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文檔簡介
1、肝功能檢驗,,,黃疸,,,皮膚蜘蛛痣 (skin spider) 肝掌 (liver palms)面部色素沉著 ( face pigmentation),肝功能受損:,,腹水,肝病面容,,本章內(nèi)容概要:,第一節(jié) 肝功能概述第二節(jié) 常用肝功能實驗第三節(jié) 常見肝膽疾病生化指標變化第四節(jié) 病例討論,,掌握 肝功能試驗的意義及評價,賴氏法、速率法測定ALT
2、,改良J-G法和膽紅素氧化酶法測定膽紅素的原理、注意事項及主要臨床意義。熟悉 速率法測定ALP,GGT測定方法、注意事項及主要臨床意義。了解 肝臟的結(jié)構(gòu)特點及生物化學(xué)功能,某些肝病的生物化學(xué)。,本章教學(xué)要求:,,第一節(jié) 概 述,肝臟的結(jié)構(gòu)特點肝臟的生物化學(xué)功能肝臟疾病的代謝紊亂肝功能試驗的分類,,,,一、肝臟結(jié)構(gòu),(一 )解剖學(xué)特點,雙重血液供應(yīng),,腹主動脈的分技肝動脈,氧,門靜脈,營養(yǎng),,,雙重輸出管
3、道,肝靜脈,代謝降解物,下腔靜脈,膽道系統(tǒng),脂溶性物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物,體外,,,,,(二)肝細胞的亞細胞結(jié)構(gòu)特點,(三)肝細胞的再生,新生肝細胞的來源①由已分化的肝細胞增殖而來②由未分化的小葉內(nèi)膽管上皮細胞分裂而來,①細胞表面有大量的微絨毛②細胞膜具有較高的通透性③肝細胞中亞細胞結(jié)構(gòu)豐富④肝細胞含有豐富的酶系,,二、肝臟的生物化學(xué)功能,排泄功能物質(zhì)代謝功能生物轉(zhuǎn)化,,重要生化功能,,三、肝膽疾病的代謝紊亂,(一)蛋白質(zhì)代
4、謝異常急性肝損害時,血漿蛋白質(zhì)濃度變化不大;慢性肝病時 ----血漿清蛋白降低,γ-球蛋白升高,出現(xiàn)清蛋 白與球蛋白(A/G)的比值降低,甚至倒置。 ----血漿尿素水平呈低值。 ----血氨增高。 ----支鏈氨基酸和芳香族氨基酸的比值下降。,12,,磷酸戊糖途徑和糖酵解途徑相對增強,血中丙酮酸含量可顯著上升嚴重肝病時糖有氧氧化及三羧酸循環(huán)運轉(zhuǎn)失常
5、血糖濃度難以維持正常水平糖耐糖曲線異常,可呈低平型、高峰型、高坡型等異常曲線 血清半乳糖濃度增高,(二)糖代謝異常,13,,(三)脂類代謝異常,脂類消化吸收不良 肝內(nèi)脂肪氧化分解降低或脂肪合成增多或磷脂合成障 礙,不能有效合成脂蛋白輸出,脂肪在肝細胞內(nèi)沉積 而形成脂肪肝糖代謝異常,脂肪動員增加,導(dǎo)致酮血癥血漿膽固醇酯/膽固醇的比值下降血漿脂蛋白電泳譜異常,出現(xiàn)低密度脂蛋白(LDL) 積累
6、可出現(xiàn)異常的脂蛋白X(Lp-X),14,,(四)膽紅素代謝紊亂,1.膽紅素(bilirubin)來源與生成體內(nèi)的鐵卟啉化合物——血紅蛋白、肌紅蛋白、細胞色素、過氧化氫酶及過氧化物酶。,膽紅素來源,,1)衰老的RBC破壞、降解,2)無效紅細胞生成,3)非血紅蛋白的血紅素蛋白質(zhì)(細胞色素、過氧化物酶、肌紅蛋白等)分解,,主流膽紅素(80%),,分流膽紅素(20%),15,,衰老的RBC,網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng),,肝、脾、骨髓(微粒體、胞液),H
7、b,珠蛋白,,血紅素,氨基酸,,膽綠素,CO和鐵,,,血紅素加單氧酶,O2、NADPH,膽紅素Ⅸa,,膽綠素還原酶,膽紅素的性質(zhì): 親脂疏水,對大腦具有毒性作用,16,,2.膽紅素轉(zhuǎn)運,,膽紅素-清蛋白復(fù)合體(主要),膽紅素- α1-球蛋白(少部分),運輸形式,競爭結(jié)合劑---如磺胺藥,水楊酸,膽汁酸等,,,意義,增加膽紅素在血漿中的溶解度,便于運輸。,限制膽紅素自由通過生物膜產(chǎn)生毒性作用,17,,3.
