多花黑麥草品種dus測試數(shù)量性狀分級分析

1、收稿日期：修回日期：網(wǎng)絡出版日期：URL：基金項目：國家牧草產(chǎn)業(yè)體系項目（CARS3505）；農(nóng)業(yè)部草品種DUS測定項目（20130106）；四川省飼草育種攻關項目（2011NZ009811）作者簡介：劉歡，在讀碩士生。研究方向：草種質資源創(chuàng)新及分子育種。Email:1229424535@通信作者：張新全，博士，教授。研究方向：草種質資源創(chuàng)新及分子育種。Email:zhangxq@sicau.多花黑麥草品種多花黑麥草品種DUS測試測試數(shù)

2、量性狀分級分析數(shù)量性狀分級分析劉歡1，馬嘯1，張新全1，張瑞珍2，陳誠1，唐露1，楊忠富1（1.四川農(nóng)業(yè)大學草業(yè)科學系，四川成都611130；2.四川省草原工作總站，成都610041）摘要：摘要：對多花黑麥草(LoliummultiflumLam.)7個品種進行了不同時期30個數(shù)量性狀指標的測定，利用數(shù)量性狀對多花黑麥草性狀進行了概率分級的研究，并進行了相關性分析。結果表明，30個數(shù)量性狀變異范圍在7.55%~40.65%之間，變異系數(shù)

3、最大的是分蘗數(shù)，最小的是千粒重。根據(jù)各數(shù)量性狀的KS檢驗及χ2檢驗，發(fā)現(xiàn)僅少部分性狀不符合χ2分布；最終將28個數(shù)量性狀分為5個等級，另外將抽穗期（春化后）和分蘗數(shù)分為3個等級。多花黑麥草的30個數(shù)量性狀之間相關性分析結果表明株高與生長習性、小穗數(shù)與小穗密度、上部節(jié)間長與節(jié)間數(shù)呈極顯著負相關，花序長與小穗密度呈極顯著正相關。研究結果為多花黑麥草品種的鑒定評價、品種選育及數(shù)量性狀的分級提供了理論依據(jù)。關鍵詞：關鍵詞：多花黑麥草；DUS測試

4、；數(shù)量性狀；分級分析ClassificationAnalysisfItalianRyegrassDUSTestingQuantitativeTraitsLIUHuan1MAXiao1ZHANGXinquan1ZHANGRuizhen2CHENCheng1TANGLu1YANGZhongfu1(1.DepartmentofGrasslScienceSichuanAgriculturalUniversityChengdu611130Sich

5、uan2.GrasslStationofSichuanProvinceChengdu610041)Abstract:Quantitativetraitsof7Italianryegrassvarietiesweremeasuredindifferentgrowthperiodscrelationof30quantitativetraitswereanalyzed.Theresultsshowedthatcoefficientofvari

6、ationofthe30quantitativetraitsaccessionsvariedfrom7.55%to40.65%thevariationcoefficientoftillernumberwasthebiggestwhilethevariationcoefficientofthousseedweightwastheleast.AccdingtothequantitativetraitsofKStestchisquaretes

7、tonlyasmallnumberofpropertiesdidnotconfmtothechisquaredistributionfinallythe28quantitativetraitscouldbedividedinto5gradesbutthetimeofinflescenceemergencethetillernumbercouldbedividedinto3grades.Thecrelationanalysisof30qu

8、antitativetraitsindicatedthattheheightthevegetativegrowthhabitthenumberofspikeletthedensityofspikeletthelengthofupperinternodethenumberofinternodewereallshowedhighlysignificantnegativecrelationwhilethelengthofinflescence

9、thespikeletdensitywereshowedhighlysignificantpositivecrelation.TheseresultscanprovidebasicinfmationfvarietyidentificationbreedingquantitativetraitsclassificationofItalianryegrass.Keywds:ItalianryegrassDUStestingquantitat

10、ivetraitsclassificationanalysis隨著對知識產(chǎn)權保護的逐步重視，為了保護育種家的合法權益，我國于1997年3月20日頒布了《中華人民共和國植物新品種保護條例》，并于1999年4月23日正式加入國際植物新品種保護聯(lián)盟（InternationalUnionftheProtectionofNewVarietiesofPlantsUPOV），成為第39個成員國，植物新品種保護條例正式在中國實施[1]。多花黑麥草(Lo

11、liummultiflumLam.)是禾本科黑麥草屬(LoliumL.)的一年生草本植物[2]，是世界上廣泛栽培的優(yōu)良牧草之一，適合生長在氣候溫和而濕潤的地區(qū)，主要用于人工草地、割草地的建植和放牧利用中[34]。我國從20世紀30年代開始研究多花黑麥草，到2014年為止，全國草品種審定登記的多花黑麥草品種16個。其中引進品種11個，育成品種4個，屬內(nèi)雜交品種1個[56]。植物新品種特異性（Distinctness）、一致性（Unifmi

