酸味補(bǔ)肝湯對小鼠心肌缺血再灌注損傷保護(hù)作用研究.pdf

1、近年來，我國人口老齡化逐步加劇，老年性疾病高發(fā)，嚴(yán)重危害國人健康的同時消耗巨大的醫(yī)療資源，成為影響國計民生的重大問題。其中缺血性心臟病尤為突出，發(fā)病率和致死率均逐年升高。近年發(fā)展起來的介入治療技術(shù)快速發(fā)展，但治療引起的心肌缺血再灌注損傷（I/R）仍會導(dǎo)致心肌頓抑、心率失常等嚴(yán)重后果。闡明缺血再灌注（I/R）致心肌損傷的確切分子機(jī)制，尋找到適宜的臨床干預(yù)措施對改善缺血性心臟病臨床治療預(yù)后具有重要的臨床價值。
　　本文參考文獻(xiàn)建立改良

2、的Langendorff離體心臟缺血再灌注（I/R）損傷模型，并對影響實驗的關(guān)鍵因素，包括小鼠性別、體重、左心室球囊大小、缺血時間等因素進(jìn)行考察，旨在建立規(guī)范穩(wěn)定的實驗?zāi)Ｐ汀１緦嶒灲?jīng)預(yù)實驗確定灌注穩(wěn)定時間為40 min，缺血時間為30 min，復(fù)灌時間60 min的實驗流程，通過記錄再灌注過程中的左心室發(fā)展壓（LVDP）、心率（HR）、左心室最大收縮速率（+dP/dt）、左心室最大舒張速率（﹣dP/dt）、左心室發(fā)展末壓（LVEDP）和

3、左心室作功（RPP=LVDP×HR）等心功能指標(biāo)，以考察小鼠離體心臟I/R損傷程度。實驗結(jié)果顯示不同性別小鼠在經(jīng)歷缺血再灌注后心功能無顯著性差異。左心室球囊是獲取心功能指標(biāo)的關(guān)鍵因素，研究結(jié)果顯示，采用150μL球囊獲取實驗數(shù)據(jù)，變異系數(shù)值明顯低于100μL球囊，表明150μL球囊更加適用于本實驗。選取20~25 g、25~30 g、30~35 g、35~40 g體重區(qū)間的小鼠，統(tǒng)計分析了復(fù)灌后左心室發(fā)展壓（LVDP）的恢復(fù)率，其結(jié)果分

4、別為52.19％±2.47、36.93%±2.18、37.25%±4.68、57.81%±4.03。在缺血前以0.5 mg/L硝苯地平預(yù)處理15 min，可明顯改善左心室發(fā)展壓（LVDP）、左心室最大收縮速率（+dP/dt）、左心室最大舒張速率（﹣dP/dt）、左心室發(fā)展末壓（LVEDP）和左心室作功（RPP=LVDP×HR）的恢復(fù)，表明建立改良的Langendorff離體心臟缺血再灌注（I/R）損傷模型是成功的，可以進(jìn)行先關(guān)藥物活性的

5、篩選。
　　采用Langendorff逆行恒壓灌流裝置，考察了補(bǔ)益肝氣臨床驗方酸味補(bǔ)肝湯水煎液對小鼠離體心臟缺血再灌注（I/R）損傷的保護(hù)作用。通過記錄再灌注過程中的左心室發(fā)展壓（LVDP）、心率（HR）、左心室最大收縮速率（+dP/dt）、左心室最大舒張速率（﹣dP/dt）、左心室發(fā)展末壓（LVEDP）和左心室作功（RPP=LVDP×HR）等心功能指標(biāo)，以考察受試藥物對小鼠離體心臟缺血I/R損傷的保護(hù)作用。結(jié)果表明， 

6、酸味補(bǔ)肝湯水煎液（0.75 g/L）預(yù)處理組缺血再灌注后左心室發(fā)展壓（LVDP）、左心室最大收縮速率（+dP/dt）、左心室最大舒張速率（﹣dP/dt）、左心室發(fā)展末壓（LVEDP）和左心室作功（RPP=LVDP×HR）恢復(fù)情況明顯優(yōu)于對照組。
　　為進(jìn)一步確定其藥理活性組分，將酸味補(bǔ)肝湯醇提液pH調(diào)至4.00和12.00過濾得到醇提堿酸沉物、醇提堿沉物，并運(yùn)用上述建立的方法考察其對缺血再灌注（I/R）損傷的抑制作用。實驗結(jié)果顯示

7、，醇提酸沉物預(yù)處理組與模型組相比左心室發(fā)展壓（LVDP）、左心室壓舒張速率（﹣dP/dt）、左心室發(fā)展末壓（LVEDP）和心室作功（RPP=LVDP×HR）具有顯著性差異，復(fù)灌后冠脈流出液LDH水平也顯著低于對照組。醇提堿沉物預(yù)處理組與對照組復(fù)灌后心功能各指標(biāo)及冠脈流出液LDH水平無顯著性差異。實驗表明酸味補(bǔ)肝湯醇提酸沉物可以改善缺血再灌注（I/R）后小鼠的心肌舒縮功能、增強(qiáng)心肌收縮力和抗心律失常，對其心肌缺血再灌注（I/R）損傷具有一