8、膽紅素在肝細胞內(nèi)轉(zhuǎn)變,,1)攝取---膽紅素可以自由雙向通透肝血竇肝細胞膜表面 進入肝細胞。,肝細胞攝取膽紅素的有效性取決于,,肝細胞膜上特異的載體蛋白,肝細胞內(nèi)兩種受體蛋白---Y蛋白和Z蛋白,以“膽紅素-Y蛋白”(膽紅素-Z蛋白)形式送至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。這是一個耗能的可逆的過程。,肝內(nèi)運輸,,18,,2)轉(zhuǎn)化,部位:滑面內(nèi)網(wǎng)質(zhì)反應(yīng):結(jié)合反應(yīng)(主要結(jié)合物為UDPGA)酶: 葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶。產(chǎn)物:主要為雙葡萄糖
9、醛酸膽紅素,另有少量單葡萄 糖醛酸膽紅素、硫酸膽紅素,統(tǒng)稱為結(jié)合膽紅素。目的:既有利于膽紅素隨膽汁排泄,又限制其通過生 物膜而起到解毒作用。,19,,3)排泄,結(jié)合膽紅素通過毛細膽管膜上的主動轉(zhuǎn)運載體,從肝細胞毛細膽管排泄入膽汁中,再隨膽汁排入腸道。轉(zhuǎn)運形式:逆濃度梯度的能量依賴的主動轉(zhuǎn)運過程。,20,,結(jié)合膽紅素與未結(jié)合膽紅素的區(qū)別,未結(jié)合膽紅素,結(jié)合膽紅素,別 名,間接膽紅素,直接膽紅
10、素,與葡萄糖醛酸結(jié)合,未結(jié)合,結(jié)合,與重氮試劑反應(yīng),慢或間接反應(yīng),迅速、直接反應(yīng),溶解度,小,大,經(jīng)腎隨尿排出,不能,能,細胞毒作用,大,無,,,21,,4.膽紅素在腸管中的變化及其腸肝循環(huán),結(jié)合膽紅素,膽素原,,β-葡萄糖醛酸苷酶,,葡萄糖醛酸,,還原,膽素,,氧化,﹡膽素原:中膽素原,糞膽素原,d -尿膽素原,﹡膽 素:i -尿膽素,糞膽素, d -尿膽素,游離膽紅素,22,,膽素原的腸肝循環(huán),膽素原腸肝循環(huán)的概念腸道中有少量的
11、膽素原可被腸粘膜細胞重吸收,經(jīng)門靜脈入肝,其中大部分再隨膽汁排入腸道,形成膽素原的腸肝循環(huán)(bilinogen enterohepatic circulation)。,23,,膽素原腸肝循環(huán)的過程,(10% ~ 20%),2% ~ 5%,24,,5. 膽紅素代謝紊亂與黃疸,1) 黃疸的概念: 凡能引起膽紅素生成過多、或肝細胞對膽紅素的攝取、結(jié)合和排泄過程發(fā)生障礙等因素均可使血中膽紅素增高,而出現(xiàn)高膽紅素血癥(hyper
12、bilirubinemia)。膽紅素是金黃色色素,當血清中濃度高時,則可擴散入組織,組織被染黃,稱為黃疸(jaundice) 。隱性黃疸:< 34.2 ?mol/L,外觀看不出。顯性黃疸:≥34.2 ?mol/L,有黃染的現(xiàn)象。,25,,2) 黃疸的類型,根據(jù)肉眼可否見到黃染現(xiàn)象分為: ---顯性黃疸和隱性黃疸。根據(jù)發(fā)病原因可分為: ---溶血性、肝細胞性和梗阻性黃疸。根據(jù)病變部位可分為:
