九龍江河口紅樹林濕地石油降解菌群落結構研究.pdf

1、在21世紀，環(huán)保工作者們對紅樹林濕地以及紅樹林中具有海洋污染生物修復功能的微生物資源的研究已經(jīng)成為一個熱點。本研究的目的是探索紅樹林區(qū)微生物在石油污染壓力下的細菌數(shù)量、代謝活性以及群落結構的變化，并從中分離篩選石油降解菌。樣品采集于中國福建省九龍江口紅樹林濕地的3個站位，以原油和柴油為選擇壓力富集馴化樣品中的微生物。在富集馴化過程中，測定了可培養(yǎng)細菌的數(shù)量、微生物的代謝活性，并用PCR-DGGE的方法分析了馴化過程中細菌群落結構的變化。

2、結果如下： 1.經(jīng)過富集馴化，從紅樹林沉積物中獲得了大量的可培養(yǎng)細菌。非轉接組在馴化過程的第一周到第五周，細菌的數(shù)量恒定，從第六周開始到第八周，所有實驗組的細菌數(shù)量都呈緩慢的減少趨勢。在轉接組，15號站位可培養(yǎng)細菌數(shù)量最高，其次是14號站位，12號站，豐度最低的是海水的馴化樣品。結果還顯示，以柴油為富集壓力下的樣品中的平均細菌數(shù)高于原油樣品，此外，所有站位樣品以2216E作為富集培養(yǎng)基得到的細菌數(shù)均高于經(jīng)R2A培養(yǎng)的。

3、 2.測定了不同站位以及富集富集馴化的微生物的電子傳遞系統(tǒng)的活性(ETSA)。在非轉接組中，ETSA值從第一周到第五周基本不變，第六周到第八周開始下降。在轉接組中的結果表明，15號站位的樣品表現(xiàn)有最高的活性，其次是海水富集物)，14號站位和12號站位。另外，以柴油為富集壓力下的樣品的ETSA平均值高于原油的。同時發(fā)現(xiàn)所有站位的樣品在以2216E作為富集培養(yǎng)基得到的ETSA平均值高于R2A。 3.利用PCR-DGGE方法分析了

4、研究了紅樹林沉積物在原油和柴油污染壓力下微生物群落結構的變化。DGGE的條帶表明，第一周到第八周，細菌的群落結構沒有明顯的變化。并且，對獲得的8條優(yōu)勢條帶進行了測序，結果表明它們的分別屬于Hbrio natriegens，Vibronaeeae bacterium，Vibrio campbellii， Uncultured marine bactyerium，Vibrioparahaemolyticus，Pseudomonas sp，V

5、ibrio sp和Vibrio alginolyticus。 4.從原油和柴油富集培養(yǎng)基中分離得到了11株菌，16S rDNA文庫分析表明，絕大多數(shù)分離到得細菌其序列相對應的細菌為此前已確定的潛在的多環(huán)芳烴(PAHs)降解菌，在Gene bank比對結果表明這11株菌分別歸屬于Pseudomonas sp.， Flexibacteraceae bacterium，Rhodobacteraceae bacterium，Marin