新型檢測重金屬汞、鉛離子的生物傳感器研究.pdf

1、重金屬在現(xiàn)代工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥等領(lǐng)域有著普遍的應(yīng)用。隨著科技的迅猛發(fā)展，重金屬的污染問題也越來越嚴(yán)重。重金屬不容易被降解，只能由一種形態(tài)轉(zhuǎn)化為另一種形態(tài)，最終在人體內(nèi)聚集，危害人類身體健康。因此，對環(huán)境和農(nóng)產(chǎn)品中的重金屬殘留進(jìn)行檢測是尤為重要的。本文對常見的重金屬汞、鉛離子，設(shè)計了幾種檢測的新方法，以滿足日常生活中對重金屬檢測的需求。工作重點(diǎn)主要涉及以下幾個方面：
　　1、基于T-Hg2+-T結(jié)構(gòu)的熒光傳感器特異性檢測汞離子

2、　　在第二章中，基于實(shí)時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-qPCR)技術(shù)與T-Hg2+-T特異性結(jié)合作用，提出了一個高靈敏度和高選擇性檢測汞離子的新方法。利用實(shí)時熒光定量PCR對于模板DNA的特異性擴(kuò)增產(chǎn)生的熒光信號作為檢測信號。該傳感體系Hg2+離子濃度在0.05nM到100nM范圍內(nèi)，Hg2+離子的濃度與Ct值有很好的線性關(guān)系，該方法Hg2+離子的檢測限為30pM。此方法還具有良好的選擇性，可以應(yīng)用于水溶液或其它樣品中Hg2+離子的檢測。

3、
　　2、基于GR-5 DNA酶的鉛離子檢測新方法
　　在第三章中，我們介紹一個檢測鉛離子的簡便方法，該方法是利用對鉛離子特異性識別的GR-5 DNA酶和實(shí)時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)實(shí)現(xiàn)對鉛離子的準(zhǔn)確檢測。在鉛離子存在的情況下，模板DNA將會被GR-5 DNA酶在核糖核苷酸處切斷，可用于PCR的模板DNA的數(shù)量也會降低，同時檢測結(jié)果Ct值也會發(fā)生改變。在1-500 nM范圍內(nèi)鉛離子的濃度與Ct值有很好的線性關(guān)系。標(biāo)準(zhǔn)曲線的相

4、關(guān)系數(shù)為0.99，檢測限是0.7nM。此外，該方法具有很好的選擇性。
　　3、基于核酸外切酶Ⅲ的熒光分析法超靈敏檢測汞離子
　　在第四章中，我們基于實(shí)時熒光定量PCR的指數(shù)式擴(kuò)增和定量效應(yīng)，結(jié)合核酸外切酶Ⅲ能夠剪切3'端閉合的雙鏈DNA，開發(fā)一種簡單、快速地檢測汞離子的新型生物傳感器，檢測水中的汞離子的含量。在汞離子存在的情況下，模板DNA與互補(bǔ)DNA會通過T-Hg2+-T特異性結(jié)合作用形成3'端閉合的雙鏈DNA，在核酸外切