13、 ---肝前性、肝性和肝后性黃疸。根據(jù)血中升高的膽紅素的類型分為: ---高未結(jié)合膽紅素性黃疸及高結(jié)合膽紅素性黃疸。,26,,3)黃疸的成因與發(fā)生機制,膽紅素形成過多肝細胞處理膽紅素的能力下降 膽紅素在肝外的排泄障礙,27,,(1)膽紅素形成過多---溶血性黃疸,成因溶血性:先天性的紅細胞膜、血型 不合輸血、脾亢等溶血。非溶血性 :如惡性貧血、珠蛋白生 成障礙等無效造血。,28,,代謝特點
14、血中未結(jié)合膽紅素含量增高;總膽紅素升高,結(jié)合膽 紅素僅為總膽紅素的20%。未結(jié)合膽紅素不能由腎小球濾過,故尿中無膽紅素排 出。 肝最大限度地處理和排泄膽紅素,因而腸道中形成的 膽素原增多,糞便排出的膽素原也增多,糞便顏色加 深。 尿中排出的膽素原也相應(yīng)增加,膽紅素陰性。 ------高未結(jié)合膽紅素血癥,29,,成因膽紅素攝取障礙 膽紅素結(jié)合
15、障礙 膽紅素轉(zhuǎn)運障礙膽紅素排泄障礙,(2)肝細胞處理能力下降--肝細胞性黃疸,臨床上可見于新生兒生理性黃疸,肝內(nèi)膽汁淤滯、感染、化學(xué)試劑、毒物、腫瘤等導(dǎo)致的肝病以及先天性遺傳缺陷如Gilbert綜合征、Crigler-Najjar綜合征等。,30,,代謝特點血中兩種膽紅素含量都增高??偰懠t素升高,結(jié)合膽 紅素占總膽紅素的35%以上。結(jié)合膽紅素可由腎小球濾過,尿中出現(xiàn)膽紅素。 結(jié)合膽紅素在肝內(nèi)生成減少,糞便顏色變淺
16、。 尿中膽素原含量變化不定。一方面是從腸吸收的膽素原 不能有效地隨膽汁排出,使血中膽素原增加,尿中膽 素原增加;另一方面是肝實質(zhì)性損傷及炎癥、腫脹等 造成肝、膽管阻塞,結(jié)合膽紅素不能排入腸道,尿中 膽素原減少。 ------高未結(jié)合和結(jié)合膽紅素血癥,31,,(3)膽紅素排泄障礙---阻塞性黃疸,成因膽道梗阻
17、致膽紅素排泄 障礙。如膽結(jié)石、膽道 蛔蟲或腫瘤壓迫以及 Dubin-Johnson綜合征 等所致的膽道梗阻,32,,代謝特點血中結(jié)合膽紅素含量增高,總膽紅素升高,結(jié)合膽紅 素占總膽紅素的50%以上。 結(jié)合膽紅素能被腎小球濾過,尿中出現(xiàn)膽紅素。 膽紅素不易或不能隨膽汁排入腸道,因而腸腔膽素原 很少或缺失,糞便顏色變淺或呈灰白色。 尿中排出的膽素原也相應(yīng)變少,膽紅素陽
18、性。 ------高結(jié)合膽紅素血癥,33,,新生兒生理性黃疸的成因(icterus neonatorum),生下后,血液內(nèi)原來過多的紅細胞被破壞,未結(jié)合膽紅素生成過多。肝細胞內(nèi)載體蛋白—Y蛋白少,肝細胞攝取未
19、結(jié)合膽紅素的能力不足。肝細胞內(nèi)膽紅素葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶生成不足,結(jié)合膽紅素生成少。肝細胞膽汁分泌器發(fā)育不完善,對肝膽汁分泌的潛力不大。母乳中含有孕二醇,對葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶有抑制作用。,34,,4)黃疸的實驗室檢查,膽紅素代謝實驗,35,,三種類型黃疸的實驗室鑒別診斷,36,,(六)膽汁酸代謝及其異常,1.膽汁酸的類型,按結(jié)構(gòu)分按來源分,,游離膽汁酸(free bile acid)--CA,CDCA,DCA,LCA,結(jié)合膽
