合成了用聚乙二醇和全氟碳鏈修飾的生物還原性聚賴氨酸基因載體，并研究了其生理穩(wěn)定性和抗血清能力;還構(gòu)建了樹枝硫醚修飾的響應(yīng)性聚

3、乙烯亞胺基因載體，研究了其活性氧自清除效果和基因轉(zhuǎn)染能力。具體研究工作如下:
　　通過伯氨基引發(fā)氨基酸環(huán)內(nèi)酸酐(NCA)開環(huán)聚合合成了一種新的聚乙二醇-聚賴氨酸-聚半胱氨酸三嵌段共聚物，并且利用聚半胱氨酸側(cè)鏈的巰基通過二硫鍵交換反應(yīng)接枝部分全氟碳鏈。聚賴氨酸嵌段的氨基帶有正的電荷，能很好地與帶負(fù)電的基因結(jié)合（在N/P比為2的條件下即可完全結(jié)合）并形成復(fù)合物的核，聚乙二醇在復(fù)合物核外形成一種冠狀外殼增加了復(fù)合物的抗血清能力，并且全氟

4、碳鏈的引入增加了該聚合物與基因的復(fù)合物的細(xì)胞內(nèi)吞并且顯著提高了復(fù)合物的生理穩(wěn)定性。復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞后，在細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽的作用下，聚合物上的二硫鍵斷裂促進(jìn)了基因的釋放。研究表明此聚合物與基因的復(fù)合物有良好的生理穩(wěn)定性并且在50％的血清含量下仍然具有較高的基因轉(zhuǎn)染效率（293T細(xì)胞，35％），并且該聚合物細(xì)胞毒性較低并有良好的生物相容性。
　　還設(shè)計(jì)了用二硫鍵連接的支化聚乙烯亞胺和樹枝硫醚聚合物，該聚合物可以組裝成納米膠束，并且疏水的樹