頭孢克肟與牛血清白蛋白相互作用及微生物活性測(cè)定中的熒光分析方法研究.pdf

1、本文研究了藥物小分子頭孢克肟與牛血清白蛋白的相互作用，并建立了環(huán)境樣品中微生物活性測(cè)定的熒光分析新方法。
　　論文第一部分簡(jiǎn)要介紹了蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能，血清白蛋白的組成、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、生理功能，并對(duì)藥物小分子與血清白蛋白相互作用的研究方法與研究?jī)?nèi)容做了詳細(xì)的論述。
　　論文第二部分利用熒光光譜、紫外-可見(jiàn)吸收光譜、圓二色光譜技術(shù)研究了頭孢克肟與牛血清白蛋白的相互作用。采用單因素輪換法優(yōu)化實(shí)驗(yàn)參數(shù)得到頭孢克肟與牛血清白蛋白相互作用

2、的最佳生理模擬條件。在這一條件下，測(cè)定光譜數(shù)據(jù)。根據(jù)所測(cè)得的光譜數(shù)據(jù)，分析了頭孢克肟對(duì)蛋白質(zhì)熒光的猝滅機(jī)制，并分別計(jì)算出在不同溫度下藥物與蛋白質(zhì)的結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)、熱力學(xué)參數(shù)。根據(jù)F(o)rster的非輻射能量轉(zhuǎn)移理論，求得了小分子和蛋白質(zhì)間的結(jié)合距離和能量轉(zhuǎn)移效率。根據(jù)計(jì)算的熱力學(xué)參數(shù)值，確定了結(jié)合力的類(lèi)型。依據(jù)紫外-可見(jiàn)吸收光譜、同步熒光光譜、三維熒光光譜和圓二色光譜分析了頭孢克肟對(duì)蛋白質(zhì)構(gòu)象的影響。
　　論文第三部分提出

3、了熒光光度法測(cè)定環(huán)境樣品中微生物活性的新方法。基于熒光素二乙酸酯(FDA)易被細(xì)菌及真菌中的非專(zhuān)一性酶（酯酶、蛋白酶、脂肪酶）催化水解為熒光素這一原理，采用丙酮作為終止劑，熒光光度計(jì)作為檢測(cè)器建立了測(cè)定環(huán)境樣品中微生物活性的新方法。通過(guò)物理和化學(xué)參數(shù)的優(yōu)化，提高了測(cè)定方法的靈敏度。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，方法的線性范圍和檢出限分別為2-2000μg/L(R=0.9971)和3.1×10-2μg/L;對(duì)同一土壤樣品平行測(cè)定五次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2