青霉菌penicilliumsp.gxcr1有毒重金屬鹽的抗性及其遺傳轉(zhuǎn)化體系的研究

1、廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文青霉菌Penicillium sp.GXCR1有毒重金屬鹽的抗性及其遺傳轉(zhuǎn)化體系的研究姓名：韋明肯申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：李有志2003.6.1T H E S T U D Y O N R E S I S T A N C E O F P e n i c i l l i u m s p ．G X C R I T O T O X I CH E A V Y M E T A L S A N D I T S S

2、 Y S T E M O F G E N E T I C T R A N S F O R M A T I O NA B S T R A C TA s t r a i no f P e n i c i l l i u ms p ．G X C R lw a si s o l a t e df r o mw a s t es l u d g eo u to f t h ee f f l u e n tc h a n n e l i nt h

3、em i n i n g a r e a ．T h eG X C R I h a s v e r y h i g hc o p p e r r e s i s t a n c e ，a n dw a ss u s c e p t i b l e t o t h e B e n o m y l ．n l en u c l e o t i d e s e q u e n c e s o fI T SD N A o ft h eG X C R

4、 Is h a r e di r l o r o t h a n9 5 ％h o m o l o g yw i t h1 0 2s t r a i n so f P ．s p p ．I t so p t i m u mg r o w t h t e m p e r a t u r e w a s a t3 2 ℃．a(chǎn) n d t h eo p t i m u m g r o w t h p H w a s a tp H 5 ．O n t

5、 l l eP D A m e d i u m ，t h el e v e lo f C u 2 + r e s i s t a n c eo f t h eG X C R lw a s2 0 0 m M ，a n d e v e n u p t o 8 0 0 m M i f i n t h e p r e s e n c e o f 5 m M M n 2 + ．I nt h el i q u i dm e d i u mP D B

6、 w i t ht h ea d d e di n d i v i d u a lm e t a ls a l t ，t h em i n i m a lc o n c e n t r a t i o no ft h e i n d i v i d u a lh e a v ym e t a li n h i b i t i n g t h eG X C R lg r o w t hW a s >2 0 0 m M c u 2 +

7、 ，> 1 2 0 0 m Mz d + , > 5 0 0 r a mA 1 3 + a n d 6 0 m M C r 3 + ，1 0 m MC d 2 + ．1 0 m MP b ”，1 0 m M N i 2 + a n d3 m M C r 6 + r e s p e c t i v e l y ；I tc o u l d g r o w t h w e l li nl i q u i dm e d i u mP

8、 D B w i t h o n e o f t h e f o l l o w i n g h e a v y m e t a l c o m b i n a t i o n s ：4 0 m M C u 2 + 、2 0 0 m M Z n 2 +a n dl m M C d 2 + ，4 0 m M C u 2 + 、1 0 0 m M Z n 2 + a n d 3 m M P b 2 + ，O r2 0 0 r a M Z n

9、 2 + 、3 m M C d 2 +a n d 3 m M p b 2 + ．T h eb i o s o r p t i o nc a p a c i t yo fh e a v ym e t a l so f t h eG X C R lw a su pt o 2 6 ．1 9 m gC u Z + ／gD W a n d2 5 8 ．3 m g Z n Z + ／gD W r e s p e c t i v e l y ．T h

10、 eq u a n t i t yo f t oC u 2 + a n dz n 2 +b i o s s o r p t i o no f t h e m y c e l i u m s u r f a c e sW a S m u c h l a r g e r t h a n t h a to f b o t h a c c u m u l a t i o ni n s i d et h ec e l l so f m y c e

11、 l i a ．T h eb i o s o r p t i o no f m y c e l i a p r e t r e a t e dw i t h0 ．2 MN a O HW a su p t o7 6 ．9 m gC ∥+ ／gD W ．1 1 l eC U 2 + b i o s o r p t i o nq u a n t i t yo f m y c e l i aW a sm u c hl a r g e rt h

12、a n t h a to f Z n z + b i o s o r p t i o n w h e n u n d e r c o e x s i s t a n c eo f b o t h m e t a l s a l t s ．T h eo p t i m u mm y c e l i a la g ef o rp r e p a r a t i o no f p r o t o p l a s tW a s a t2 4 h

13、t i m e - p o i n ta f t e r i n o c u l a t i o n a n d c u l t u r eo f e o n i d i a ．T h er a t eo f t h e p r e p a r e d p m t o p l a s t W a s 3 ，2 ×1 0 。／m 1 ．T h e r e p r o d u c t i o nr a t eo f t h e p

14、 r e p a r e d p r o t o p l a s t w a s u p t o3 1 ％．E f f i c i e n c yo fp r o t o p l a s t t r a i l s f o r m a t i o n w i t h t h e p l a s m i d W a s 0 ．3t r a n s f o r m a n t s ／u g D N A ．A s t r a i no f t

15、 h em u t a n tM G X C R l w i t ha m u c h 】o w e r 】e v e lo f C u r e s i s t a n c ew a ss e l e c t e db y u l t r a v i o l e tm u t a g e n e s i s f r o m t h ew i l d t y p es t r a i nG X C R l ．K e y w o r d ：