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1、動(dòng)物肝臟中動(dòng)物肝臟中DNADNA的提取及檢測(cè)的提取及檢測(cè)一、前言一、前言脫氧核糖核酸脫氧核糖核酸脫氧核糖核酸(DNA,為英文Deoxyribonucleicacid的縮寫(xiě)),又稱(chēng)去氧核糖核酸,是脫氧核糖核酸染色體的主要化學(xué)成分,同時(shí)也是組成基因的材料。有時(shí)也被稱(chēng)為“遺傳微?!保蚴窃诜敝尺^(guò)程中,父代會(huì)把它們自己DNA的一部分復(fù)制傳遞到子代中,從而完成性狀的傳播。DNA是高分子聚合物,DNA溶液為高分子溶液,具有很高的粘度,可被甲基綠染
2、成綠色。DNA對(duì)紫外線(xiàn)(260nm)有吸收作用,利用這一特性,可以對(duì)DNA進(jìn)行含量測(cè)定。當(dāng)核酸變性時(shí),吸光度升高,稱(chēng)為增色效應(yīng);當(dāng)變性核酸重新復(fù)性時(shí),吸光度又會(huì)恢復(fù)到原來(lái)的水平。較高溫度、有機(jī)溶劑、酸堿試劑、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子變性,即DNA雙鏈堿基間的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)—也稱(chēng)為DNA的解螺旋。在細(xì)胞內(nèi),DNA能與蛋白質(zhì)結(jié)合形成染色體,整組染色體則統(tǒng)稱(chēng)為染色體組。對(duì)于人類(lèi)而言,正常的體細(xì)中含有46條染色體。染色體在細(xì)胞
3、分裂之前會(huì)先在分裂間期完成復(fù)制,細(xì)胞分裂間期又可劃分為:G1期DNA合成前期、S期DNA合成期、G2DNA合成后期。對(duì)于真核生物,如動(dòng)物、植物及真菌而言,染色體主要存在于細(xì)胞核內(nèi);而對(duì)于原核生物,如細(xì)菌而言,則主要存在于細(xì)胞質(zhì)中的擬加夫(E.gaff)發(fā)現(xiàn)不同物種DNA的堿基組成不同,但其中的腺嘌呤數(shù)等于其胸腺嘧啶數(shù)(A=T),鳥(niǎo)嘌呤數(shù)等于胞嘧啶數(shù)(G=C),因而嘌呤數(shù)之和等于嘧啶數(shù)之和,一般用幾個(gè)層次描繪DNA的結(jié)構(gòu)。濃鹽法從動(dòng)物組織
4、中提取濃鹽法從動(dòng)物組織中提取DNADNA核酸和蛋白質(zhì)在生物體中常以核蛋白(DNPRNP)的形式存在,其中DNP能溶于水及高濃度鹽溶液,但在0.14M的鹽溶液中溶解度很低,而RNP則可溶于低鹽溶液,因此可利用不同濃度的NaCl溶液將其從樣品中分別抽提出來(lái)。將抽提得到的DNP用SDS處理可將其分離DNA和蛋白質(zhì),用氯仿異戊醇將蛋白質(zhì)沉淀除去可得DNA上清,加入冷乙醇即可將其呈纖維狀析出。肝臟細(xì)胞肝臟細(xì)胞肝臟是由肝細(xì)胞組成,肝細(xì)胞極小,肉眼看
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