gas對(duì)巨噬細(xì)胞株raw264.7功能的影響

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文GAS對(duì)巨噬細(xì)胞株RAW264.7功能的影響姓名：胡光磊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：魏林20090301中文摘要2 以低菌量、中等菌量和高菌量G A S 刺激細(xì)胞9 0 m i n 時(shí)，通過(guò)透射電子顯微鏡觀察R A W 2 6 4 ．7 超微結(jié)構(gòu)的變化，利用T U N E L 和A N N E X I NV - F I T C 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。3 分別用G A S 、大腸桿菌和金黃

2、色葡萄球菌以M O I 為5 ：1 時(shí)刺激巨噬細(xì)胞9 0 m i n ，作用完畢繼續(xù)培養(yǎng)三天，行流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)R A W 2 6 4 ．7 細(xì)胞表面C D 8 0 、C D 8 6 、M H C ．I I 的表達(dá)情況；應(yīng)用R e a l ．t i m e ．P C R 檢測(cè)不同刺激組R A W 2 6 4 ．7 細(xì)胞的I L ．1 、I L ．6 、I L ．2 3 、T N F ．Q 、T G F ．B 等炎性細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)錄水平變化，

3、并通過(guò)E L I S A 檢測(cè)刺激后細(xì)胞分泌I L ．6 的變化。4R e a l ．t i m e —P C R 法檢測(cè)低菌量G A S 束I J 激小鼠三天后，腹腔巨噬細(xì)胞及脾臟表達(dá)I L ．1 、I L ．6 、I L ．2 3 、T N F ．Q 、T G F ．1 3 的變化。結(jié)果：1M T T 結(jié)果顯示，低、中菌量G A S 對(duì)R A W 2 6 4 ．7 細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用，高菌量G A S 對(duì)細(xì)胞增殖有抑制作用。2 通過(guò)

4、透射電子顯微鏡觀察：低菌量細(xì)菌刺激細(xì)胞時(shí)，R A W 2 6 4 ．7 細(xì)胞的細(xì)胞器發(fā)達(dá)，功能旺盛，線粒體水腫，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)變粗糙；中劑量刺激時(shí)，細(xì)胞器發(fā)達(dá)，有髓樣溶酶體結(jié)構(gòu)，提示細(xì)胞吞噬消化細(xì)菌不完全；高菌量刺激細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞出現(xiàn)空泡，核膜不完整等細(xì)胞壞死表象。3T U N E L 法和A N N E X I N V ．F I T C 法結(jié)果均顯示：高菌量刺激R A W 2 6 4 ．7 時(shí)，細(xì)胞數(shù)減少是由于細(xì)胞壞死而不是凋亡。4 半定量