產(chǎn)品基礎(chǔ)知識(shí)

1、產(chǎn)品基礎(chǔ)知識(shí)簡(jiǎn)介,利德曼技術(shù)部,摘 要,一、產(chǎn)品基礎(chǔ)知識(shí) 二、產(chǎn)品種類及特點(diǎn) 三、常用專有名詞,一、產(chǎn)品基礎(chǔ)知識(shí),1.生化診斷試劑盒的概念 生化診斷試劑盒為由一定的化學(xué)品或者酶類組成的多成分混合試劑（Reagent），最終以水溶液的方式，與待檢測(cè)物發(fā)生一系列化學(xué)或者生化反應(yīng)，通過生成物或反應(yīng)物中某

2、種物質(zhì)的吸光度變化，測(cè)量待檢測(cè)物中某種特定物質(zhì)的含量。,一、產(chǎn)品基礎(chǔ)知識(shí),2.生化診斷試劑盒的組成 試劑盒一般由一種或兩種試劑組成，由兩種試劑組成的分別稱為R1和R2，但每種試劑均含有多于一種的化學(xué)組分，而非簡(jiǎn)單的一種化學(xué)成分。部分試劑盒中包含有標(biāo)準(zhǔn)液（校準(zhǔn)液），用于建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,產(chǎn)品組成,,,試劑2—R2,試劑1—R1,校準(zhǔn)液,,一、產(chǎn)品基礎(chǔ)知識(shí),3.   產(chǎn)品的適用范圍： 醫(yī)院檢驗(yàn)科

3、生化室的各類全自動(dòng)、半自動(dòng)生化儀，分光光度計(jì)。適用于儀器自動(dòng)以及手工操作。,血清（主要）、血漿、尿液以及體液（腦脊液、胸腹水等）中的各種酶和代謝產(chǎn)物，用于協(xié)助臨床醫(yī)生診斷。,4.    產(chǎn)品的檢測(cè)對(duì)象：,,血清：血漿除去纖維蛋白原后所余下的淡黃色透明液體叫血清，血清不會(huì)凝固。 血漿：血液中去除血細(xì)胞和血小板后余下部分就是血漿。它是一種半透明的淡黃色粘稠狀液體，當(dāng)血液流出血管時(shí)，其中纖維蛋白元即可變?yōu)槔w維

4、蛋白，并和血細(xì)胞凝固成塊，有止血作用。 加入抗凝劑(肝素、EDTA、草酸鹽、檸檬酸鹽)。,二、產(chǎn)品種類,1、按檢測(cè)類別： 肝功類 血脂類 胰功類 腎功類 心肌酶類 免疫類 血糖類 離子類 血栓與凝血2、按外觀： 液體試劑； 干粉、凍干試劑； 凍干血清（標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)控）； 液體標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)控品（如：免疫類多項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)控）,液

5、體試劑,液體試劑,,,,液體試劑特點(diǎn),試劑直接上機(jī)使用。 批內(nèi)、批間差異小，穩(wěn)定期可達(dá)18個(gè)月。2）多種通用儀器包裝規(guī)格。 直接放入試劑倉(cāng)中，使用方便。3）單試劑節(jié)省試劑位。 為自動(dòng)生化儀擴(kuò)展實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目提供充足空間。 如：TG,CHO,GLU,AMY,CA,MG,P4）種類齊全。 幾乎涵蓋生化檢驗(yàn)的全部項(xiàng)目。,干粉、凍干試劑,1) 凍干試劑大多需采用緩沖液溶

6、解，干粉試劑采用蒸餾水或去離子水溶解后使用。凍干試劑：制備試劑的工序?yàn)閮龈桑噭┑耐庥^為結(jié)晶狀。干粉試劑：試劑的外觀為粉末狀 。2) 原包裝試劑穩(wěn)定周期長(zhǎng)達(dá)30個(gè)月。3) 復(fù)溶后，各試劑穩(wěn)定時(shí)間不同。超過穩(wěn)定期后，試劑以失效處理。,干粉試劑,凍干試劑,定值、質(zhì)控血清,校準(zhǔn)、質(zhì)控血清介紹,1) 校準(zhǔn)血清（多項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)液）：含有常規(guī)檢驗(yàn)的全部項(xiàng)目的定值血清，用以建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的校準(zhǔn)物。通常由著名的臨床化學(xué)實(shí)驗(yàn)室使用標(biāo)準(zhǔn)或參比試驗(yàn)方法確定。

7、（ 羅氏稱為C.F.A.S）2) 質(zhì)控血清：日常用以監(jiān)控測(cè)量的準(zhǔn)確度和測(cè)量結(jié)果可信性的一個(gè)指標(biāo)。提供常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目靶值和一定范圍（一般為2SD）數(shù)值的血清。用適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)品以參考方法定值，用于質(zhì)量控制，不用于標(biāo)準(zhǔn)化。監(jiān)測(cè)時(shí)最好用高低兩個(gè)濃度的質(zhì)控血清，一個(gè)濃度在正常范圍內(nèi)，另一個(gè)應(yīng)在病理情況下可能出現(xiàn)的高濃度或低濃度。質(zhì)控血清分為：,定值、質(zhì)控血清,3) 采用人或動(dòng)物血清為基質(zhì)，符合IFCC質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。4) 項(xiàng)目齊全、數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。包含各種

