大鼠同源fasl39;sertoli細胞嵌合移植肝臟免疫豁免的研究

1、第一軍醫(yī)大學博士學位論文大鼠同源FasLSertoli細胞嵌合移植肝臟免疫豁免的研究姓名：孟安啟申請學位級別：博士專業(yè)：泌尿外科學（器官移植學）指導教師：于立新20060516中文摘要盼藍染色對活S e r t o l i 細胞進行記數鑒定，判斷睪丸S e r t o l i 細胞的活性、純度及單只大鼠獲取S e r t o l i 細胞的量。②細胞毒實驗、F a s 阻斷試驗及F a s L —m A b封閉試驗：分離培養(yǎng)4 8 h

2、后的睪丸支持細胞與活化的淋巴細胞共同培養(yǎng)，M T T 法檢測其對淋巴細胞的殺傷作用及對淋巴細胞發(fā)揮最大作用時的濃度和時效性；應用F a s I g G 抗體阻斷試驗和F a s L - m A b 封閉試驗評價睪丸支持細胞殺傷活化的淋巴細胞與F a s ／F a s L 系統(tǒng)之間的關系。二、F a s L + S e r t o l i 細胞對原位肝臟組織中F a s ／F a s L 表達的影響4 0 只S D 雌性大鼠隨機分為5 組

3、，每組8 只。在無菌手術操作下開腹直視經門靜脈注入卜2 m l S e r t o l i 細胞，A 組：睪丸S e r t o l i 細胞1 ×1 0 6 ／m l ；B 組：睪丸S e r t o l i 細胞2 ×1 0 5 ／m l ：C 組：S e r t o l i 細胞1 X 1 0 7 ／m l ；D 組：S c r t o l i 細胞2 ×1 0 7 ／m 1 ；E 組( 對照組) ：

4、僅注射生理鹽水。1 4 天后取肝臟組織運用免疫組化法及半定量R T - P C R ( Q R T —P C R ) 法，檢測肝臟內嵌合S e r t o l i 細胞數及嵌合前后肝臟組織F a s L m R N A 含量變化。三、改良“二袖套”法大鼠原位肝臟移植模型的建立“二袖套”法在K a m a d a 吻合血管基礎上改良。供肝分別經腹主動脈和門靜脈雙重全肝臟灌注；受體肝臟分步切除，肝上下腔靜脈采用縫合法吻合，門靜脈和肝下下腔靜

5、脈分別用袖套法吻合。移植肝臟動脈重建采用單純血管套入式吻合法，膽總管采用單管內支架膽管端端吻合法。共實施大鼠原位肝臟移植2 0 2例，觀察術后并發(fā)癥及存活率并記錄異基因移植組自然存活時間。其中同基因組為S D - - S D ，異基因組為S D —W i s t a r ，預實驗1 2 6 例，正式實驗7 6 例。四、同源F a s L + S e r t o l i 細胞誘導大鼠移植肝臟免疫耐受的研究以S D 大鼠到W i s t a