20、汁酸(conjugated bile acid)--與甘氨酸或牛磺酸結(jié)合,,初級膽汁酸(primary bile acid)--CA,CDCA,次級膽汁酸(secondary bile acid)--DCA,LCA,37,,初級膽汁酸,概念: ?。歉渭毎阅懝檀紴樵现苯雍铣傻哪懼幔愋停骸 。懰?CA)、鵝脫氧膽酸(CDCA)及相應(yīng)結(jié)合型膽汁酸。部位: --肝細胞的胞液和微粒體中原料: ?。懝檀肌 ?/p>
21、固醇轉(zhuǎn)化成膽汁酸是其在體內(nèi)代謝的主要去路,38,,次級膽汁酸,概念:--在腸道細菌作用下初級膽汁酸 7α-羥 基脫氧后生成的膽汁酸類型:--脫氧膽酸(DCA) 、石膽酸(LCA)及相 應(yīng)結(jié)合型膽汁酸部位:--小腸下段和大腸,39,,概念: 膽汁酸隨膽汁排入腸腔后,通過重吸收經(jīng)門靜脈又回到肝,在肝內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)榻Y(jié)合型膽汁酸,經(jīng)膽道再次排入腸腔的過程。
22、意義: 將有限的膽汁酸反復(fù)利用以滿足人體對膽汁酸的生理需要,促進脂類的消化吸收。,2. 膽汁酸腸肝循環(huán),40,,膽汁酸腸肝循環(huán)的過程,41,,3.膽汁酸代謝異常,肝膽疾病時的代謝異常腸道疾病時的代謝異常 高脂蛋白血癥時的代謝異常膽汁酸代謝遺傳性缺陷,42,,四、肝功能試驗的分類,根據(jù)病理過程結(jié)合肝功能的分類,了解肝實質(zhì)細胞膜通透性病變的試驗反映肝細胞蛋白質(zhì)合成障礙的試驗指示肝內(nèi)或肝外膽管阻塞的試驗反映肝結(jié)締組織增生的試
23、驗?zāi)承┎∫蛟\斷的特殊試驗,,第二節(jié) 常用 肝功能試驗,血清(漿)蛋白測定血清酶測定血清膽紅素測定血氨測定其他,,一、血清(漿)蛋白測定,(一)總蛋白、白蛋白、及白蛋白/球蛋白(A/G)比值測定,1.總蛋白測定,化學(xué)法(雙縮脲法 )、物理法、染料結(jié)合法、電泳法,染料結(jié)合法(BCG、BCP)、沉淀法,2.白蛋白測定,3.A/G比值,,【參考范圍】,總蛋白 60~80g/L 白蛋白 35~55g/L
24、球蛋白:15~32g/L A/G比值: 1.5~2.0/1,【臨床意義】,嚴重肝病時,肝臟合成分子量小的蛋白質(zhì)能力降低,血中白蛋白濃度減少;而免疫系統(tǒng)、單核巨噬細胞合成球蛋白增加,導(dǎo)致A/G比值減少。嚴重則會出現(xiàn)A/G比值小于1,稱為A/G比值倒置,表示肝功能損害嚴重。,,(二)纖維蛋白原測定,(凝血因子Ⅰ),【參考范圍】 2.22~4.22g/L(熱沉淀比濁法),【臨床意義】,(1) 纖維蛋白原增加:①感染;②無菌炎
25、癥;③其它。,(2) 纖維蛋白原減少: ①嚴重的肝臟疾病;,②其它疾病引起纖維蛋白原減少的疾病。,,(三)甲胎蛋白(α1-fetoprotein,AFP)測定,測定方法:,【參考范圍】成人 10~30µg/L >400µg/L作為肝癌診斷標準,【臨床意義】,,酶聯(lián)免疫吸附法、放射免疫分析法等,(1) 原發(fā)性肝細胞肝癌的診斷標準:血清AFP測定值超過 400µg/L(400ng/ml) ;