12、ty）和穩(wěn)定性（Stability）測試（簡稱DUS測試）指南，是指新品種申報審查時判定測試品種是否為新品種的過程，為新品種的授權提供了可靠的技術支持和判定依據(jù)[7]。DUS測試指南既是指導研究單位科學準確開展DUS測試工作的技術手冊，也是審批機構開展新品種DUS審查的技術標準[8]。根據(jù)黑麥草自身形態(tài)特征，按照《植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南總則》（GBT19557.12004）的相關原則，參考UPOV《特異性、一致性和穩(wěn)定

13、性測試指Commented[微軟用戶微軟用戶1]:DUS測試僅在測定數(shù)量性狀確定中進行了相關文獻參考，建議本文章題目刪除“DUS測試”字樣，增加“表型”字樣25~30cm，耕后將土塊耙平碾碎，平整后間以排水溝，便于排水；移栽前施適量基肥，基肥為充分腐熟的人畜糞尿。本試驗中采取單因素隨機區(qū)組設計，種植方式為單株種植，每個品種種植90株，設置3個重復，株行距為50cm100cm。移栽后進行統(tǒng)一管理，及時澆水施肥和中耕除草，以保證植株正常生長

14、發(fā)育。1.4觀測指標本試驗所有指標均以單株為單位測量，在多花黑麥草整個生育期進行觀測。共調(diào)查了30個數(shù)量性狀（表2），主要結合了國際植物新品種保護聯(lián)盟在2006年制定的《特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南黑麥草》（UPOVTG48）和《日本黑麥草亞種DUS測試指南》，對不同時期（表3）的不同性狀進行了觀測與記錄。觀測時，每個品種從90個單株中隨機選取長勢一致的60個單株，每株選取5個分蘗測定。葉長、葉寬等性狀利用卷尺和電子游標卡尺等工具進行

15、測量；SPAD（SoilPlantAnalyzerDevelopment）值數(shù)據(jù)采用SPAD502葉綠素含量測定儀測定，測定時每枝分蘗選取旗葉和倒二葉上不同的三處進行測定，計算其平均值作為該分蘗枝的數(shù)據(jù)進行記錄。1.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析1.5.1數(shù)量性狀的分級利用Excel2013對各數(shù)量性狀的最大值、最小值、平均值、中值和平均標準差等進行統(tǒng)計，然后對性狀數(shù)據(jù)分布進行正態(tài)性檢驗，主要是采用單樣本KS（KolmogovSmirnov）檢驗法[

16、20]和卡方（χ2）檢驗法[21]，判斷其分布是否符合正態(tài)分布或卡方分布。對符合正態(tài)分布的性狀，參考UPOV的分級并結合性狀的實測數(shù)據(jù)，將其分為5級或3級，分級標準的設定按照劉平[22]、劉孟軍[23]、楊俊霞等[24]的分級方法，5級中1~5級出現(xiàn)的概率分別為10%、20%、40%、20%和10%，3級中1~3級出現(xiàn)的概率分別為30%、40%和30%，采用(1.2818S)、(0.5246S)、(0.5246S)、(1.2818S)4

17、個分點來分為5級，或用(0.5246S)和(0.5246S)2個分點分為3級。分級后再統(tǒng)計各性狀取值的分布直方圖，用分布函數(shù)的卡方（χ2）檢驗法檢驗各性狀頻數(shù)的分布是否為正態(tài)分布類型。對于不符合正態(tài)分布的性狀，采用劉平等[22]在分組的基礎上，極差按0.5~1倍標準差來進行調(diào)整，使分布于各組的頻數(shù)符合卡方分布。1.5.2數(shù)量性狀的相關性分析用SPSS22.0軟件計算各數(shù)量性狀的相關系數(shù)。1.5.3數(shù)量性狀的多樣性分析多花黑麥草的各性狀參

18、考UPOV《特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南黑麥草》（UPOVTG48）列出的表達狀態(tài)，具體劃分等級按照表7確定的分級標準確定；對于每個品種，單個性狀中表達的狀態(tài)所對應的級別分別標記為AA（等級1）、BB（等級3）、CC（等級5）、DD（等級7）、EE（等級9），由此構建成形態(tài)性狀的原始數(shù)據(jù)矩陣，對于品種群體，在某一性狀中出現(xiàn)的級別的總數(shù)，標記為該性狀的等位變異數(shù)目(Na)，采用PopGen32軟件，分析不同性狀的等位變異數(shù)目、有效等位變

19、異數(shù)目(Ne)和ShannonWeaver多樣性指數(shù)。ShannonWeaver多樣性指數(shù)計算公式[25]為：H=ΣPiln(Pi)，式中Pi為某個性狀第i個代碼出現(xiàn)的概率。1.5.4聚類分析將性狀數(shù)據(jù)標準化處理后，采用多變量分析系統(tǒng)NTSYSpc2.10統(tǒng)計軟件中的SM法計算遺傳相似系數(shù)，然后根據(jù)相似系數(shù)用SAHNClustering和非加權成對算術平均法（UPGMA，unweightedpairgroupmethodwitharit