高氯酸鹽降解菌的鑒定及特性研究.pdf

1、近年來,高氯酸鹽在大量水、土壤和食物中均被檢測到,已經(jīng)引起全世界范圍內(nèi)人們的高度重視。由于高氯酸鹽攝入人體后會導(dǎo)致甲狀腺激素的分泌不足,進(jìn)而抑制人體正常的新陳代謝和生長發(fā)育,因此,尋找消除此類污染物的有效方法成為全世界關(guān)注的重大環(huán)境問題之一。微生物降解作用是環(huán)境中高氯酸鹽污染去除的最主要途徑,利用厭氧微生物在缺氧條件下將高氯酸鹽最終降解為無毒無害的氯化物,而且微生物降解是最為經(jīng)濟(jì)簡便、無二次污染的有效方法,倍受關(guān)注。本論文通過分離純化得

2、到兩種菌株,并借助分子生物學(xué)方法和生物信息學(xué)技術(shù)鑒定其菌屬,并通過試驗(yàn)確定其最佳生長條件。
　　 主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　 (1)以從江濱泵站污水中分離所得的菌株JD15和從大港污水處理廠污水中分離得到的菌株JD22為研究對象,純化后在PCA培養(yǎng)基中富集培養(yǎng),提取培養(yǎng)基中總細(xì)菌的DNA,利用PCR擴(kuò)增技術(shù)克隆水體細(xì)菌的16S rDNA基因片段,測序結(jié)果在NCBI數(shù)據(jù)庫進(jìn)行序列檢索,通過EBI比對序列和構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹

3、,并與數(shù)據(jù)庫中已收錄的細(xì)菌16SrDNA序列進(jìn)行相似性比較分析。分析結(jié)果顯示:JD15和Dechloromonas sp SIUL序列相似度高達(dá)100％,JD22和Dechlorospirillum序列相似度達(dá)97％,兩者分別具有同源性。
　　 (2)以JD15和JD22為研究對象,利用分子生物學(xué)技術(shù)和生物學(xué)信息學(xué)技術(shù)對兩種菌株進(jìn)行了進(jìn)一步的分析,分析結(jié)果顯示:JD15與Dechloromonas agitate菌的ClO4還原

4、酶a亞基基因片段相似率達(dá)99％,JD22和Dechlorospirillum sp菌的ClO4還原酶a亞基基因部分片段相似率達(dá)99％。
　　 (3)改變影響Dechloromonas agitate和Dechlorospirillum的生長條件,通過OD值測定和離子色譜儀分析,分別繪制生長曲線和降解曲線。結(jié)果顯示:Dechloromonas agitate和Dechlorospirillum在24℃和pH=7時生長較快且生長狀態(tài)