26、(2)活動性急、慢性肝炎、肝硬化或其它肝病病人的診斷.,,(四)其它,【臨床意義】 肝豆狀核變性(Wilson病)和遺傳性色素沉積癥.,1.銅藍蛋白測定,【參考范圍】 52.9~167.7 IU/L,【原 理】 銅藍蛋白具有氧化酶活性,,二 血清氨基轉(zhuǎn)移酶測定,氨基轉(zhuǎn)移酶測定方法,丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase,ALT)天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransfera
27、se,AST),酶聯(lián)-紫外連續(xù)監(jiān)測法二硝基苯肼比色法,方法:,酶:,,(一)酶聯(lián)-紫外連續(xù)監(jiān)測法,ALT和AST測定的參考方法,NADH在340nm處有特征吸收峰,連續(xù)監(jiān)測NADH消耗引起的340nm吸光度變化,根據(jù)340nm處吸光度下降速率(-△A/min)計算ALT活性。,原理:,,,,計算:,,注意事項:,1 .該ALT測定法中存在兩個消耗NADH的副反應(yīng)2 .試劑空白測定值的處理3 .樣本選擇和處理,方法評價,1. 特異
28、性高2. 準確性高3. 精密度高,參考范圍:,5~40U/L或參考試劑盒提供的參考范圍,,(二)二硝基苯肼比色法,原理:,,二、氨基轉(zhuǎn)移酶測定的意義,肝細胞中含量最多,其次是腎臟和心臟,通常只有極少量釋放入血液,所以血清中此酶的活力很低,當這些組織病變時,細胞壞死或通透性增加,細胞內(nèi)酶大量釋放入血,使血清中該酶活力顯著增高,1. 血清ALT活性增高,肝膽疾病骨骼肌疾病一些藥物和毒物可引起ALT活性升高,2.血清AST活性增高,心
29、血管疾病各種肝病均可引起血清AST的升高,,三 血清堿性磷酸酶測定,一、測定方法簡介,一組非特異性的在堿性條件下水解磷酸酯的酶類,底物:,β-甘油磷酸鈉磷酸苯二鈉對硝基酚磷酸鹽酸酚酞α-萘酚磷酸鹽4-甲基傘形花內(nèi)酯酰磷酸鹽,堿性磷酸酶:,,測定方法:,(一)測定水解釋放的無機磷,鮑氏(Bodansky)法,(二)測定底物水解后的羥基化合物,1. 羥基化合物需與顯色劑作用后比色測定,金氏(King)法,2. 羥基化合物在堿性
30、條件下直接顯色測定,對硝基酚磷酸鹽(p-nitrophenyl phosphate, 4-NPP)法,,速率法測定血清堿性磷酸酶,原理:,以對-硝基苯酚磷酸鈉(4-NPP)為底物, AMP或二乙醇胺(DEA)為磷酸?;氖荏w。在堿性條件下,ALP催化4-NPP水解釋放出磷酸基團,生成游離對-硝基酚(p-nitrophenol, 4-NP),4-NP在堿性溶液中轉(zhuǎn)變成醌式結(jié)構(gòu),呈現(xiàn)較深的黃色。根據(jù)405nm處吸光度增加的速率(△A/min
31、)推算出清ALP活性單位。,,,計算:,參考范圍:,40~160 U/L (37℃),靈敏度高、線性范圍寬(500U/L以上)和精密度高,方法評價:,,二、堿性磷酸酶測定的意義,分布:廣泛存在于各器官組織中,尤以肝臟、骨骼、小腸和腎臟含量較高,血清中ALP主要來自肝臟和骨骼,病理性增高: 肝膽疾?。鹤枞渣S疸、急性或慢性黃疸型肝炎、肝癌 骨骼疾?。贺E病、骨軟化病、骨轉(zhuǎn)移癌和骨折修復(fù)愈