8、酶類項(xiàng)目的定值，避免各種輸入K因數(shù)造成結(jié)果的偏差。5) 穩(wěn)定時(shí)間長(zhǎng)。分裝后，避免反復(fù)凍融，在-20度條件下，可保存2個(gè)月。,三、常用專有名詞,準(zhǔn)確度精密度（SD）及變異系數(shù)（CV）線性范圍（linearity）靈敏度（sensitivity）特異性（specificity）穩(wěn)定性相關(guān)系數(shù)和回歸方程質(zhì)控工作中涉及的概念及理解,1、準(zhǔn)確度,臨床準(zhǔn)確性（ Clinical Accuracy）：衡量檢驗(yàn)項(xiàng)目對(duì)于不同健康狀況的區(qū)

9、分能力。如：健康與疾?。涣夹耘c惡性疾?。粚?duì)治療的反應(yīng)性與不反應(yīng)性；預(yù)測(cè)疾病的好轉(zhuǎn)與惡化狹義概念（ Accuracy）：與靶值符合程度,20,準(zhǔn)確度,與靶值相符程度 將試劑盒以配套標(biāo)準(zhǔn)液定標(biāo)后檢測(cè)不同水平的質(zhì)控各3次，計(jì)算3次均值，計(jì)算均值與靶值的偏差，判斷其是否在可接受范圍內(nèi)?；厥諏?shí)驗(yàn) 在人血清樣本中加入一定體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液或純品，每個(gè)濃度重復(fù)測(cè)定3次，按以下公式計(jì)算回收率。 注：標(biāo)準(zhǔn)溶液體

10、積與血清體積比應(yīng)不大于1：20，或加入體積比不會(huì)產(chǎn)生基質(zhì)的變化，加入標(biāo)準(zhǔn)溶液后的樣品總濃度必須在試劑盒的線性范圍內(nèi)。,21,回收率計(jì)算公式,用真正測(cè)得的結(jié)果與其理論值比較計(jì)算它們的回收率。100±10%,22,回收率是反應(yīng)準(zhǔn)確度關(guān)系的參數(shù),2、精密度,在同一條件下,用同一方法對(duì)某一物理量測(cè)定多次時(shí),所測(cè)得各數(shù)值間相互接近的程度,常以標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）、變異系數(shù)（CV）表示。SD、CV越小說明精密度越高。精密度用以表示測(cè)量

11、方法的重現(xiàn)性。用于評(píng)價(jià)試劑盒的重復(fù)性。,23,計(jì)算方法,Mean（AVERAGE）（ 所有測(cè)值均值）SD（STDEV）（標(biāo)準(zhǔn)偏差）CV（變異系數(shù)）,24,準(zhǔn)確度和精密度的關(guān)系,,3、線性范圍,線性（Linearity） ---曲線接近直線程度的量試劑線性：檢測(cè)有意義的上限 ---它能判斷測(cè)得的濃度或活性值與設(shè)定的濃度或活性值之間的比例關(guān)系的范圍。,26,4、靈敏度（se

12、nsitivity）,分析靈敏度（空白限）：來源于零的在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有意義的最小檢測(cè)濃度，即小于此濃度的可以認(rèn)為是零。功能靈敏度：檢測(cè)系統(tǒng)或方法測(cè)值有意義的最低值，定量低限。一般分析靈敏度比功能靈敏度高10倍左右,27,5.特異性（specificity）,指在分析測(cè)定中只對(duì)某一成分起反應(yīng)，其它物質(zhì)對(duì)反應(yīng)毫無影響或基本無影響。在臨床中，標(biāo)本中的溶血、膽紅素、脂血或其它藥物和食物成分時(shí)干擾測(cè)定的主要因素。部分影響可通過雙波長(zhǎng)，或改進(jìn)檢

13、測(cè)方法來消除或降低。,抗干擾,干擾是指在測(cè)定某分析物的濃度或活性時(shí)，受另一非分析物影響而導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果增高(正干擾)或降低(負(fù)干擾)。內(nèi)源性干擾---標(biāo)本中存在的外源性干擾 ---外界污染的,29,外源性干擾,標(biāo)本收集中的添加物如抗凝劑，防腐劑，穩(wěn)定劑，容器和塞子的污染等。試劑中的雜質(zhì)和雜酶等。,30,內(nèi)源性干擾,血清中固有的代謝產(chǎn)物，如肌酐酶法測(cè)定時(shí)血清中的肌酸等。病理情況下生成的：如膽紅素，脂類，蛋白質(zhì)，血紅蛋白等。

