大腦皮質(zhì)發(fā)育過程中線粒體動力學(xué)相關(guān)蛋白的表達(dá).pdf

1、線粒體動力學(xué)即線粒體不斷進(jìn)行分裂和融合的動態(tài)過程，其主要受兩類蛋白即線粒體融合蛋白和線粒體分裂蛋白進(jìn)行調(diào)控。線粒體分裂融合的動態(tài)平衡是維持細(xì)胞功能，促使機體正常運轉(zhuǎn)的關(guān)鍵，近年研究發(fā)現(xiàn)線粒體動力學(xué)異?？梢鹛囟ㄉ窠?jīng)元凋亡，導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)性疾病如阿爾茨海默病、亨廷頓病等。目前對線粒體動力學(xué)異常與疾病的研究較多，但對中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中線粒體動力學(xué)如何變化并不清楚，限制了對神經(jīng)系統(tǒng)疾病詳細(xì)機制的進(jìn)一步闡釋。本研究以中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中

2、的神經(jīng)元為研究靶細(xì)胞，運用免疫熒光技術(shù)和蛋白半定量分析，觀察大腦皮質(zhì)發(fā)育過程中線粒體動力學(xué)相關(guān)蛋白的表達(dá)，進(jìn)而推測線粒體動力學(xué)與中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元發(fā)育的關(guān)系。
　　目的：探討線粒體動力學(xué)相關(guān)蛋白在大腦皮質(zhì)發(fā)育過程中的表達(dá)情況。
　　方法：以C57BL/6J野生型小鼠為研究對象，選取60只E18（胚胎18d）、P0（出生當(dāng)天）、P7、P14、P21、P30六個年齡點小鼠并取其大腦，進(jìn)行免疫熒光和Western blot蛋白半定

3、量實驗，觀察大腦皮質(zhì)和海馬CA1區(qū)動力相關(guān)蛋白1（dynamin-related protein1,Drp1）、線粒體分裂蛋1（fission1 protein,Fis1）線粒體融合蛋白2（mitofusin-2,Mfn2）和視神經(jīng)萎縮蛋白1（optic atrophy1,Opa1）的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：①小鼠P14時Fis1、Drp1、Mfn2、Opa1陽性細(xì)胞數(shù)和蛋白表達(dá)量最高（P＜0.01，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義），P0-P1

4、4發(fā)育階段是小鼠大腦皮層和海馬區(qū)陽性細(xì)胞數(shù)和蛋白表達(dá)量增長最快的年齡段（P＜0.01，差異尤其明顯具有統(tǒng)計學(xué)意義），P30出現(xiàn)下降趨勢（P＜0.05，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義）。②小鼠發(fā)育的不同階段，Drp1在不同大腦皮層中的表達(dá)存在差異，P0、P7尤其是在P7時在大腦皮質(zhì)板的Ⅵ表達(dá)量明顯高于其他層，P14、P21時皮質(zhì)板的Ⅴ層表達(dá)量較高，P30時各皮層的表達(dá)量基本一致。
　　結(jié)論：①線粒體動力學(xué)相關(guān)蛋白在大腦皮層發(fā)育過程中表達(dá)呈先升高