32、合期,生理性增高:妊娠期與兒童生長發(fā)育期,,四 血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶測定,一、測定方法簡介,γ-谷氨?;D(zhuǎn)移酶(γ-glutamyl transferase,GGT),(一)重氮比色法,(二)速率法,測定方法:,,速率法測定血清γ-谷氨?;D(zhuǎn)移酶,GGT催化γ-谷氨?;茡Q反應(yīng)。以L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺為底物,雙甘肽為谷氨?;氖荏w,在GGT的催化下,谷氨?;D(zhuǎn)移到雙甘肽分子上,同時釋放出黃色的2-硝基-5-氨基苯甲酸,
33、根據(jù)405nm處吸光度增加的速率(△A/min)推算出GGT活性單位,,原理:,,計算:,參考范圍:男性 11~50U/L (37℃),女性 7~32U/L(37℃) `,方法評價:,本法準確度好;精密度好線性范圍寬(460U/L);操作簡便;但對試劑純度要求高,,二、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶測定的意義,分布:腎最高,其次是前列腺、胰、肝等器官,尿中GGT活性:,可能有助于診斷腎疾病,血清GGT用于診斷肝膽疾病,1. 原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性肝癌
34、2. 阻塞性黃疸3. 病毒性肝炎和肝硬化4. 乙醇性肝炎,,五 血清膽紅素測定,一、測定方法簡介,總膽紅素 未結(jié)合膽紅素 結(jié)合膽紅素 δ膽紅素 (共價結(jié)合白蛋白),重氮法改良J-G法膽紅素氧化酶(bilirubin oxidase,BOD)法,測定方法:,,(一)重氮法,結(jié)合膽紅素能與重氮試劑直
35、接反應(yīng)生成紫紅色的偶氮化合物(λ=560nm),未結(jié)合膽紅素需加入甲醇、乙醇、苯甲酸鈉、尿素等“加速劑”,破壞分子內(nèi)氫鍵,才能與重氮試劑反應(yīng)生成紫紅色的偶氮化合物,,結(jié)合膽紅素,,+,原理:,,血清與醋酸鈉-咖啡因-苯甲酸鈉試劑(咖啡因試劑)混合后,加入氯化重氮苯磺酸(重氮試劑),生成紫紅色偶氮膽紅素,最后加入強堿性酒石酸鈉溶液,使顏色不穩(wěn)定的紫紅色偶氮膽紅素在咖啡因存在下轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的藍色偶氮膽紅素。反應(yīng)結(jié)束后,在600nm波長比色,從
36、校準曲線查找總膽紅素和結(jié)合膽紅素含量 醋酸鈉緩沖液保持偶氮反應(yīng)的pH; 咖啡因試劑促進未結(jié)合膽紅素分子內(nèi)的氫鍵破壞,加速與重氮試劑的偶聯(lián)反應(yīng); 疊氮鈉(或抗壞血酸)可終止結(jié)合膽紅素的偶氮反應(yīng)。,(二)改良J-G法(加速劑為苯甲酸鈉-咖啡因),原理:,,方法評價:,靈敏度高抗干擾能力強線性范圍可達342µmol/L正常參考濃度時精密度較差膽紅素濃度達342µmol/L時,精密度好,,(三)膽紅素氧
37、化酶法,膽紅素在450nm波長處,吸光度的下降與濃度成正比。pH8.0時,膽紅素氧化酶可催化結(jié)合膽紅素和未結(jié)合膽紅素氧化; pH4.5時,膽紅素氧化酶僅催化結(jié)合膽紅素氧化。,靈敏度高,干擾少,準確度好,線性范圍寬十二烷基硫酸鈉(SDS)及膽酸鈉等陰離子表面活性劑可促進其氧化,原理:,方法評價:,,二、血清膽紅素測定的意義,診斷黃疸及判斷黃疸程度:,總膽紅素17.1~34.0µmol/L為隱性黃疸>34µm
