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1、內(nèi)生真菌多樣性研究現(xiàn)狀綜述內(nèi)生真菌多樣性研究現(xiàn)狀綜述魏潔摘要:摘要:隨著研究的發(fā)現(xiàn),內(nèi)生真菌的在自然界的作用被越來越重要。本文章主要分析了內(nèi)生真菌生物多樣性的現(xiàn)狀、內(nèi)生真菌多樣性檢測(cè)技術(shù)和方法及其影響因素分析。從植物內(nèi)生真菌物種多樣性與產(chǎn)生生物活性物質(zhì)多樣性等方面總結(jié)近年最新的研究進(jìn)展提出了現(xiàn)階段植物內(nèi)生真菌及活性物質(zhì)研究的存在的問題及其未來發(fā)展方向。關(guān)鍵詞:關(guān)鍵詞:內(nèi)生真菌;多樣性;研究技術(shù);影響因素;展望Researchofendo
2、phyticfungidiversityAbstract:Withthefindingsofthestudyendophyticfungiareanincreasinglyimptantroleinnature.Thisarticlemainlyanalyzesthestatusquoofendophyticfungibiodiversitythedetectiontechniquesmethodsofendophyticfungidi
3、versityitsinfluencingfacts.FromthelatestEndophyticfungalspeciesdiversityproducebiologicallyactivesubstancesdiversitysummarizesresearchprogressinrecentyearswedishthestageofplantendophyticfungiactivesubstancesresearchprobl
4、emstheirfuturedevelopmentdirection.Keywds:endophyticfungidiversityresearchtechniquesinfluencingfactsprospect1.引言真菌是吸收異養(yǎng)型的真核生物,種類繁多的植物內(nèi)生真菌是一大類尚未被充分認(rèn)識(shí)的真菌。隨著近二十年來的研究的發(fā)現(xiàn)內(nèi)生真菌具有重要的生態(tài)學(xué)意義和經(jīng)濟(jì)意義,其物種多樣性也是非常豐富的。內(nèi)生真菌(內(nèi)生菌)(Fungalendop
5、hyte)[1]是指一類在其部分或全部生活史中存活于健康植物組織內(nèi)部而不使宿主植物表現(xiàn)出明顯感染癥狀的微生物。在植物體特殊環(huán)境中,內(nèi)生真菌與寄主之間協(xié)同進(jìn)化,在生活演變過程中形成一種互利共生的關(guān)系。內(nèi)生真菌可以促進(jìn)植物的生長(zhǎng)發(fā)育[2]提高宿主植物的抗逆性[3]。近年來由于內(nèi)生真菌的次生代謝物在病蟲害的生物防治、醫(yī)藥工業(yè)上的用途和范圍逐漸增大因此有關(guān)內(nèi)生真菌的研究逐漸受到重視[4]。內(nèi)生真菌由于其物種豐富數(shù)量龐大而且與其它生物之間具有緊密
6、的生態(tài)關(guān)系使其成為天然活性物質(zhì)的豐富來源因而引起人們的廣泛關(guān)注成為目前國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)之一.2研究現(xiàn)狀近年來對(duì)內(nèi)生菌的研究逐漸進(jìn)入了一個(gè)新的階段,內(nèi)生真菌的研究日益受到了全球性的廣泛關(guān)注,在其侵入機(jī)制每年有數(shù)百篇論文報(bào)道新發(fā)現(xiàn)的內(nèi)生菌。從內(nèi)生真菌尋找活性成分日益成為研究的熱點(diǎn)。2.1植物內(nèi)生真菌的生物多樣性道,如何佳等[7]植物內(nèi)生真菌分離方法的研究,及陳立軍等[8]油菜內(nèi)生真菌的分離鑒定等。培養(yǎng)基是分離過程中必不可少的組成部分。隨著研
7、究發(fā)展,培養(yǎng)基的種類越來越繁多?,F(xiàn)在培養(yǎng)基主要分固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的選擇直接關(guān)系到接種真菌的生長(zhǎng)發(fā)育?,F(xiàn)階段實(shí)驗(yàn)班室最常用的選擇培養(yǎng)基有牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基等。無菌技術(shù)也是分離培養(yǎng)過程中重要技術(shù)之一,只要是確保研究結(jié)果的準(zhǔn)確性及科學(xué)性。近幾年無菌技術(shù)發(fā)展迅速,主要是無菌室的設(shè)備不斷提高。滅菌技術(shù)主要有高溫滅菌、輻射滅菌、過濾除菌、高滲除菌。3.2內(nèi)生真菌的鑒定真菌的分類也和其它生物一樣繁亂復(fù)雜。曾應(yīng)用過的真菌分類
8、系統(tǒng)就有DeBary系統(tǒng)、Gaumann系統(tǒng)、Martin系統(tǒng)、Whittaker系統(tǒng)、Ainswth系統(tǒng)、Alcxopnlos系統(tǒng)等多個(gè)各系統(tǒng)設(shè)置的基本出發(fā)點(diǎn)和依據(jù)各有特色難以統(tǒng)一。如何建立一個(gè)符合客觀實(shí)際的自然分類系統(tǒng)是關(guān)系到人們對(duì)真菌的正確認(rèn)識(shí)、歸類定秩、鑒定、命名以及指導(dǎo)開發(fā)利用、控制感染等一系列問題。現(xiàn)階段主要是通過形態(tài)觀察法進(jìn)行鑒定,即依據(jù)菌落的形態(tài)特征孢子的形態(tài)結(jié)構(gòu)和產(chǎn)孢方式進(jìn)行鑒定[9]。觀察菌落的大小、形態(tài)、顏色、光澤
9、、透明度、質(zhì)地、隆起、邊緣特征以及運(yùn)動(dòng)性,根據(jù)菌株的菌絲體和孢子的形態(tài)特征,對(duì)照真菌鑒定手冊(cè)進(jìn)行初步鑒定。如果單純依靠形態(tài)學(xué)、生理生化、抗原構(gòu)造等特征事實(shí)上這些也正是傳統(tǒng)真菌分類學(xué)指標(biāo)則常會(huì)得出似是而非的結(jié)果因?yàn)榻z狀真菌的個(gè)體多態(tài)性相當(dāng)明顯圖。這也是絲狀真菌分類混亂和復(fù)雜的關(guān)鍵所在。近年來多門新興學(xué)科和技術(shù)的發(fā)展尤其是分子生物學(xué)技術(shù)的興起為真菌分類學(xué)發(fā)展提供了很好的機(jī)遇。一些已經(jīng)或即將用于真菌分類研究的分子生物學(xué)技術(shù)指標(biāo)日漸顯示出重要的
10、分類學(xué)潛能[10]。但近年主要還是通過形態(tài)觀察法進(jìn)行鑒定。3.3內(nèi)生真菌抗菌活性的鑒定真菌抗菌活性鑒定是對(duì)真菌種別進(jìn)行深一步鑒別,是對(duì)其次級(jí)產(chǎn)物的抑菌活性進(jìn)行研究,意在篩選出能產(chǎn)生抗菌活性物質(zhì)的內(nèi)生真菌。目前,抗菌活性的鑒定研究取得了可惜的成果:何佳等[8]微量稀釋法篩選金錢松內(nèi)生真菌抗菌活性的研究、趙江林等[11]TLC生物自顯影MTT法檢測(cè)滇重樓內(nèi)生真菌中抗菌活性成分的研究等。4內(nèi)生真菌的影響因素植物與內(nèi)生真菌的關(guān)系為互惠共生一方面
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