14、治療藥物，腸道營(yíng)養(yǎng)、Vc等。,31,6、相關(guān)系數(shù)和回歸方程,用于評(píng)價(jià)兩種方法結(jié)果是否具有可比性。通常用相關(guān)系數(shù)和回歸方程來表示。X和Y在坐標(biāo)系上形成一個(gè)點(diǎn)，通過兩者之間形成的關(guān)系，分析兩者的相關(guān)性。 r是樣本的相關(guān)系數(shù)(0<r<1)，越接近一條直線說明兩者的相關(guān)性越好。0.90<r<0.95表示兩者形成一條平滑的直線。0.95<r<0.99表示一條良好的直線。

15、 回歸方程：表示兩者之間的相互依存的數(shù)量關(guān)系。Y=AX+B 。主要用于準(zhǔn)確度的檢測(cè)。 對(duì)于生化試劑遇到：各試劑或各種方法間相關(guān)的比較。,7、質(zhì)控工作中涉及的概念及理解,質(zhì)控分為：室內(nèi)質(zhì)控室間質(zhì)控,7．1 室內(nèi)質(zhì)控（IQC）,為監(jiān)測(cè)和評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制，提高常規(guī)工作中批間和日間標(biāo)本監(jiān)測(cè)的一致性。 選擇穩(wěn)定均一的血清作為質(zhì)控血清。血清復(fù)溶后確保在測(cè)量期限內(nèi)儲(chǔ)存條件恒定。每天將質(zhì)控血清隨同病人標(biāo)本同時(shí)測(cè)

16、定。以均值X為靶線，X±SD為警戒線，建立質(zhì)控圖。如果測(cè)量值在2SD以外則為失控。SD=CV×X ×100 （CV為給定值）。,室內(nèi)質(zhì)控圖,7．2 室間質(zhì)評(píng)（EQC）,由實(shí)驗(yàn)室以外的某個(gè)機(jī)構(gòu)（通常為衛(wèi)生部和各省、市或自治區(qū)的臨床檢驗(yàn)中心）對(duì)各實(shí)驗(yàn)室常規(guī)工作的質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè)和評(píng)定，以評(píng)價(jià)各室工作質(zhì)量，用以校正和提高各室常規(guī)檢測(cè)的準(zhǔn)確度，建立起各實(shí)驗(yàn)室之間的可比性。每年定期由各地臨檢中心發(fā)放質(zhì)控物，由各

17、個(gè)實(shí)驗(yàn)室在規(guī)定的日期內(nèi)檢測(cè)，并在規(guī)定的日期內(nèi)將結(jié)果報(bào)到臨檢中心，臨檢中心對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算出各室間的偏差以及VIS 成績(jī)回報(bào)給各實(shí)驗(yàn)室。室間質(zhì)評(píng)需要有良好的室內(nèi)質(zhì)控的基礎(chǔ)。偏差：值測(cè)量值與平均值之差。 （V）偏差（偏倚）%=（測(cè)量結(jié)果 – 靶值）×100變異指數(shù)：VIVI = VIS =V/CCV CCV為選定的變異系數(shù)，為常數(shù)。不同的項(xiàng)目值不同。VIS≤80為優(yōu)秀， 80<VIS ≤150 為及

18、格， 大于150為不及格。,7．3 造成偏差的原因,一、隨機(jī)誤差1．校準(zhǔn)物使用不當(dāng)。 （包括：復(fù)溶是否準(zhǔn)確，保存時(shí)間是否超過期限，方法選擇是否與試劑盒推薦方法一致）2．試劑保存不當(dāng)，未按照試劑保存條件要求，引起試劑受污染或失效。導(dǎo)致反應(yīng)不完全或者反應(yīng)底物耗盡。3．儀器使用不當(dāng)。如：未能按期、按時(shí)作儀器的維護(hù)保養(yǎng)。出現(xiàn)儀器的濾光片、透光窗或比色杯受污染，或電源、光源不穩(wěn)定，使測(cè)定的吸光度不穩(wěn)定。4．操作人員的偶然誤差。,

19、7．3 造成偏差的原因,二、系統(tǒng)誤差1．儀器系統(tǒng)誤差。如：儀器加樣方式，儀器提供反應(yīng)物溫度的精確度等。2．方法學(xué)的缺陷。如副反應(yīng)的發(fā)生，試劑的特異性差，導(dǎo)致標(biāo)本中非測(cè)定成分的干擾。3．操作誤差，在正常的操作條件下，實(shí)驗(yàn)室操作人員的操作規(guī)程與實(shí)驗(yàn)條件存在差異而引起的誤差。降低偏差的方法：1．加強(qiáng)各實(shí)驗(yàn)室操作人員的標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程。認(rèn)真做好室內(nèi)質(zhì)控的記錄和檢測(cè)。及時(shí)發(fā)現(xiàn)和解決失控的根本原因。2．有效避免操作中的交叉污染，及時(shí)