38、ol/L時,皮膚、粘膜、鞏膜出現(xiàn)黃染,稱臨床黃疸,鑒別黃疸類型:,①溶血性黃疸②肝細胞性黃疸③阻塞性黃疸,疾病的診斷,肝炎肝癌膽道部分阻塞再生障礙性貧血↓慢性腎炎↓,,黃疸類型的鑒別,,六 血氨測定,一步法,也叫直接測定即不需從全血中分離出氨即可直接測定,兩步法,即先從全血中分離出氨,而后再進行測定;,微量擴散法、離子交換法,酶法和氨電極法,,,原理: 血漿中的氨在足量α-酮戊二酸和NADPH存在時,經(jīng)谷
39、氨酸脫氫酶作用生成谷氨酸,并消耗NADPH,NADPH的下降速率與血漿氨濃度成正比。,NH3+α-酮戊二酸+NADPH 谷氨酸+NADP++H2O,谷氨酸脫氫酶速率法:,谷氨酸脫氫酶,(2) 方法評價:,本法特異性強、分析時間短,是較為理想的氨分析方法。在200µmol/L范圍內(nèi)、線性良好。精密度:批內(nèi)CV=3.9%;批間CV=4.5%。回收率為97.9%~102.7%。,,【參考范圍】,血氨測定在
40、診斷治療肝性腦病中占有重要作用。,【臨床意義】,18~72μmol/L (酶法),,七 了解內(nèi)容,一、血清膽汁酸測定,(一)高效液相色譜法(二)放射免疫分析法(三)酶免疫分析法(四)酶比色法(類固醇脫氫酶法),,血清膽汁酸測定的意義,血清膽汁酸水平是反映肝實質(zhì)性損傷的一個重要指標,(一)作為肝膽疾病的初篩試驗(二) 作為低活動性肝病的鑒別試驗(三)作為肝硬化的輔助診斷 (四)作為膽汁淤積的f輔助診斷,,二、 肝
41、硬化的生化檢驗,由于多種損傷因素長期或反復(fù)作用于肝,使肝細胞彌漫性變性、壞死以及肝結(jié)締組織彌漫性增生,導(dǎo)致肝廣泛的纖維化和結(jié)節(jié)的形成,稱為肝硬化 。,,,1. 肝硬化病因的分類,①營養(yǎng)不良②感染③隱原性肝硬化④肉芽腫性肝硬化。,(1)確定的病因,①乙型、丙型病毒性肝炎。②乙醇中毒。③代謝性疾?、芨蝺?nèi)、外長期膽汁淤積⑤門靜脈回流受阻⑥免疫功能紊亂⑦毒素及治療性藥物,(2)可能的原因,,2. 肝硬化的生物化學(xué)檢查,反映肝纖維化指
42、標:(1)單胺氧化酶(monoamine oxidase, MAO)測定(2)β-脯氨酸羥化酶(β-proline hydroxylase, β-PH)測定(3)血清透明質(zhì)酸(hyaluronic acid, HA)測定(4)血清Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)測定,,一、急性肝損傷,血清酶 急性肝損傷的主要實驗室指標變化特征是轉(zhuǎn)氨 酶的顯著升高,同時伴有血清膽紅素的升高。AST/ALT<1,是診斷急性病毒性肝
43、炎的重要 檢測指標。重癥肝炎時則是ASTm大量出現(xiàn)于血清中。ALP可升高,但一般不會超過其參考值上限的 3倍 。,80,第三節(jié) 常見肝膽疾病生化指標變化,,膽紅素急性肝損傷時的血清膽紅素與阻塞性黃疸 一致,是以結(jié)合膽紅素升高為主。黃疸型肝炎血清直接和間接膽紅素均升高 ,但前者高于后者,尿膽紅素和尿膽原也 增加。,81,,血清蛋白質(zhì)急性肝炎時,蛋白合成代謝變化不大,血
