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文檔簡(jiǎn)介
1、分子印跡技術(shù)是近年來(lái)迅速發(fā)展起來(lái)的一門結(jié)合高分子化學(xué)、化學(xué)工程、材料科學(xué)及生物化學(xué)的交叉學(xué)科技術(shù)。蛋白質(zhì)分子印跡技術(shù)是指在合成聚合物的材料中,以蛋白質(zhì)分子作為模板分子,形成對(duì)蛋白質(zhì)分子有特異性鍵合作用的聚合物。該材料在生物分離、生物傳感器、疾病診斷及藥物釋放等領(lǐng)域具有潛在應(yīng)用價(jià)值。由于蛋白質(zhì)本身體積龐大、結(jié)構(gòu)復(fù)雜的特點(diǎn)所致,蛋白質(zhì)分子印跡存在兩方面的問(wèn)題,首先是蛋白質(zhì)分子在交聯(lián)聚合物網(wǎng)絡(luò)中的傳質(zhì)阻力大;其次是不易形成精確的識(shí)別位點(diǎn),從而
2、導(dǎo)致了特異結(jié)合容量低、吸附動(dòng)力學(xué)慢以及吸附選擇性不令人滿意等結(jié)果。
針對(duì)以上問(wèn)題,本課題組采用了表面印跡和稀溶液中納米粒子的表面接枝共聚相結(jié)合的方法,在載體表面修飾功能基團(tuán)能夠和模板蛋白產(chǎn)生相互作用,稀溶液體系避免了反應(yīng)體系的凝膠化,以提高蛋白質(zhì)在交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)移動(dòng)速率;選擇了納米尺度的載體,既可以提高印跡聚合物的比表面積,又可以使印跡位點(diǎn)接近或位于聚合物表面,顯著提高了聚合物對(duì)模板蛋白的特異吸附容量。
本實(shí)驗(yàn)課題
3、繼續(xù)進(jìn)行深入的研究,旨在豐富并完善這種新型蛋白印跡方法。首先選擇單分散的、具有磁響應(yīng)性的Fe3O4@SiO2-COOH納米粒子作為在載體,選用丙烯酰胺(AAm)、甲基丙烯酸(MAA)和甲基丙烯酸二甲氨乙酯(DMAEMA)為功能單體,N,N'-亞甲基雙丙烯酰胺(MBA)為交聯(lián)劑,在單體濃度為0.4wt%下引發(fā)單體進(jìn)行自由基聚合反應(yīng),合成了高磁響應(yīng)溶菌酶(Lys)表面印跡納米粒子。反應(yīng)完成后,體系無(wú)明顯凝膠現(xiàn)象。VSM研究顯示了載體粒子較高
4、的飽和磁強(qiáng)度,具有較強(qiáng)的磁響應(yīng)性,將易于聚合物的分離。TG結(jié)果表明載體外面有薄層聚合物形成。吸附模板時(shí),印跡粒子仍然保持了5min即可達(dá)到平衡的速率。與其它三種等電點(diǎn)(pI)和分子量(Mw)不同的蛋白相比,Lys-MIP仍具有明顯的吸附選擇性。并且印跡納米粒子經(jīng)多次洗滌后,仍保持較好的穩(wěn)定性。
我們進(jìn)一步運(yùn)用上述印跡方法,以SiO2-NH2-COOH為載體材料,選用上述單體體系,調(diào)整單體間的摩爾比,研究了血紅表面(Hb)印
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