三食品中蛋白質(zhì)含量測定凱氏定氮法

1、實驗三實驗三食品中蛋白質(zhì)含量測定（凱氏定氮法）食品中蛋白質(zhì)含量測定（凱氏定氮法）（500952003食品中蛋白質(zhì)含量測定）一、目的與要求1、學習凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)的原理。2、掌握凱氏定氮法的操作技術(shù)，包括樣品的消化處理、蒸餾、滴定及蛋白質(zhì)含量計算等。二、實驗原理蛋白質(zhì)是含氮的化合物。食品與濃硫酸和催化劑共同加熱消化，使蛋白質(zhì)分解，產(chǎn)生的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨，留在消化液中，然后加堿蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后，再用鹽酸標準溶液滴定，根據(jù)

2、酸的消耗量來乘以蛋白質(zhì)換算系數(shù)，即得蛋白質(zhì)含量。因為食品中除蛋白質(zhì)外，還含有其它含氮物質(zhì)，所以此蛋白質(zhì)稱為粗蛋白。三、儀器與試劑（一）試劑1、硫酸銅（CuSO45H20）2、硫酸鉀3、硫酸（密度為1.8419gL）4、硼酸溶液（20gL）5、氫氧化鈉溶液（400gL）6、0.01molL鹽酸標準滴定溶液。7、混合指示試劑：0.1%甲基紅乙溶液液1份，與0.1%溴甲酚綠乙醇溶液5份臨用時混合。8、黃豆粉。（二）儀器微量定氮蒸餾裝置：如圖3

3、所示。4、樣品滴定以0.01molL鹽酸標準溶液滴定至灰色為終點。5、數(shù)據(jù)記錄項目第一次第二次第三次樣品消化液（mL）滴定消耗鹽酸標準溶液（mL）消耗鹽酸標準溶液平均值（mL）五、結(jié)果計算100101000140.0)(21???????FmcVVX式中X——樣品蛋白質(zhì)含量（g100g）；V1——樣品滴定消耗鹽酸標準溶液體積（mL）；V2——空白滴定消耗鹽酸標準溶液體積（mL）；c——鹽酸標準滴定溶液濃度（molL）；0.0140——1

4、.0mL鹽酸標準滴定溶液相當?shù)牡馁|(zhì)量（g）；]000.1)([LmolHClc?m——樣品的質(zhì)量（g）；F——氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù)，一般食物為6.25；乳制品為6.38；面粉為5.70；高梁為6.24；花生為5.46；米為5.95；大豆及其制品為5.71；肉與肉制品為6.25；大麥、小米、燕麥、裸麥為5.83；芝麻、向日葵5.30。計算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。六、注意事項及說明1、本法也適用于半固體試樣以及液體樣品檢測。半固體試樣一般取