44、清蛋白質(zhì)可在正常范圍內(nèi)。慢性肝炎中度以上、肝硬化、(亞急性及 慢性)重型肝炎時白蛋白下降,γ-球蛋白 升高,A/G下降甚至倒置。,82,,血漿凝血酶原時間 血漿PT是急性肝損傷預(yù)后最重要的預(yù)測指 標,肝病時PT時間長短與肝損害程度呈正 相關(guān)。PT持續(xù)延長,多是病情加重及預(yù)后不良的 征兆。,83,,二、慢性病毒性肝炎,血清酶檢測轉(zhuǎn)氨酶輕度上升(100~ 200U/L),往往血清
45、 AST/ALT<1,若AST/ALT>1時,提示慢性 肝炎可能進入活動期。如果患者有飲酒史,且血清AST為ALT的2倍 以上,則可診斷為酒精性肝炎。γ-GT在反映慢性肝細胞損傷及其病變活動時 較轉(zhuǎn)氨酶敏感。,84,,膽紅素肝細胞慢性受損,血清直接和間接膽紅素均不 同程度升高;重型肝炎患者可出現(xiàn)ALT快速下降,黃疸進行 性加深,膽紅素不斷升高的“膽酶分離”現(xiàn)象。,85,,蛋
46、白質(zhì)慢性肝炎時,肝細胞合成能力減低,白蛋白明 顯降低、A/G比倒置,這是本病的特征。其他凝血酶原時間(PT)顯著延長。血氨升高,提示肝細胞大量壞死,預(yù)后不佳。,86,,三、肝硬化,血清酶類轉(zhuǎn)氨酶 患者常有ALT和AST升高;AST/ALT 比例可反映肝細胞損傷的程度;膽堿酯酶(ChE) 常明顯下降,其下降程度與 血清白蛋白相
47、平行。MAO 單胺氧化酶(MAO)活性可以反映肝纖 維化形成過程及程度。PH 肝纖維化時其活性及含量均明顯升高,,87,,血清蛋白質(zhì)類白蛋白降低、A/G比值倒置時肝硬化的特征。AFP可以增高,一般在300ng/ml以下,當肝功 能好轉(zhuǎn)后,AFP逐漸下降至正常,若繼續(xù)升高 ,應(yīng)警惕有無肝癌的可能。,88,,血清學(xué)指標纖維連接蛋白(FN) 血清透明
48、質(zhì)酸(HA) 膠原及其片段其他 如凝血酶原時間測定( VitK不能加以糾 正 )、靛氰綠(ICG)實驗等,89,,第四節(jié) 病例討論,,病例討論,李XX.男性,49歲。主訴:乏力、納差,牙齦和鼻出血6年,腹脹、尿少1年。現(xiàn)病史:6年來無明顯誘因出現(xiàn)消瘦、周身乏力、食欲不振。每逢進食蛋白及脂肪食物后即出現(xiàn)腹脹和大便不成形,每日排便2~3次,但無黏液、膿血和里急后重。常于刷牙時有齒齦出血,鼻出血,稍有碰撞皮膚發(fā)青。近
49、 1年來間斷出現(xiàn)腹脹,下肢浮腫和少尿,每日約 600~900ml,用利尿藥后尿量增加,腹脹減輕,但乏力更明顯。近3個月低熱、腹痛,腹圍漸增大,有時不能平臥。自服利尿藥無效而來院診治。,,病例,既往史:10年前因外傷大量輸血,7年前體檢得知“丙型肝炎抗體陽性”,因肝功能正常而未經(jīng)特殊治療。體格檢查:體溫38.5℃,脈搏98次/分,呼吸20次/分,血壓120/75mmHg。神志清楚,形體消瘦,面色灰暗黝黑,毛發(fā)稀疏。眼瞼無浮腫,鞏膜輕度黃
50、染。頸軟,頸靜脈無怒張。心肺無異常。蛙形腹,臍膨出,腹壁靜脈顯露。肝臟觸不清,肝頸靜脈回流征陰性,脾肋下6 Cm,Ⅱ0硬,移動性濁音陽性。左側(cè)腹部有局限性壓痛,輕度肌緊張和反跳痛,下腹部輕度叩痛,腸鳴音無亢進及減弱??梢姼握?,脛前有色素沉著。,,病例,腹水檢查:淡黃色,比重 1.018,蛋白 25g/L,李凡他試驗陽性,細胞總數(shù)600 × 106/L,N 0.80,L 0.20問題1:根據(jù)以上特點,應(yīng)考慮什么疾???問題2:
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